药物分析实验讲义

实验一阿司匹林肠溶片的鉴别、检查与含量测定

一、目的要求

1、掌握比色法检查阿司匹林片剂中游离水杨酸的实验原理。

2、掌握两步滴定法测定阿司匹林片剂含量的实验原理。

3、掌握水杨酸类药物的鉴别、检查与含量测定的操作方法。

二、基本原理

（一）鉴别（三氯化铁反应）

阿司匹林为水杨酸酯类药物，加热水解后产生水杨酸，水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下（适宜pH为4.0~6.0），会与三氯化铁试液反应，生成紫堇色的铁配位化合物。

（二）检查——游离水杨酸（对照法）

阿司匹林生产过程中乙酰化不完全或贮存过程中水解产生的水杨酸对人体有毒性，而且分子中酚羟基在空气中被逐渐氧化成一系列醌型有色物质，使阿司匹林成品变色，因而需加控制。

阿司匹林为水杨酸酯，无游离酚羟基，不能直接与高铁盐作用，而其杂质游离水杨酸含酚羟基，可与高铁盐反应显紫堇色，因此，将适量阿司匹林供试品溶液与一定量水杨酸对照品溶液生成的色泽对比，即可控制阿司匹林中游离水杨酸的含量。该法灵敏，可检测出1 µg 的游离水杨酸。

（三）含量测定——两步滴定法

阿司匹林分子结构中含有酯键，易水解成水杨酸和醋酸，片剂中为防止酯键水解加入少量酒石酸或枸橼酸做稳定剂，因此在片剂中有酸性杂质，含量测定时为消除酸性杂质干扰，采用两步滴定法。

第一步中和，消除酸性杂质（酸性附加剂和降解产物）的干扰

阿司匹林：

水杨酸：

醋酸：

枸橼酸：

第二步水解后剩余滴定

（定量过量）

（剩余）

三、仪器及试药

电热恒温干燥箱，万分之一分析天平，托盘天平（精度0.01 g），称量瓶，称量纸，药匙，量筒（10 mL、50 mL、100 mL），电炉，研钵，烧杯（25 mL），胶头滴管，容量瓶（100 mL），玻璃漏斗，滤纸，纳氏比色管（50 mL），锥形瓶（250 mL），酸滴定管，碱式滴定管，水浴锅，温度计，阿司匹林肠溶片，纯化水，乙醇（分析纯），水杨酸（分析纯），酒石酸（分析纯），中性乙醇（分析纯），三氯化铁（分析纯），盐酸（分析纯），硫酸铁铵（分析纯），酚酞（分析纯），氢氧化钠（分析纯)，邻苯二甲酸氢钾（基准试剂），硫酸（分析纯），无水碳酸钠（基准试剂），甲基红（分析纯），溴甲酚绿（分析纯）

四、实验内容与方法

（一）鉴别（三氯化铁反应）

取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.1 g），加水10 mL，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。

（二）检查——游离水杨酸

取本品5片，研细，用乙醇30 mL分次研磨，并移入100 mL容量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即滤过，精密量取滤液6 mL，置50 mL纳氏比色管中，用水稀释至50 mL，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液3 mL，摇匀，30秒内如显色，与对照液（精密量取0.01%水杨酸溶液4.5 mL，加乙醇3 mL，0.05％酒石酸溶液1 mL，用水稀释至50 mL，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液3 mL，摇匀）比较，不得更深。（限量1.5%）

（三）含量测定——两步滴定法

取本品30片，研细，用中性乙醇70 mL分数次研磨，并移入100 mL容量瓶中，充分振摇，再用水适量洗涤研钵数次，洗液合并于100 mL容量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液10 mL（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇20 mL，

振摇，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1 mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1 mol/L）40 mL。置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05 mol／L）滴定，并将滴定结果用空白实验校正。每l mL氢氧化钠滴定液（0.1 mol／L）相当于18.02 mg的C9H804。

中国药典（2005）规定，本品含阿司匹林(C9H804)应为标示量的95.0％～105.0％。

阿司匹林片剂含量计算公式：

标示量（%）=

式中，V0为空白试验时消耗硫酸滴定液的体积（mL）；V为样品测定时消耗硫酸滴定液的体积（ml）；F为硫酸滴定液的浓度校正因数；T为滴定度（即18.02 mg）；m为供试品片粉的取样量（g）；W为供试品的平均片重（g）；标示量即片剂的规格量。

五、注意事项

1、中和滴定速度稍快，避免阿司匹林在碱中水解；注意旋摇，防止局部过浓。

2、第一步中和时以溶液出现粉红色30秒不退即可，消耗的氢氧化钠不必计量。

3、加碱、加热水解阿司匹林应不时振摇，保证水解完全；然后迅速放冷，尽量避免碱液在受热时吸收二氧化碳。

六、思考题

1、在本实验中，中性乙醇对什么指示液显中性？

2、特殊杂质水杨酸的限量是多少？

3、为什么阿司匹林制剂不可以用直接滴定法来测定其含量？

4、阿司匹林两步滴定法为什么要做空白实验，目的是要消除什么？

附：实验准备

1、三氯化铁试液：取三氯化铁9 g，加水使溶解成100 mL，即得。

2、新制的稀硫酸铁铵溶液：取1 mol/L盐酸溶液1 mL，加硫酸铁铵指示液2 mL后再加水适量使成100 mL。

3、1 mol/L盐酸溶液：取盐酸90 mL，加水适量使成1000 mL，摇匀。

4、硫酸铁铵指示液：取硫酸铁铵8 g，加水100 mL使溶解，即得。

5、0.01％水杨酸溶液：取水杨酸0.01 g加水100 mL溶解即得。

6、0.05%酒石酸溶液：取酒石酸0.05 g加水100 mL溶解即得。

7、酚酞指示液：取酚酞1 g，加乙醇100 mL使溶解，即得。

8、中性乙醇：取95%乙醇100 mL于烧杯中，加入1～2滴酚酞指示液，用0.1 mol/L氢氧化钠溶液滴定至微红色，即得。

9、0.1 mol/L氢氧化钠滴定液：取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6 mL，加新沸过的冷水使成