实验三 酸性磷酸酶的显示方法2007.9.10

学号姓名班级细胞生物学实验报告

实验三酸性磷酸酶的显示方法

一、实验原理

酸性磷酸酶分解磷酸脂而释放出磷酸基。在PH5.0的环境中，磷酸基与铅盐反应形成磷酸铅。但磷酸铅是无色的，所以再与硫化铵作用，形成棕黑色的硫化铅沉淀，由此就能显示酸性磷酸酶在细胞内的存在与分布。

二、实验步骤

1.取洋葱内表皮（1cm×0.6cm每瓶放3片）沉于10%中性富尔马林液中，4℃下

固定30分钟，（置冰箱贮藏室），对照实验置50℃烘箱中。（加液至青霉素瓶1/3体积）

2.去福尔马林液，自来水漂洗5分钟。（青霉素瓶水加满，换3次）

3.去水，加酸性磷酶作用液，室温下置30分钟。（加液至青霉素瓶1/3体积）

4.去作用液，自来水漂洗10分钟。（青霉素瓶水加满，换3次）

5.去水，加1%硫化铵处理3-5分钟。（加液至青霉素瓶1/3体积）

6.去硫化铵，加水漂洗。（青霉素瓶水加满，换1次）

7.置载玻片上，加盖玻片。

8.显微镜观察（注意液泡中标黑色的小颗粒，表示有酸性磷酸酶的活力）。

三、实验结果（画酸性磷酸酶在细胞中的分布图）

四、结果讨论