Chap生物制品分析概论
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生物制品分析概论资料
3）用生理氯化钠溶液充分浸泡琼脂糖胶板，以除去未结合蛋白。
4）将浸泡好的琼脂糖凝胶板放入0.5%氨基黑溶液中染色，用脱 色液脱色至背景无色，沉淀线呈清晰蓝色为止。
应仅与抗人血清或血浆产生沉淀线，与抗马、抗猪、 抗牛、抗羊血清或血浆不产生沉淀线。
鉴别试验
沈阳药科大学
系将供试品通过电泳分离成区带的各抗原，然后与
鉴别试验
ChP人血白蛋白的鉴别
沈阳药科大学
1）将完全溶胀的1.5%琼脂糖溶液倒于水平板上（每平方厘米加 0.19ml琼脂糖），凝固后打孔，直径3mm，孔距3mm（方阵型）。
2）中央孔加入抗血清，周边孔加入供试品溶液，并留一孔加入
免疫双扩散法
相应阳性对照血清。每孔加样20μ l，然后置水平湿盒中，37℃ 水平扩散24小时。
根据用途分为三类
1）预防类：细菌类疫苗、病毒类疫苗、联合疫苗 2）治疗类：抗毒素及免疫血清、血液制品、细胞因子及DNA重组技术制品 和单克隆抗体
3）诊断类：体内诊断类、体外诊断类
根据所用材料、制法或用途分为以下几类：
一、分类
疫苗类药物
指用病毒或立克次体接种于动物、 鸡胚，或经组织培养后加以处理 制造而成。
沈阳药科大学
安全性
使用安全，副作用小。
使用后能产生相应效力。 02
有效性
制品的生产工艺、储存条件、 成品的药效、稳定性、外观、 包装、使用方法和价格可接受。
03
可接受性
沈阳药科大学
CONTENTS
第三节
3
鉴别试验
鉴别试验
沈阳药科大学
免疫双扩散法
01 02
免疫电泳法
免疫印迹法
03
04
免疫斑点法
Chap20生物制品分析概论
20
a
无菌试验 基因工程药物中可能杂质与污染物检查
外源性DNA测定、宿主细胞蛋白质 致突变试验 生殖毒性试验
21
a
第三节 常用定量分析法
22
a
23
a
24
a
25
a
色谱法
1．反相高效液相色谱法(RP-HPLC) 以(C4、C8、C18)烷基硅烷键合相为柱填料，以 甲醇-水、乙腈-水或甲醇、乙腈与缓冲液构成的 溶液为流动相，以紫外、荧光或电化学检测器为
低电渗流和吸附现象，可将毛细管内壁涂层。 (2)毛细管凝胶电泳：在毛细管中装入单体，引发
聚合形成凝胶，主要用于测定蛋白质、DNA等 大分子化合物。
37
a
(3)胶束电动毛细管色谱 在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷 基硫酸钠，形成胶束，被分离物质在水相和 胶束相(准固定相)之间发生分配并隨电渗流 在毛细内迁移，达到分离。本模式能用于中 性物质的分离。
18
a
过敏试验
过敏试验是检查异性蛋白的试验。药物中若夹 杂有异性蛋白，在临床使用时易引起病人多种 过敏反应，轻者皮肤出现红斑或丘疹，严重者 可出现窒息、发结、血管神经性水肿、血压下 降，甚至休克和死亡。
19
a
降压物质检查法 (Test for Depressor Substances)
降压物质是指某些药物中含有的能导致血压降低 的杂质，包括组胺、类组胺或其他导致血压降低 的物质。
检测手段，这种色谱体系在生化药物(例如肽 类、氨基酸、蛋白质、多糖等)定量分析中应用 广泛。
26
a
2.高效离子交换色谱法(HPIEC) HPIEC是蛋白质、多肽分离分析中常见的方法之 一。具有较高质量的活性回收。
生物制品概论
22
基因缺失活疫苗：定向缺失与毒力有关的基 因，使丧失毒力而保留免疫原性，可制成基 因缺失活疫苗，如缺失了霍乱毒素A 基因的 霍乱活疫苗。
核酸疫苗：将目的基因和载体质粒重组后直 接用于免疫接种即核酸疫苗。
基因重配疫苗：采用基因重配技术可以制成 减毒（或弱毒）活疫苗，如流感、轮状病毒 活疫苗。
23
冷适主株
野生型病毒
6 : 2 重配物
24
参照保护性抗原决定簇的氨基酸序列，人 工合成与其相同的肽段，以此肽段作为抗原可 制成合成肽疫苗。
抗独特型抗体是针对抗体可变区的抗体， 可模拟抗原表位的构象起到替代抗原作用，亦 可发展为疫苗。
25
不同年龄组人群可使用的疫苗
2019年儿童疫苗规划顾问组会议提出 了在未来10-15年不同年龄组人群可使用的 疫苗，如下表。
疫苗的发展历程见表1
12
表1 我国疫苗发展历程
年代
活疫苗
20世纪 50年代
60年代
70年代
卡介苗 黄热病疫苗 鼠疫疫苗 布病疫苗 炭疽疫苗
脊灰炎疫苗 流感疫苗 麻疹疫苗 痘苗（细胞）
腮腺炎疫苗（鸡胚）
80-90 年代
21世纪
甲型肝炎疫苗 乙型脑炎疫苗 腮腺炎疫苗（细胞） 风疹疫苗 轮状病毒疫苗
麻、风、腮联合疫苗
霍乱毒素b/菌体疫苗
灭活疫苗
百白破联合疫苗 乙脑疫苗（鼠脑） 斑疹伤寒疫苗 森林脑炎疫苗 钩端螺旋体疫苗 乙脑疫苗（细胞）
