第六章 药物分析

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五、水解反应
COOH OCOCH3 + Na2CO3 COONa OH + CH3COONa + CO2
COONa OH 2 + H2SO4 2
COOH OH + Na2SO4
2 CH3COONa + H2SO4 → 2 CH3COOH +Na2SO4
阿司匹林, 水解得水杨酸钠与醋酸钠, 酸化生 成水杨酸白色沉淀; 并发生醋酸的臭气 双水杨酯水解后酸化, 生成白色水杨酸沉淀;
一般，制剂不再检查 原料药下的相关杂质，但是阿
司匹林制剂过程中会水解生成水杨酸，所以药典对阿 司匹林制剂也规定检查水杨酸的含量。
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1. 游离水杨酸:
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2. 有关物质:
阿司匹林中“有关物质”系指除“游离水杨 酸”外的合成原料(苯酚)及副产物
OH COO COOH (CH3 CO) 2O OCOCH3 COO COOH
3300~2300
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1760,1690 1610~1460 1310~1180
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红外光谱法—原料药
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八、色谱法
(一) 薄层色谱
个别药物制剂采用 溶剂提取法去除辅 料后IR鉴别;部分药 物制剂采用TLC鉴别: 二氟尼柳, 美洛昔康 等
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S
N O
CH3
酰胺键:
吲哚美辛,吡罗昔康,美洛昔康,尼美舒利,
水解反应及其产物的特性反应——鉴别 水解可快速,定量——含量测定(剩余碱量法) 美洛昔康—— 定过量的氢氧化钠水解
剩余的氢氧化钠用盐酸回滴定
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二、主要理化性质
(三) 吸收光谱特性
红外特征光谱 : 鉴别
HO O
O OH OH
O OH O O
O
OH O O
CH 3
OH
水杨酸
阿司匹林
双水杨酯
布洛芬
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一、典型药物与结构特点
羧基状态 （2）羧基成盐/酯:双氯芬酸钠,双水杨酯
双氯芬酸钠
O OH O O
OH
双水杨酯
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一、典型药物与结构特点
羧基状态 （3）酰胺: 吡罗昔康,美洛昔康
药物名称
•阿司匹林/双水杨酯 •甲芬那酸 •二氟尼柳
特殊杂质
游离水杨酸与有关物质/FeCl3
2.3-二甲基苯胺
有关物质
GC
A.TLC; B.HPLC
•萘普生
•对乙酰氨基酚
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6-甲氧基-2-萘乙酮 氨基酚和对氯苯乙酰胺
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一、阿司匹林与双水杨酯
(一) 阿司匹林与双水杨酯的合成
COOH ONa CO2 ONa H
OCOCH3 COOCO
OCOCH3
醋 酸 苯 酯
水 杨 酸 酐
乙 酰 水 杨 酸 酐
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七、光谱法
(一) 紫外-可见分光光度法
1.
最大吸收波长法:
双氯芬酸钠溶液: 276nm有最大吸收; 吡罗昔康片,含量测定溶液: 243与334nm最大吸收 2. 最大与最小吸收波长法: 布洛芬及制剂氢氧化钠溶液: 265,273nm最大吸收;245,271nm最小 吸收;259nm肩峰 3. 吸光度法: 甲芬那酸盐酸-甲醇溶液: 279与350nm最大吸收。吸光度(20µg/ml)分别: 0.69~0.74与0.56~0.60
O COOH
[O]
HO
COOH
[O]
OH
O HO O COOH
-
OH O
COOH
O
O
或 O+ COOH COOH
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1. 游离水杨酸:
ChP 用水杨酸与 Fe3+ 生成紫堇色配离子的原理, 用
稀硫酸铁铵溶液显色法检查

供试品溶液制备过程中阿司匹林水解
ChP2010采用1%冰醋酸甲醇溶液制备供试品溶液 (防阿司匹林水解); 并用RP-HPLC检查
吡罗昔康,美洛昔康,尼美舒利,对乙酰氨基酚:
酰胺结构, 无明显酸性
O OH O
OH O O
O
CH 3
OH OH
pKa = 4.26
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3.49
邻位效应
2.95
分子内氢键
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二、主要理化性质
美洛昔康
(二) 水解性
酯键: 阿司匹林/双水杨酯 对乙酰氨基酚
O
OH
O N H
N S CH3
酮洛芬
CH3
O
紫外特征光谱 : 鉴别;含量均匀度,溶出度/释放度
