维生素B含量测定
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
PHARMACEUTICAL COLLEGE
分析化学实验
药物分析教研室
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
P91实验十四 维生素B12注射液
鉴别、检查和含量测定
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
脏1、、维牛生肉素、B猪12肉主、要蛋来、源牛是奶动和物奶性酪食中物;，存在于动物肝 2、在吸收时需与钙结合才能有利于人体的机能活动; 3、维生素B12能促进红血球的形成和再生，防止贫血； 4、促进儿童发育；能使脂肪、碳水化合物、蛋白质 适宜地为体内所利用。 5、主要用于治疗恶性贫血，与叶酸合用治疗因抗叶 酸药、脂肪泻等引起的巨幼红细胞性贫血。也用于多 发性神经炎、肝炎、肝硬化、白细胞减少症等的辅助 治疗，目前疗效有争议。口服维生素B12仅用于已证 实维生素B12吸收正常的营养性维生素B12缺乏。
一、实验目的：
• 1、掌握Uvmini-1240型的使用方法。 • 2、掌握维生素B12注射液的紫外分光光度
法鉴别及含量测定。 • 3、掌握吸收系数法定量测定的计算公式。 • 4、熟悉绘制吸收曲线的一般方法。
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 二、主要仪器与试药 • 维生素B12注射液、维生素B12对照品 • Mini-1240型紫外-可见分光光度仪、石英比
的吸收度，按其吸收系数E1％1cm=207 计算含量 及标示量百分含量。
紫外分光光度法
源自文库 计算公式
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰：278 nm、361 nm、 550 nm。维生素B12在361 nm的吸收峰干扰因素少，吸收 又最强，中国药典2010版规定：以361 nm处吸收峰的比吸
光系数E1%1 cm值（207）为计算含量依据 本品为注射剂 ，采用紫外吸收系数法测定含量，其计算公式为：
• 按吸收系数法定量计算： C样品（μg/ml）=A361×48.31
见P92
C=ECL
A样品 B12含量= ———— × 100%
A对照
取对照品测 A3紫61外做分对光光照度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 维生素B12是含钴的有机药物； • 为氰深钴红胺色；结晶，又称为红色维生素B12或 • 是唯一含有主要矿物质的维生素。 • 分子量：1355.38 • 分子式：C63H88CoN14O14P
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
PHARMACEUTICAL COLLEGE
五、实验结果
1. 鉴别：维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰： 278 nm、361 nm、550 nm。
2. 检查：A361/ A278 应为1.70-1.88， A361/ A550应 为3.15-3.45 。
3. 含量测定： 4. 吸收系数法：利用上述361nm处测定得到
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 四、实验内容 • 实验原理：维生素B12分子结构中有共轭体系，具有紫
外吸收，故可采用紫外分光光度法鉴别和测定含量。 • 实验步骤： • 1、取B12贮备液（约25 μg/ml），以蒸馏水做空白液
做光谱图（粗扫描），在278nm，361nm，550nm处 有吸收峰。 • 2、精测：在以上278nm，361nm，550nm波长分别 ±1 范围内测定吸光度（每转换一次波长以水做空白） 记录各最大吸收值。
色皿、50ml容量瓶，5ml 吸量管
精密仪器，小心！
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 三、实验准备 • 1. 用标示量0.5mg/ml维生素B12配制贮备液
（样品）：吸量管精密量取2.5ml于50ml容 量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀， 作为贮备液（约25 μg/ml）。 • 2 . 25 μg/ml对照品溶液（实验室提供）
•
六、思考题
• 如果取注射液水2ml稀释30倍，在361nm处 测定A值为0.698，试计算注射液每1ml含 B12多少？如果每1ml标示量为1mg，则计 算标示量％
紫外分光光度法
紫外分光光度法
仪器的使用方法
开机：打开电源，仪器初始化，约3min完成，然后预热 大约0.5h。 方法菜单：