狂犬病疫苗（细胞） 出血热疫苗 乙脑疫苗（纯化） 狂犬病疫苗（纯化） 甲型肝炎疫苗 流感疫苗（纯化）
亚单位疫苗
基因工程疫苗
流脑多糖疫苗
乙型肝炎疫苗（血源） 伤寒Vi多糖疫苗 百日咳疫苗（无细胞）
基因缺失活疫苗：定向缺失与毒力有关的基 因，使丧失毒力而保留免疫原性，可制成基 因缺失活疫苗，如缺失了霍乱毒素A 基因的 霍乱活疫苗。
核酸疫苗：将目的基因和载体质粒重组后直 接用于免疫接种即核酸疫苗。
基因重配疫苗：采用基因重配技术可以制成 减毒（或弱毒）活疫苗，如流感、轮状病毒 活疫苗。
23
冷适主株
野生型病毒
6 : 2 重配物
24
参照保护性抗原决定簇的氨基酸序列，人 工合成与其相同的肽段，以此肽段作为抗原可 制成合成肽疫苗。
抗独特型抗体是针对抗体可变区的抗体， 可模拟抗原表位的构象起到替代抗原作用，亦 可发展为疫苗。
25
不同年龄组人群可使用的疫苗
2019年儿童疫苗规划顾问组会议提出 了在未来10-15年不同年龄组人群可使用的 疫苗，如下表。
疫苗的发展历程见表1
12
表1 我国疫苗发展历程
年代
活疫苗
20世纪 50年代
60年代
70年代
卡介苗 黄热病疫苗 鼠疫疫苗 布病疫苗 炭疽疫苗
脊灰炎疫苗 流感疫苗 麻疹疫苗 痘苗（细胞）
腮腺炎疫苗（鸡胚）
80-90 年代
21世纪
甲型肝炎疫苗 乙型脑炎疫苗 腮腺炎疫苗（细胞） 风疹疫苗 轮状病毒疫苗
麻、风、腮联合疫苗
霍乱毒素b/菌体疫苗
灭活疫苗
百白破联合疫苗 乙脑疫苗（鼠脑） 斑疹伤寒疫苗 森林脑炎疫苗 钩端螺旋体疫苗 乙脑疫苗（细胞）
狂犬病疫苗（细胞） 出血热疫苗 乙脑疫苗（纯化） 狂犬病疫苗（纯化） 甲型肝炎疫苗 流感疫苗（纯化）
亚单位疫苗
基因工程疫苗
流脑多糖疫苗
乙型肝炎疫苗（血源） 伤寒Vi多糖疫苗 百日咳疫苗（无细胞）
1 生物制品概论课件
• 抗独特型抗体疫苗
• 抗独特型抗体诊断制品
第四节 动物生物制品课程的学习
• 理论学习 45学时 • 30%: 考勤、上课回答问题(课后复习题
或作业) • 70%: 期末考试
• 11-12周“动物生物制品学大实验” • 五个综合实验。
• 学习方法
课后思考题
• 1．基本概念：生物制品学、动物生物制品、 疫苗、活疫苗与灭活疫苗、病毒抗体复合物疫 苗、重组活疫苗、基因工程活载体疫苗、亚单 位疫苗、基因工程亚单位疫苗、抗独特型疫苗、 单价疫苗、多价疫苗与混合疫苗、同源疫苗与 异源疫苗、益生素、副免疫制品
• 生物制品的命名以明确、简练、科学为 基本原则。
• 生物制品名称不采用商品名或代号。
• 采用“动物种名＋病名＋制品种类”的 形式。
• 诊断制剂则在制品种类前加诊断方法名 称
• 共患病一般可不列动物名
三、以生物制品种类的命名原则
• 由特定细菌、病毒、立克次体、螺旋体、 枝原体等微生物以及寄生虫等制成的主 动免疫制品，一律答为疫苗。
2、 抗血清和抗毒素(antiserun and antitoxin)
• 由特定的病原微生物或类毒素、毒素以 及亚单位成分免疫动物，采血制备的血 清。
• 细菌、病毒为抗原制备的称抗血清；用 类毒素和毒素为抗原制备的称抗毒素。
• 注射特定抗血清或抗毒素可预防或治疗 特定病原引起的传染病。
3、 诊断制品(Diagnostic Preparations)
的形式。
• 两种以上血清型制成的多价疫苗，命名 采用“动物种名＋病名＋由若干型名＋x
价疫苗”的形式。
• 制品的制造方法、剂型、灭活剂、佐剂 一般不标明。但为区别已有的制品，可 以标明。
第三节 动物生物制品的研究 状况和发展动向
• 抗独特型抗体诊断制品
第四节 动物生物制品课程的学习
• 理论学习 45学时 • 30%: 考勤、上课回答问题(课后复习题
或作业) • 70%: 期末考试
• 11-12周“动物生物制品学大实验” • 五个综合实验。
• 学习方法
课后思考题
• 1．基本概念：生物制品学、动物生物制品、 疫苗、活疫苗与灭活疫苗、病毒抗体复合物疫 苗、重组活疫苗、基因工程活载体疫苗、亚单 位疫苗、基因工程亚单位疫苗、抗独特型疫苗、 单价疫苗、多价疫苗与混合疫苗、同源疫苗与 异源疫苗、益生素、副免疫制品
• 生物制品的命名以明确、简练、科学为 基本原则。
• 生物制品名称不采用商品名或代号。
• 采用“动物种名＋病名＋制品种类”的 形式。
• 诊断制剂则在制品种类前加诊断方法名 称
• 共患病一般可不列动物名
三、以生物制品种类的命名原则
• 由特定细菌、病毒、立克次体、螺旋体、 枝原体等微生物以及寄生虫等制成的主 动免疫制品，一律答为疫苗。
2、 抗血清和抗毒素(antiserun and antitoxin)
• 由特定的病原微生物或类毒素、毒素以 及亚单位成分免疫动物，采血制备的血 清。
• 细菌、病毒为抗原制备的称抗血清；用 类毒素和毒素为抗原制备的称抗毒素。
• 注射特定抗血清或抗毒素可预防或治疗 特定病原引起的传染病。