(四) 基团/元素特性
酚羟基: 硫:
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对乙酰氨基酚,水杨酸与Fe3+显色——鉴别 美洛昔康热分解后产生的硫化氢 与醋酸铅生成黑色硫化铅——鉴别
二苯甲酮: 酮洛芬与苯肼缩合显色——鉴别
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第二节
鉴别试验
一、与三氯化铁反应 二、缩合反应 三、重氮化-偶合反应
药物特点
作用 临床
抗炎, 抗风湿, 止痛, 退热 关节炎, 发热, 慢性疼痛
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结构特点
基本 结构
理化特性
基本 性质
分析方法
鉴别,检查 含量测定; 体内分析
芳基取代羧酸 酸性; 水解性; Fe3+; UV, IR, LC 游离羧基和苯环 光谱特性 中间体或水解产物 基团(酚)/元素 酸碱滴定; UV; R' R'' HPLC n (硫)特性 COOR R 体内过程与分析
吡罗昔康
美洛昔康
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一、典型药物与结构特点
其他类 对乙酰氨基酚（扑热息痛，泰诺，百服宁）
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二、主要理化性质
(一) 酸性
较强酸性: 原料药可在中性乙醇或甲醇,丙酮等 水溶性有机溶剂中,用氢氧化钠直接滴定
双氯芬酸,布洛芬,酮洛芬,萘普生,吲哚美辛:
羧基不与苯环直接相连, 酸性较弱
1 甲芬那酸------ （ D ） 3 阿司匹林------ （ A ）
2 酮洛芬------ （ C ） 4 对乙酰氨基酚------ （ B ）
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鉴别试验
现有三瓶药物分别为水杨酸（A)，阿司匹林（B）和 对乙酰氨基酚（C)，但瓶上标签脱落，采用适当方法 将三者区分开。
（1）加甲醇溶解，加水与三氯化铁，紫色-----水杨酸 （2）剩下两种药物，加稀盐酸，加热煮沸，放冷后加亚硝酸钠和 碱性β-萘酚，显红色----对乙酰氨基酚
+
COOH OH
COOH (CH3CO)2O OH COOH O HOOC OH O OH OCOCH3
CH3COOH
COOH
HOH
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一、阿司匹林与双水杨酯
(二) 阿司匹林中游离水杨酸与有关物质
1. 游离水杨酸: 酚羟基易被空气(氧)逐渐氧化
生成淡黄,红
棕至深棕色
醌型化合物
HO + OH O COOH COOH COOH O HO
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第六章
芳酸类非甾体抗炎药物的分析
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典型药物的结构与性质 鉴别试验
特殊杂质及其检查法
含量测定 体内药物分析
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概述
Non- Steroid Anti-Inflammatory Drugs
非甾体抗炎药(NSAIDs)是一类不含有甾体骨架的 抗炎药, 是目前临床使用最多的药物种类之一
4.
吸光度比值法:
二氟尼柳盐酸-乙醇溶液: 251与315nm最大吸收 吸光度比值应为4.2~4.6
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七、光谱法
(二) 红外分光光度法
阿司匹林
峰位(cm-1) 归属 3300~2300 vO-H(羧基) 1760, 1690 vC=O(羧酸酯和羧酸) 1610, 1570, vC=C(苯环) 1480, 1460 1310, 1230, vC-O(羧酸酯和羧酸) 1180 775 δ Ar-H(邻位取代苯环)
水 杨 酰 水 杨 酸
OH COOH
乙 酰 水 杨 酰 水 杨 酸
OH
OH CO2
OH COOH
OH COO (CH3 CO) 2O
OCOCH3 COO
苯 酚
水 杨 酸
OH COOH
水 杨 酸 苯 酯
乙 酰 水 杨 酸 苯 酯
(CH3 CO) 2O
OCOCH3
OH COOCO
OH (CH3 CO) 2O
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五、水解反应
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六、特征元素的反应
氯的鉴别——与碱共热分解产生氯化物, 显氯
化物的鉴别反应
双氯芬酸钠: 与碳酸钠炽灼灰化, 加水煮沸, 滤过, 滤液显氯化物鉴别反应
硫的鉴别——经高温分解产生硫化氢气体, 遇
醋酸铅生成硫化铅黑色沉淀
美洛昔康: 试管中炽灼, 产生的气体使湿润的醋酸 铅试纸显黑色
甲芬那酸
（3）二苯甲酮:
酮洛芬
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一、典型药物与结构特点
苯环结构特征
（4）羟基不饱和酮: 吡罗昔康, 美洛昔康
吡罗昔康
美洛昔康
（5）杂环，特殊元素: 吲哚美辛, 吡罗昔康, 美洛昔康
吲哚美辛
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一、典型药物与结构特点
