紫外分光光度计实验报告

UV-2550紫外分光光度计的使用和分光光度法测定对苯二酚

9141160D0420 何琰

1.目的

（1）了解UV-2550紫外光谱仪的基本使用方法。

（2）了解测定对苯二酚的紫外光谱实验方法。

2. 试剂和仪器

2.1试剂：

标准溶液0.10m g/mL，准确称取0.25g对苯二酚溶于250ml容量瓶中，用水稀释至刻度，从中取出10ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；pH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液。

2.2 仪器：

UV-2550型分光光度计。

3. 实验步骤

3.1 测量波长的选择

用吸量管吸取5.0ml对苯二酚标准溶液于25ml容量瓶中，加入0.5ml pH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，用二次蒸馏水定容，振荡混匀。15分钟后用1cm比色皿，275-330nm波长范围, 进行扫描。从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波长λmax。

3.2 对苯二酚含量的测定

(1)标准曲线的制作

在6个25ml容量瓶中，用吸量管分别加入0，1.0, 2.0, 3.0,4.0,5.0ml 对苯二酚标准溶液，加入0.5ml pH=4.1的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，用二次蒸馏水定容，振荡混匀。用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液，在最大吸收波长处，用光度模块作标准曲线。

(2)试样中对苯二酚含量的测定

准确吸取一定体积的样品于40ml容量瓶中，加入0.5ml pH=4.1乙酸-乙酸钠，

用水稀释至刻度，摇匀。在光度模块中直接读出试样中对苯二酚含量。

4. 实验结果

4.1 测量波长的选择

从吸收曲线上读出对苯二酚的最大吸收波长λmax=288.80。

见图1 吸收曲线

4.2 对苯二酚含量的测定

(1)标准曲线的制作

见图2 标准曲线

(2)试样中对苯二酚含量的测定

对苯二酚含量0.354

相对误差为11.5%

图1 吸收曲线

图2 标准曲线