3、 诊断制品(Diagnostic Preparations)
的形式。
• 两种以上血清型制成的多价疫苗，命名 采用“动物种名＋病名＋由若干型名＋x
价疫苗”的形式。
• 制品的制造方法、剂型、灭活剂、佐剂 一般不标明。但为区别已有的制品，可 以标明。
第三节 动物生物制品的研究 状况和发展动向
生物制品分析
生物制品分析041410230刘乐随着科学技术的不断进步，生物制品作为药物在日常生活中扮演这越来越重要的作用，生物制品是以微生物、寄生虫、动物毒素、生物组织为起始材料，采用生物学工艺或分离纯化技术制备，并以生物学技术和分析技术控制中间产物和成品质量而制成的生物活化制剂，包括菌苗、疫苗、毒素、类毒素、血清、血液制品、免疫制剂、细胞因子、抗原、单克隆抗体及基因工程产品（DNA重组产品、体外诊断试剂）等。
人类已研制开发并进入临床应用阶段的生物药品，根据其用途不同可分为三大类：基因工程药物、生物疫苗和生物诊断试剂。
这些产品在诊断、预防、控制乃至消灭传染病，保护人类健康中，发挥着越来越重要的作用。
1.生物制品概述1.1定义生物制品是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备的，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。
生物制品不同于一般医用药品，它是通过刺激机体免疫系统,产生免疫物质（如抗体）才发挥其功效，在人体内出现体液免疫、细胞免疫或细胞介导免疫。
生物制品是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防、治疗和诊断。
人用生物制品包括：细菌类疫苗（含类毒素）、病毒类疫苗、抗毒素及抗血清、血液制品、细胞因子、生长因子、酶、体内及体外诊断制品，以及其他生物活性制剂，如毒素、抗原、变态反应原、单克隆抗体、抗原抗体复合物、免疫调节及微生态制剂等。
[1]1.2治疗作用生物制品的用途可分为预防用生物制品、治疗用生物制品和诊断用生物制品三大类。
预防用生物制品均用于传染病的预防。
包括疫苗、类毒素和γ-球蛋白三类。
治疗用生物制品包括各种血液制剂、免疫制剂如干扰素。
按治疗作用机理可分为特异的（如抗毒素和γ-球蛋白）和非特异的（如干扰素和人白蛋白等）。
诊断用生物制品大都用于检测相应抗原、抗体或机体免疫状态，属于免疫学方法诊断。
生物制品分析概论
三、生物鉴别法
生物学法 利用生物体对生物制品特定的生物活性
的反应为基础进行供试品的鉴别即为生 物学法。
三、生物鉴别法
示例：注射用重组人促红素（CHO细胞） 人促红素具有刺激网织红细胞生成的生物作用。 给小鼠皮下注射供试品后，其血液中网织红细 胞的数量随着人促红素注射量的增加而升高。 因此，中国药典2010年版三部收载的注射用重 组人促红素（CHO细胞），其原液的检定依据 人促红素独特的生物学活性，即采用网织红细 胞法。
需要标准品或对照品在同一条件下进行对照试验。 生物制品的鉴别不是由一项试验就能完成，而是依
据其特异的分子结构和(或)其他特性(包括理化性质 和生物学活性等)设计一组试验来全面评价一种药物。
一、理化鉴别法
化学法：通常利用药物与某试剂在一定条件下反应， 生成有颜色的产物或沉淀进行鉴别。
蛋白质类生物制品——蛋白质变性反应 胰蛋白酶+对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯盐酸盐→紫色 胃蛋白酶+鞣酸、没食子酸或多数重金属盐的溶液→沉淀
重组人生长激素、重组人胰岛素、重组人干扰素1b、重 组人白细胞介素-2、重组人红细胞生成素（EPO）等
生物药物分类
生化药物
生物合成药物
生物制品
生物药物分类
生化药物:一般系指从动物、植物及微生物提取的， 也可用生物-化学半合成或用现代生物技术制得的生 命基本物质及其衍生物、降解物以及大分子结构修 饰物等，如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、辅酶、多 糖、脂质、核苷酸类等。
洗涤
兔抗大肠杆菌菌 体蛋白抗体
酶标板固相
菌体蛋白 含量
加入供试品 菌体蛋白与抗体结合
示例： ELISA法检测大肠杆菌表达系统生产的重组 制品中残留菌体蛋白含量
《生物制品概论赵铠》课件
细胞治疗产品的研发和生产需要经过细胞分离、培养、修饰等技术操作，确保产品的质量和安全性。
生物制品的法规与监管
04
国际上存在多个生物制品相关的法规和指导原则，如世界卫生组织的《生物制品生产和质量控制指南》和欧盟的《人用生物制品质量指南》等，这些法规为各国制定自己的生物制品法规提供了参考和依据。
国际生物制品法规
人工智能在生物制品研发中的应用概述：人工智能技术可以应用于生物制品研发的各个环节，包括靶点发现、药物设计和筛选、实验设计、数据分析等方面。通过人工智能技术，可以大大提高研发效率和成功率，缩短研发周期，降低研发成本。
