PCR结果解读

Tm值就是DNA熔解温度，指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G-C含量越高，Tm值越高，成正比关系。

影响Tm值的因素

①DNA碱基组成:C-G含量越多，Tm值越高;A-T含量越多，Tm值越低。

②溶液的离子强度:在低离子强度中，Tm较低，而且解链的温度范围较宽;在高离子强度中，Tm值较高，解链的温度范围较窄。

③PH值:溶液的PH值在5~9范围内，Tm值变化不明显，当PH>11或PH<4时，Tm 值变化明显。

④变性剂:各种变性剂主要是干扰碱基堆积力和氢键的形成而降低Tm值。

⑤DNA双链本身的长度。

溶解曲线相关问题：

这个一般是用SYBY Green作为荧光染料的时候需要做的工作

因为SYBY Green染料是非特异的染料只要有扩增染料就可以镶嵌在双链

中发出荧光。我们做溶解曲线是为了观察我们扩增发出荧光的片段是不是我们需

要的产物。如果溶解曲线做出来只有单峰 且出锋位置是你的退火温度 那么这

个是你的产物发出的荧光 实验结果有效。如果出现多锋或退火温度不对 那么

这个实验结果是不可信的 你需要再次调整