器皿的洗涤包扎灭菌
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微生物基本实验技术
玻璃器皿的洗涤、 玻璃器皿的洗涤、包扎和灭菌
指导教师： 指导教师：袁勇军 张捷 管峰
一、实验目的
1、掌握玻璃器皿的洗涤和包扎方法； 2、了解玻璃器皿的灭菌方法和原理
二、实验原理
为确保实验顺利地进行，要求把实 为确保实验顺利地进行， 验所用的玻璃器皿清洗干净。 验所用的玻璃器皿清洗干净。 为保持灭菌后和无菌状态，需要对 为保持灭菌后和无菌状态， 培养皿、吸管等进行包扎， 培养皿、吸管等进行包扎，
3、试管和三角瓶等的包扎 试管口和三角瓶口用棉花塞（单用棉花或纱
布包棉花） 布包棉花）
棉花塞与管口和瓶口的外面可以用报纸与 细线扎好。 细线扎好。
三、高压蒸汽灭菌法
（1）加水
关好排水阀门，放入水至标度。注意水量一定要加足，否 则容易造成事故。
（2）旋紧灭菌锅 将须要灭菌的器材、培养基等装入灭菌锅中，加 盖密封。先将每个螺旋旋转到一定程度（不要太 紧），然后再旋紧相对的两个螺旋，以达到平衡 旋紧，否则易造成漏气，达不到彻底灭菌的目的 。
（3）通电加温，排冷空气 通电加温， 通电加温 通常当压力表指针升至0.05MPa时，打开排气阀 放气，待压力表指针降至零点一小段时间后，再 关闭排气阀门。 （4）恒温灭菌 恒温灭菌 • 0.1MPa锅内温度相当于120℃～121℃此时开始计 算灭菌时间，保持20分钟。
（5）降温
自然降温或锅内压力低于0.05MPa时打开 打开排气阀降温。注意勿使排气过快，否 则会使锅内的培养基沸腾而冲脱或沾染棉 花塞。
三、实验器材 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、培养 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、报纸等
四、操作步骤
）、玻璃器皿的洗涤方法 （一）、玻璃器皿的洗涤方法 1、新玻璃器皿的洗涤
在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干 2%的盐酸溶液中浸泡数小时 的盐酸溶液中浸泡数小时， 本次实验不要求） 净（本次实验不要求）
2、旧玻璃器皿的洗涤 试管、培养皿、三角wenku.baidu.com：
洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗
装有固体培养基：
刮掉，洗涤
带病原菌培养物的器皿：
先高压蒸汽灭菌，倒去培养物后再洗涤
（二）玻璃器皿的包扎
培养皿的包扎 1、培养皿的包扎 一般以5 一般以5-8套培养皿做一包 吸管的包扎 2、吸管的包扎 准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 0.5cm 塞一小段1.5cm长的棉花， 1.5cm长的棉花 ，塞一小段1.5cm长的棉花，然后将吸管尖端斜放 在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角， 30度角 在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角，并将左 端多余的一段纸覆折在吸管上， 端多余的一段纸覆折在吸管上，再将整根吸管卷 入报纸，右端多余的报纸打一小结。 入报纸，右端多余的报纸打一小结。
（6）开锅。当锅内蒸汽完全排尽时即压力表指针降 到零时，打开锅盖，取出灭菌物品： （7）排水。最后将高压灭菌器内的剩余水排出。 （8）观察灭菌效果。把灭菌培养基放入25℃温箱 中，培养48小时观察灭菌效果。 48小时后不见杂 菌生出，便证明培养基已达到灭菌目的，可以使 用。
玻璃器皿的洗涤、 玻璃器皿的洗涤、包扎和灭菌
指导教师： 指导教师：袁勇军 张捷 管峰
一、实验目的
1、掌握玻璃器皿的洗涤和包扎方法； 2、了解玻璃器皿的灭菌方法和原理
二、实验原理
为确保实验顺利地进行，要求把实 为确保实验顺利地进行， 验所用的玻璃器皿清洗干净。 验所用的玻璃器皿清洗干净。 为保持灭菌后和无菌状态，需要对 为保持灭菌后和无菌状态， 培养皿、吸管等进行包扎， 培养皿、吸管等进行包扎，
3、试管和三角瓶等的包扎 试管口和三角瓶口用棉花塞（单用棉花或纱
布包棉花） 布包棉花）
棉花塞与管口和瓶口的外面可以用报纸与 细线扎好。 细线扎好。
三、高压蒸汽灭菌法
（1）加水
关好排水阀门，放入水至标度。注意水量一定要加足，否 则容易造成事故。
（2）旋紧灭菌锅 将须要灭菌的器材、培养基等装入灭菌锅中，加 盖密封。先将每个螺旋旋转到一定程度（不要太 紧），然后再旋紧相对的两个螺旋，以达到平衡 旋紧，否则易造成漏气，达不到彻底灭菌的目的 。
（3）通电加温，排冷空气 通电加温， 通电加温 通常当压力表指针升至0.05MPa时，打开排气阀 放气，待压力表指针降至零点一小段时间后，再 关闭排气阀门。 （4）恒温灭菌 恒温灭菌 • 0.1MPa锅内温度相当于120℃～121℃此时开始计 算灭菌时间，保持20分钟。
（5）降温
自然降温或锅内压力低于0.05MPa时打开 打开排气阀降温。注意勿使排气过快，否 则会使锅内的培养基沸腾而冲脱或沾染棉 花塞。
三、实验器材 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、培养 高压蒸汽灭菌锅、试管、三角瓶、 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、 皿和吸管、棉线、纱布、棉花、报纸等
四、操作步骤
）、玻璃器皿的洗涤方法 （一）、玻璃器皿的洗涤方法 1、新玻璃器皿的洗涤
在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干 2%的盐酸溶液中浸泡数小时 的盐酸溶液中浸泡数小时， 本次实验不要求） 净（本次实验不要求）
2、旧玻璃器皿的洗涤 试管、培养皿、三角wenku.baidu.com：
洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗
装有固体培养基：
刮掉，洗涤
带病原菌培养物的器皿：
先高压蒸汽灭菌，倒去培养物后再洗涤
（二）玻璃器皿的包扎
培养皿的包扎 1、培养皿的包扎 一般以5 一般以5-8套培养皿做一包 吸管的包扎 2、吸管的包扎 准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 准备好干燥的吸管，在距其粗头顶端约0.5cm处 0.5cm 塞一小段1.5cm长的棉花， 1.5cm长的棉花 ，塞一小段1.5cm长的棉花，然后将吸管尖端斜放 在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角， 30度角 在旧报纸条的近左端，与报纸成30度角，并将左 端多余的一段纸覆折在吸管上， 端多余的一段纸覆折在吸管上，再将整根吸管卷 入报纸，右端多余的报纸打一小结。 入报纸，右端多余的报纸打一小结。
（6）开锅。当锅内蒸汽完全排尽时即压力表指针降 到零时，打开锅盖，取出灭菌物品： （7）排水。最后将高压灭菌器内的剩余水排出。 （8）观察灭菌效果。把灭菌培养基放入25℃温箱 中，培养48小时观察灭菌效果。 48小时后不见杂 菌生出，便证明培养基已达到灭菌目的，可以使 用。