THANKS
感谢观看
中国监管体系
中国建立了较为完善的生物制品监管体系，包括国家药品监督管理部门和地方药品监督管理部门。这些部门负责生物制品的注册审批、生产质量管理、上市后监管和不良反应监测等工作。
生物制品的未来发展
05
基因治疗产品概述
基因治疗是指通过改变人类基因来治疗遗传性疾病或获得其他治疗益处的技术。基因治疗产品是利用基因工程技术生产的药物，用于治疗或预防遗传性疾病、罕见病和癌症等疾病。
总结词
生物制品是利用生物体或其组成部分生产的药品，主要用于预防、治疗和诊断疾病。这些制品可以是由微生物、细胞、组织、蛋白质、酶等生物物质经过加工制成的。根据来源和用途，生物制品可以分为预防性疫苗、治疗性抗体、细胞治疗产品、基因治疗产品等。
详细描述
总结词：生物制品的研发是一个漫长而复杂的过程，通常需要经过实验室研究、临床前试验、临床试验和上市审批等多个阶段。随着科技的不断进步，生物制品的研发也取得了显著的进展。
为了加强生物制品的监管和协调，国际上建立了多个合作机制和组织，如国际药品审核合作组织（PIC/S）和世界卫生组织药品预认证计划等，这些组织和计划促进了各国之间生物制品监管的交流与合作。
生物制品的法规与监管
04
国际上存在多个生物制品相关的法规和指导原则，如世界卫生组织的《生物制品生产和质量控制指南》和欧盟的《人用生物制品质量指南》等，这些法规为各国制定自己的生物制品法规提供了参考和依据。
国际生物制品法规
人工智能在生物制品研发中的应用概述：人工智能技术可以应用于生物制品研发的各个环节，包括靶点发现、药物设计和筛选、实验设计、数据分析等方面。通过人工智能技术，可以大大提高研发效率和成功率，缩短研发周期，降低研发成本。
THANKS
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中国监管体系
中国建立了较为完善的生物制品监管体系，包括国家药品监督管理部门和地方药品监督管理部门。这些部门负责生物制品的注册审批、生产质量管理、上市后监管和不良反应监测等工作。
生物制品的未来发展
05
基因治疗产品概述
基因治疗是指通过改变人类基因来治疗遗传性疾病或获得其他治疗益处的技术。基因治疗产品是利用基因工程技术生产的药物，用于治疗或预防遗传性疾病、罕见病和癌症等疾病。
总结词
生物制品是利用生物体或其组成部分生产的药品，主要用于预防、治疗和诊断疾病。这些制品可以是由微生物、细胞、组织、蛋白质、酶等生物物质经过加工制成的。根据来源和用途，生物制品可以分为预防性疫苗、治疗性抗体、细胞治疗产品、基因治疗产品等。
详细描述
总结词：生物制品的研发是一个漫长而复杂的过程，通常需要经过实验室研究、临床前试验、临床试验和上市审批等多个阶段。随着科技的不断进步，生物制品的研发也取得了显著的进展。
为了加强生物制品的监管和协调，国际上建立了多个合作机制和组织，如国际药品审核合作组织（PIC/S）和世界卫生组织药品预认证计划等，这些组织和计划促进了各国之间生物制品监管的交流与合作。
生物制品概论
《生物制品概论》摘要：生物制品是预防、治疗、诊断疾病的免疫制剂，主要是用微生物、微生物产品及动物毒素、人和动物的血液及组织等制成。
生物制品是防疫工作的重要武器之一。
生物制品除了预防传染病的自动免疫制品外，还有用于临床防治各种疾病的免疫血清和人血制品等被动免疫制品，以及用于临床诊断、流行病学调查和科研工作的各种诊断用品。
只有对生物制品生产实行严格的、规范的、科学的管理，才能切实保证制品质量，保证使用者的生命安全。
GMP即“药品质量管理规范”。
对疫苗的概念、种类及发展进行了简单的介绍。
从乙肝疫苗的研究，传播途径到到预防和治疗的论述。
并设计了乙肝表面抗原基因工程亚单位疫苗的工艺流程。
最后还对我国生物制品的市场分析和前景的展望。
（1）生物制品的概念、种类生物制品（biological product）是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为原料，应用传统技术或现代生物技术制成，用于人类疾病的预防、治疗和诊断的药品。
人用生物制品包过：细菌类疫苗、病毒类疫苗、抗毒素及抗血清、血液制品、细胞因子、生长因子、酶、体内及体外诊断制品，以及其他生物活性制剂，乳毒素、抗原、变态反应原、单个隆抗体、抗原抗体复合物、免疫调节剂及微生态制剂等。
生物制品种类繁多、用途各异，研究目的的不同，其分类方法也不一样。
根据其组成及用途可分为预防制品、治疗制品和诊断制品。
（1）预防制品：这类制品主要是疫苗，用于疾病的预防。
根据其抗原来源可以分为细菌类疫苗、病毒类疫苗及联合疫苗。
细菌类疫苗是由细菌、螺旋体或其衍生物制成的疫苗。
病毒类疫苗是由病毒、衣原体、立克次体或其衍生物制成的疫苗。