羧基状态 （1）游离: 水杨酸,阿司匹林,双水杨酯,二氟尼柳, 甲芬那酸,布洛芬,酮洛芬,萘普生,吲哚美辛
水解生成水杨酸, 与三氯化铁试液显紫堇色
二氟尼柳 于乙醇中与三氯化铁试液呈深紫色
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一、与三氯化铁反应
2. 酚羟基反应
NHCOCH3 NHCOCH3
3
+ FeCl3 O-
Fe + 3HCl
OH
3
对乙酰氨基酚:水溶液加三氯化铁试液显蓝紫色 吡罗昔康(三氯甲烷): 与三氯化铁显玫瑰红色
四、氧化反应
五、水解反应 六、特征元素反应 七、光谱法 八、色谱法
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一、与三氯化铁反应
1. 水杨酸反应
O OH OH O O O Fe OH
+
FeCl 3
+ H2O
+ 3HCl
中性或弱酸性(pH值4~6)条件下进行, 强酸性 溶液中配位化合物分解 阿司匹林 加水煮沸 双水杨酯 在氢氧化钠试液中煮沸
美洛昔康显淡紫红色 烯醇式羟基具有酚羟基性质,与FeCl3生成红色配位 化合物
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一、与三氯化铁反应
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二、缩合反应
O2N CH3 HO + O NO2 O NH-NH2 NO2 H2 SO4 -H2 O HO O CH3 N N H NO2
酮洛芬的二苯甲酮, 在酸性下与二硝基 苯肼缩合生成橙色
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六、特征元素的反应
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鉴别试验
1
D
2
水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下 FeCl3 反应，生成紫堇色配位化合物。 与______
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鉴别试验
配伍
A 与碳酸钠试液加热溶解，再加过量稀硫酸酸化后生成白色沉淀， 并发出醋酸的臭气
B 加酸水解，在酸性条件下，与亚硝酸钠，碱性β-萘酚反应，显红色 C 加乙醇溶解后，加二硝基苯肼，加热煮沸，放冷即产生橙色沉淀 D 溶于硫酸后，与重铬酸钾反应显深蓝色，随即变为棕绿色。
第六章
芳酸类非甾体抗炎药物的分析
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第六章
掌握: 芳酸类非甾体抗炎药的结构和性质 主要芳酸类药物的鉴别,检查和含
量测定的原理与特点
熟悉: 主要芳酸类非甾体抗炎药物杂质的 结构,危害,检查方法与限度 了解: 影响芳酸类非甾体抗炎药物稳定性 的主要因素,体内样品与临床监测
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第一节
典型药物的结构与性质
一、典型药物与结构特点 二、主要理化性质
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一、典型药物与结构特点
具有苯环和羧基 苯环结构特征
(1)邻羟基苯甲酸类:
R R' R'' n COOR1
水杨酸
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阿司匹林
双水杨酯
二氟尼柳
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一、典型药物与结构特点
苯环结构特征
（2）邻胺基苯甲酸:
八、色谱法
(二) 高效液相色谱法 随着HPLC在药物制剂含量测定 中的大量应用, 更多应用HPLC 进行制剂的鉴别: 阿司匹林等多种制剂均直接取含 量测定项下记录的HPLC色谱图 进行鉴别 当TLC和HPLC均有收载时: 二者 可任选其一。如美洛昔康片的鉴 别
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第三节
特殊杂质及其检查法
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三、重氮化-偶合反应
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四、氧化反应
甲芬那酸: 溶于硫酸, 被重铬酸钾氧化显深蓝
色→随即变为棕绿色
吲哚美辛: 溶液在硫酸酸性下与重铬酸钾溶液
共热, 被氧化显紫色
在盐酸溶液中与亚硝酸钠溶液反应显绿色, 放置后 渐变黄色
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四、氧化反应
偶氮化合物沉淀
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三、重氮化-偶合反应
HO NHCOCH3 + HCl + H2O HO
NH2 HCl + CH3COOH
HO
NH2 HCl +HNO2
HO
N2+Cl- + 2H2O
HO
N2+Cl- +
OH + NaOH
N
N OH
OH
+ NaCl + H2O
对乙酰氨基酚在酸中水解生成对氨基酚, 游离 芳伯氨基与亚硝酸钠试液重氮化, 重氮盐再与 碱性β-萘酚偶合生成红色偶氮化合物