1，光度值 2，光谱 3，定量 4，选购程序包 5，系统设计 ------------------------------------------------------输入项目号
参数 IC包 文件发送 PC控制
分析化学实验
药物分析教研室
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
P91实验十四 维生素B12注射液
鉴别、检查和含量测定
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
脏1、、维牛生肉素、B猪12肉主、要蛋来、源牛是奶动和物奶性酪食中物;，存在于动物肝 2、在吸收时需与钙结合才能有利于人体的机能活动; 3、维生素B12能促进红血球的形成和再生，防止贫血； 4、促进儿童发育；能使脂肪、碳水化合物、蛋白质 适宜地为体内所利用。 5、主要用于治疗恶性贫血，与叶酸合用治疗因抗叶 酸药、脂肪泻等引起的巨幼红细胞性贫血。也用于多 发性神经炎、肝炎、肝硬化、白细胞减少症等的辅助 治疗，目前疗效有争议。口服维生素B12仅用于已证 实维生素B12吸收正常的营养性维生素B12缺乏。
一、实验目的：
• 1、掌握Uvmini-1240型的使用方法。 • 2、掌握维生素B12注射液的紫外分光光度
法鉴别及含量测定。 • 3、掌握吸收系数法定量测定的计算公式。 • 4、熟悉绘制吸收曲线的一般方法。
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 二、主要仪器与试药 • 维生素B12注射液、维生素B12对照品 • Mini-1240型紫外-可见分光光度仪、石英比
的吸收度，按其吸收系数E1％1cm=207 计算含量 及标示量百分含量。
紫外分光光度法
源自文库 计算公式
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰：278 nm、361 nm、 550 nm。维生素B12在361 nm的吸收峰干扰因素少，吸收 又最强，中国药典2010版规定：以361 nm处吸收峰的比吸
光系数E1%1 cm值（207）为计算含量依据 本品为注射剂 ，采用紫外吸收系数法测定含量，其计算公式为：
• 按吸收系数法定量计算： C样品（μg/ml）=A361×48.31
见P92
C=ECL
A样品 B12含量= ———— × 100%
A对照
取对照品测 A3紫61外做分对光光照度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 维生素B12是含钴的有机药物； • 为氰深钴红胺色；结晶，又称为红色维生素B12或 • 是唯一含有主要矿物质的维生素。 • 分子量：1355.38 • 分子式：C63H88CoN14O14P
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
PHARMACEUTICAL COLLEGE
五、实验结果
1. 鉴别：维生素B12吸收光谱上有三个吸收峰： 278 nm、361 nm、550 nm。
2. 检查：A361/ A278 应为1.70-1.88， A361/ A550应 为3.15-3.45 。
3. 含量测定： 4. 吸收系数法：利用上述361nm处测定得到
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 四、实验内容 • 实验原理：维生素B12分子结构中有共轭体系，具有紫
外吸收，故可采用紫外分光光度法鉴别和测定含量。 • 实验步骤： • 1、取B12贮备液（约25 μg/ml），以蒸馏水做空白液
做光谱图（粗扫描），在278nm，361nm，550nm处 有吸收峰。 • 2、精测：在以上278nm，361nm，550nm波长分别 ±1 范围内测定吸光度（每转换一次波长以水做空白） 记录各最大吸收值。
色皿、50ml容量瓶，5ml 吸量管
精密仪器，小心！
紫外分光光度法
PHARMACEUTICAL COLLEGE
• 三、实验准备 • 1. 用标示量0.5mg/ml维生素B12配制贮备液
（样品）：吸量管精密量取2.5ml于50ml容 量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀， 作为贮备液（约25 μg/ml）。 • 2 . 25 μg/ml对照品溶液（实验室提供）
•
六、思考题
• 如果取注射液水2ml稀释30倍，在361nm处 测定A值为0.698，试计算注射液每1ml含 B12多少？如果每1ml标示量为1mg，则计 算标示量％
紫外分光光度法
紫外分光光度法
仪器的使用方法
开机：打开电源，仪器初始化，约3min完成，然后预热 大约0.5h。 方法菜单：
1，光度值 2，光谱 3，定量 4，选购程序包 5，系统设计 ------------------------------------------------------输入项目号
参数 IC包 文件发送 PC控制