联合疫苗是由两种或两种以上疫苗抗原的原液配制而成的具有多种免疫原性的灭活疫苗或活疫苗，如百日咳、白喉、破伤风联合疫苗(DTP)，麻疹、流行性腮腺炎、风疹联合疫苗（MMR）等。
（2）治疗类制品：是用于临床疾病治疗的生物制品。
主要有免疫血清、血液制品、重组细胞因子制品、抗体药物、重组激素药物、核酸药物等。
生物制品分析概论
运行电压：12 KV DW： 214 nm
第三十四页
第三十五页
二、生化鉴别法
1.酶法：
例：尿激酶的鉴别---气泡上升法
原理：
尿激酶
激活
牛纤维蛋白溶酶原
牛凝血酶
牛纤维蛋白原
蛋白结块 结块溶解：气泡上升
第三十六页
方法：
取小试管，加入尿激酶巴比妥溶液、牛纤维蛋白 原溶液，再依次加入牛纤维蛋白溶酶原溶液、牛凝 血酶溶液，迅速摇匀，立即置37℃±0.5℃恒温水 浴保温，记时。反应系统在30～40秒内凝结，凝 结块内有气泡生成，15分钟内凝结块溶解，当凝结 块溶解时，气泡逐渐上升。以0.9%氯化钠作空白， 同法操作，凝结块在2小时内不溶。
重组人促红素：最大吸收 279nm±2nm； 最小吸收250nm±2nm；在320nm~360nm 处无吸收峰
第三十页
3.高效液相色谱法
主峰保留时间和肽图的一致性
结合N-末端氨基酸序列分析，是蛋白质 类生物制品精确的鉴别方法
第三十一页
高效液相色谱法：
1、反相高效液相色谱法
2、分子排阻色谱法 毛细管电泳 1、毛细管区带电泳CZE
第十三页
重组DNA制品
天然基因
合成的核 苷酸序列
重组
内切酶 载
的遗
连接酶 体
传物
导
质
入
目的 分离纯化 受体
到
产物
细胞
增殖、表达
第十四页
重组DNA制品
• 细胞因子类 • 生长因子类 • 激素类 • 酶类 • 疫苗 • 单克隆抗体
第十五页
诊断制品
• 用于检测相应的抗原、抗体或机体免疫 状态的制品。
生物鉴别法
第二十八页
第三十四页
第三十五页
二、生化鉴别法
1.酶法：
例：尿激酶的鉴别---气泡上升法
原理：
尿激酶
激活
牛纤维蛋白溶酶原
牛凝血酶
牛纤维蛋白原
蛋白结块 结块溶解：气泡上升
第三十六页
方法：
取小试管，加入尿激酶巴比妥溶液、牛纤维蛋白 原溶液，再依次加入牛纤维蛋白溶酶原溶液、牛凝 血酶溶液，迅速摇匀，立即置37℃±0.5℃恒温水 浴保温，记时。反应系统在30～40秒内凝结，凝 结块内有气泡生成，15分钟内凝结块溶解，当凝结 块溶解时，气泡逐渐上升。以0.9%氯化钠作空白， 同法操作，凝结块在2小时内不溶。
重组人促红素：最大吸收 279nm±2nm； 最小吸收250nm±2nm；在320nm~360nm 处无吸收峰
第三十页
3.高效液相色谱法
主峰保留时间和肽图的一致性
结合N-末端氨基酸序列分析，是蛋白质 类生物制品精确的鉴别方法
第三十一页
高效液相色谱法：
1、反相高效液相色谱法
2、分子排阻色谱法 毛细管电泳 1、毛细管区带电泳CZE
第十三页
重组DNA制品
天然基因
合成的核 苷酸序列
重组
内切酶 载
的遗
连接酶 体
传物
导
质
入
目的 分离纯化 受体
到
产物
细胞
增殖、表达
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重组DNA制品
• 细胞因子类 • 生长因子类 • 激素类 • 酶类 • 疫苗 • 单克隆抗体
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诊断制品
• 用于检测相应的抗原、抗体或机体免疫 状态的制品。
生物鉴别法
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Chap生物制品分析概论
生物制品的特点
1．分子量大，分子量不是定值 2. 结构确证难 3. 全过程的质量控制 4. 生物活性检查 5. 安全性检查 6. 效价(含量)测定
Chap生物制品分析概论
生物制品的全程质量控制
2005版中国药典各论内容一般包括：
①品名
②定义、组成及用途
③基本要求 ④制造
Chap生物制品分析概论
降压物质检查法 (Test for Depressor Substances) 降压物质是指某些药物中含有的能导致血压降低 的杂质，包括组胺、类组胺或其他导致血压降低 的物质。
Chap生物制品分析概论
无菌试验 基因工程药物中可能杂质与污染物检查
外源性DNA测定、宿主细胞蛋白质 致突变试验 生殖毒性试验
利用生物体、生物组织或组成生物体的各种成 分，综合运用生物学、生物化学、微生物学、免 疫学、物理化学和药学的原理与方法制得的一大 类药物。包括从动物、植物和微生物等生物体中 直接制取的各种天然生物活性物质以及人工合成 或半合成的天然物质类似物。
Chap生物制品分析概论
生化药物(Biochemical Drugs)
