发酵豆粕各项指标检测方法与标准 (1)

发酵豆粕各项指标检测方法与标准

发酵工艺2010-12-31 15:16:17 阅读86 评论0 字号：大中小订阅

1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰份、钙和磷的分析方法全部采用国标法。

2、总有机酸测定采用氢氧化钠滴定的方法和乳酸测定采用气象色谱。

3、pH的测定采用玻璃电极pHS-3C型pH计测定。

4、可溶蛋白的测定方法

5、小肽含量的测定

水份的测定

水份测定直接参见国标

测定完水分后的样品需要测定其中的总有机酸的含量，其数值为A，并计算有机酸的挥发量。

水份含量的计算时应当扣除这部分有机酸的挥发量，否则会出现水分超标现象。

总有机酸检测

试剂：NaOH标准溶液（邻苯二甲酸氢钾标定），酚酞指示剂

仪器:磁力搅拌器离心机

方法：

（1）取发酵后鲜样品15g 置于150ml烧杯中加入溶于100ml去离子水，在磁力搅拌器上浸提30min。（2）取部分浸提样离心10min(3000r/min)。

（3）取上清液15ml, 加30ml去离子水稀释（以消除底色的影响），加酚酞指示剂四滴，用0.1molNaOH 标准溶液滴定，并记录到终点消耗NaOH体积。（终点到溶液呈现粉红）

计算

乳酸（％）＝N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g

N(NaOH):NaOH标准溶液的浓度；

V(NaOH) ：消耗NaOH标准溶液体积；

0.09008：乳酸的毫克当量。

0.1mol氢氧化钠的配制与标定

1、配制：称取9.6g氢氧化钠，溶于100ml水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液，注入2000ml无二氧化碳水中(将去离子水煮沸5分后冷却)，摇匀。

2、标定

称取0.67g于105~110℃烘至恒重的基准的邻苯二甲酸氢钾，准确至0.0001g，溶于50ml的无二氧化碳水中，加4滴酚酞指示剂（0.1％），用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时作空白试验。

3、计算

氢氧化钠标准溶液的浓度按下式计算

c（NaOH）=m/（V1-V2）×0.2042

式中c（NaOH）——氢氧化钠标准溶液之物质的量的浓度，mol/l；

V1——滴定用邻苯二甲酸氢钾之用量，ml；

V0——空白试验氢氧化钠溶液之用量，ml；

m——邻苯二甲氢钾之质量，g；

• 0.2042——与1.00ml氢氧化钠标准液[c（NaOH）=1.000mol/l]相当的以克表示的邻苯二甲氢钾之用量。

0.1％酚酞指示剂的配制：称取1.000克酚酞，溶解与100ml95％的试剂酒精中，混匀即得。

乳酸测定

称取样品10g与50ml的烧杯中，移取30ml去离子水，在磁力搅拌器上搅拌30min，在3000r/min离心10min，取上清液利用气相色谱或液相色谱测定乳酸含量。

pH的测定

称取样品10g与50ml的烧杯中，移取15ml去离子水，搅拌30min，用pHS-3C型pH计测定溶液的pH 值。

或者用精密pH试纸测试。

可溶性蛋白的测定

根据AOCSBa11-65测定蛋白质溶解指数的方法

称取20g样品于300ml的匀浆杯中、量取50ml 37＋1℃的去离子水于匀浆杯中，将匀浆杯放在37℃的水浴中，浸泡搅拌5min，在内切式组织匀浆机上匀浆10min，从匀浆杯中取出浆液移入600ml烧杯中，待浆液分层后，移出40ml上清液注入50ml离心管中，并在2700r/min的转速下离心10min，移取15ml上清液于凯氏烧瓶中，测定上清液中蛋白质含量和样品总蛋白含量，计算溶解可溶性蛋白质的数量。

小肽含量测定方法

三氯乙酸（TCA）法

三氯乙酸法的原理是利用大分子的蛋白质在TCA溶液中沉淀，除去酸不溶蛋白质，然后测定酸溶蛋白含量。国外大量资料表明在蛋白质酶水解的研究中测定水解度，通常在酶解液中加入TCA溶液，是为水解的大分子蛋白质沉淀，而与小分子的酸溶蛋白成分，即肽类和FAA离开，测定酸溶蛋白占总蛋白的含量，求得水解度，即酸溶蛋白占总蛋白的百分比。

粗蛋白≥50％小肽（1000d以下）≥10％乳酸≥3.5％水分≤10％钙0.5－0.54％总磷≥0.74％/gm益生菌≥20亿/克蛋白酶≥150粗脂肪≤5.0％粗纤维≤3.0％无氮浸出物≤28％粗灰分≤6.0％猪消化能（kcal/kg）3980猪代谢能（kcal/kg）3600猪净能（kcal/kg）2320禽代谢能（kcal/kg）2570鱼消化能（kcal/kg）3200奶牛净能（kcal/kg）1090天门冬氨酸Asp 5.42%赖氨酸Lys 3.03%蛋氨酸0.65%苏氨酸Thr 2.05%精氨酸Arg 3.50%甘氨酸Gly 2.25%丝氨酸Ser 2.43%异亮氨酸Ile 2.21%苯丙氨酸Phe 2.37%缬氨酸Val 2.36%组氨酸His 1.24%谷氨酸Glu 9.84%丙氨酸Ala 2.30%脯氨酸Pro 2.04%色氨酸Trp 0.50%亮氨酸Leu 3.76%

项目/种类豆粕膨化大豆发酵豆粕

工艺压榨/浸提热加工发酵、酶解

粗蛋白% 44 36 50

粗纤维% 6-7 5 5

粗灰分% 6.5 5 6

酸碱度7.0 7.0 4.0-4.8

细胞壁破裂没有破壁部分破壁100%破壁

小分子蛋白含量% 11.0 9.0 22

胰蛋白酶抑制剂5-10mg/Kg 5-20mg/Kg 1mg/Kg

脲酶mg/Kg

0.4 / <0.02

棉子糖水苏四糖12-15 9-12 <0.05

大豆球蛋白ppm 高高<10

半球蛋白ppm 高高<1

外源凝集素ppm 100-300 100-300 <1

气味豆腥味豆腥味发酵香味颗粒度大颗粒大颗粒细粉

流散性中等不好佳