家兔法 本法是将一定剂量的供试品，静脉注入家兔 体内，以其体温升高的程度，判定该供试 品中所含热原是否符合规定。
Chap生物制品分析概论
细菌内毒素检查法 (Test for Bacterial Endotoxin)
本法系利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反 应的机理，以判断供试品中细菌苗内毒素的 限量是否符合规定的一种方法。
⑤检定
⑥保存运输及有效期
⑦使用说明
Chap生物制品分析概论
第二节 质量控制的基本程序与方法
一、鉴别试验 二、杂质检查 三、安全性检查 四、含量(效价)测定
Chap生物制品分析概论
一、鉴别试验
理化鉴别 化学、UV、HPLC 生化鉴别 酶法、电泳法 生物鉴别法 血清学法
生物学法（小鼠惊厥试验）
Chap生物制品分析概论
生物制品(Biological Products)
是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质 工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞 及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制 备，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。参 见《中国生物制品规程》 生物制品的一个显著特点：全程质量控制。
Chap生物制品分析概论
第三节 常用定量分析法
Chap生物制品分析概论
Chap生物制品分析概论
Chap生物制品分析概论
Chap生物制品分析概论
色谱法
1．反相高效液相色谱法(RP-HPLC) 以(C4、C8、C18)烷基硅烷键合相为柱填料，以 甲醇-水、乙腈-水或甲醇、乙腈与缓冲液构成的 溶液为流动相，以紫外、荧光或电化学检测器为 检测手段，这种色谱体系在生化药物(例如肽 类、氨基酸、蛋白质、多糖等)定量分析中应用 广泛。
基本概念
生物药物 (bio-pharmaceutics) ---生化药物(biochemical drugs) ---生物合成药物(biosynthetic drugs) ---生物制品(biological products)
Chap生物制品分析概论
生物药物(bio-pharmaceutics)
Chap生物制品分析概论
二、杂质检查
一般杂质 特殊杂质 安全性检查
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安全性检查
热原检查法（家兔法） 无菌试验
细菌内毒素检查法
基因工程药物中可能
异常毒性试验
杂质与污染物检查
过敏试验
致突变试验
降压物质检查法
生殖毒性试验
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热原检查法(Test for pyrogen)
Chap20 生物制品分析概论
Chap生物制品分析概论
第一节 概述
中国药典2010版 第一部收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制 剂和单味制剂等。 第二部收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药 品以及药用辅料等。 第三部收载生物制品，首次将《中国生物制品规程》 并入药典。
Chap生物制品分析概论
指从动物、植物及微生物提取的，亦可用生物化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本 物质，及其衍生物、降解物及大分子的结构修 饰物等。如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、多 糖、脂质和核苷酸等。 如：氨基酸、多肽、蛋白质、酶等。
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生物合成药物（biosynthetic drugs）
由微生物代谢所产生的药物和必须利用微生物 及其酶转化反应共同完成的半合成药物。 如：维生素、抗生素、氨基酸、某些酶等。
电泳法
醋酸纤维素薄膜电泳法
琼脂糖凝胶电泳法
SDS-PAGE
毛细管电泳
用于蛋白质类生物 制品的分析
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高效毛细管电泳法（HPCE） （High performance capiபைடு நூலகம்lary electrophoresis）
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2.高效离子交换色谱法(HPIEC) HPIEC是蛋白质、多肽分离分析中常见的方法之 一。具有较高质量的活性回收。
3.高效凝胶过滤色谱法(HPGFC) HPGFC可用于多肽和蛋白质等生化药物的分离 及其分子量的测定。
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Chap生物制品分析概论
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Chap生物制品分析概论
（1）疫苗类(Vaccines) （2）抗毒素及抗血清类(Antitoxin and Antiserum) （3）血液制品(Blood Products) （4）细胞因子(Cytokines)及重组DNA产品
(Recombinant DNA Products) （5）诊断制品(Diagnostic Reagents) （6）其他制品(Else Products)
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鲎
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异常毒性试验(Test for Undue Toxicity)
用一定剂量的药物按指定的操作方法和给药途 径给予规定体重的某种试验动物，观察其急性 毒性反应。反应的判断以试验动物死亡与否为 终点。
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过敏试验
过敏试验是检查异性蛋白的试验。药物中若夹 杂有异性蛋白，在临床使用时易引起病人多种 过敏反应，轻者皮肤出现红斑或丘疹，严重者 可出现窒息、发结、血管神经性水肿、血压下 降，甚至休克和死亡。
生物制品的特点
1．分子量大，分子量不是定值 2. 结构确证难 3. 全过程的质量控制 4. 生物活性检查 5. 安全性检查 6. 效价(含量)测定
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生物制品的全程质量控制
2005版中国药典各论内容一般包括：
①品名
②定义、组成及用途
③基本要求 ④制造
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降压物质检查法 (Test for Depressor Substances) 降压物质是指某些药物中含有的能导致血压降低 的杂质，包括组胺、类组胺或其他导致血压降低 的物质。
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无菌试验 基因工程药物中可能杂质与污染物检查
外源性DNA测定、宿主细胞蛋白质 致突变试验 生殖毒性试验
利用生物体、生物组织或组成生物体的各种成 分，综合运用生物学、生物化学、微生物学、免 疫学、物理化学和药学的原理与方法制得的一大 类药物。包括从动物、植物和微生物等生物体中 直接制取的各种天然生物活性物质以及人工合成 或半合成的天然物质类似物。
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生化药物(Biochemical Drugs)
家兔法 本法是将一定剂量的供试品，静脉注入家兔 体内，以其体温升高的程度，判定该供试 品中所含热原是否符合规定。
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细菌内毒素检查法 (Test for Bacterial Endotoxin)
本法系利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反 应的机理，以判断供试品中细菌苗内毒素的 限量是否符合规定的一种方法。
⑤检定
⑥保存运输及有效期
⑦使用说明
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第二节 质量控制的基本程序与方法
一、鉴别试验 二、杂质检查 三、安全性检查 四、含量(效价)测定
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一、鉴别试验
理化鉴别 化学、UV、HPLC 生化鉴别 酶法、电泳法 生物鉴别法 血清学法
生物学法（小鼠惊厥试验）
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生物制品(Biological Products)
是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质 工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞 及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制 备，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。参 见《中国生物制品规程》 生物制品的一个显著特点：全程质量控制。
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第三节 常用定量分析法
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色谱法
1．反相高效液相色谱法(RP-HPLC) 以(C4、C8、C18)烷基硅烷键合相为柱填料，以 甲醇-水、乙腈-水或甲醇、乙腈与缓冲液构成的 溶液为流动相，以紫外、荧光或电化学检测器为 检测手段，这种色谱体系在生化药物(例如肽 类、氨基酸、蛋白质、多糖等)定量分析中应用 广泛。
基本概念
生物药物 (bio-pharmaceutics) ---生化药物(biochemical drugs) ---生物合成药物(biosynthetic drugs) ---生物制品(biological products)
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生物药物(bio-pharmaceutics)
Chap生物制品分析概论
二、杂质检查
一般杂质 特殊杂质 安全性检查
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安全性检查
热原检查法（家兔法） 无菌试验
细菌内毒素检查法
基因工程药物中可能
异常毒性试验
杂质与污染物检查
过敏试验
致突变试验
降压物质检查法
生殖毒性试验
Chap生物制品分析概论
热原检查法(Test for pyrogen)
Chap20 生物制品分析概论
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第一节 概述
中国药典2010版 第一部收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制 剂和单味制剂等。 第二部收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药 品以及药用辅料等。 第三部收载生物制品，首次将《中国生物制品规程》 并入药典。
Chap生物制品分析概论
指从动物、植物及微生物提取的，亦可用生物化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本 物质，及其衍生物、降解物及大分子的结构修 饰物等。如氨基酸、多肽、蛋白质、酶、多 糖、脂质和核苷酸等。 如：氨基酸、多肽、蛋白质、酶等。
Chap生物制品分析概论
生物合成药物（biosynthetic drugs）
由微生物代谢所产生的药物和必须利用微生物 及其酶转化反应共同完成的半合成药物。 如：维生素、抗生素、氨基酸、某些酶等。
电泳法
醋酸纤维素薄膜电泳法
琼脂糖凝胶电泳法
SDS-PAGE
毛细管电泳
用于蛋白质类生物 制品的分析
Chap生物制品分析概论
高效毛细管电泳法（HPCE） （High performance capiபைடு நூலகம்lary electrophoresis）
Chap生物制品分析概论
2.高效离子交换色谱法(HPIEC) HPIEC是蛋白质、多肽分离分析中常见的方法之 一。具有较高质量的活性回收。
3.高效凝胶过滤色谱法(HPGFC) HPGFC可用于多肽和蛋白质等生化药物的分离 及其分子量的测定。
Chap生物制品分析概论
Chap生物制品分析概论
Chap生物制品分析概论
Chap生物制品分析概论
（1）疫苗类(Vaccines) （2）抗毒素及抗血清类(Antitoxin and Antiserum) （3）血液制品(Blood Products) （4）细胞因子(Cytokines)及重组DNA产品
(Recombinant DNA Products) （5）诊断制品(Diagnostic Reagents) （6）其他制品(Else Products)
Chap生物制品分析概论
鲎
Chap生物制品分析概论
异常毒性试验(Test for Undue Toxicity)
用一定剂量的药物按指定的操作方法和给药途 径给予规定体重的某种试验动物，观察其急性 毒性反应。反应的判断以试验动物死亡与否为 终点。
Chap生物制品分析概论
过敏试验
过敏试验是检查异性蛋白的试验。药物中若夹 杂有异性蛋白，在临床使用时易引起病人多种 过敏反应，轻者皮肤出现红斑或丘疹，严重者 可出现窒息、发结、血管神经性水肿、血压下 降，甚至休克和死亡。