革兰阳性需氧杆菌PPT课件

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抵抗力：
--芽胞抵抗力很强，煮沸10min或干热140℃ 3h才能杀灭
--在干燥土壤中或皮毛中常温下存活数十年致 病力不减，牧场一旦污染，传染性可持续数 十年
--生物武器
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--芽胞对化学消毒剂抵抗力不一，对碘和氧化
剂较敏感，常用以下方法杀菌：
1：2500碘 10min、
3%H2O2 1h、 4%高锰酸钾 15min、
分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、蕈糖， 有些菌能迟缓发酵甘油和水杨素产酸不产气 水解淀粉、还原硝酸盐 不产生吲哚和硫化氢、不利用柠檬酸盐、不
分解尿素 在牛乳中生长2～4天牛乳凝固→缓慢胨化 触酶（+）、卵磷脂酶弱（+）
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抗原构造：
菌体多糖抗原：
--与毒力无关，耐热、耐腐败，长时间煮沸仍 能与特异性抗体发生环状沉淀反应（Ascoli热 沉淀反应）。 --特异性不高，能与其他需氧芽胞杆菌、14型 肺炎链球菌、人A血型抗原发生交叉反应。
第十三章 革兰阳性需氧杆菌
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需氧芽胞杆菌属（Bacillus）48个种
与医学有关5个种 炭疽芽胞杆菌（B.anthracis） 蜡样芽胞杆菌（B.cereus） 蕈状芽胞杆菌（B.mycoides） 巨大芽胞杆菌（B.megaterium） 苏云金芽胞杆菌（B.thuringiensis）
抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散
炭疽毒素：
保护性抗原、致死因子、水肿因子
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所致疾病
炭疽病： 传染源：患病食草动物及其制 品或被污染物 传播途径：接触——皮肤炭疽 食用——肠炭疽 吸入——肺炭疽
可并发败血症，死亡率极高
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•乙类传染病 •发生肺炭疽按甲类处理
病后可获得持久免疫力
生长 受抑制不生长 •串珠和青霉素抑制联合试验：
青霉素纸片
抑菌环
兔血琼脂平板
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• 噬菌体裂解试验：AP631炭疽噬菌体 • NaHCO3毒力试验： 接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板， 10%CO2、37℃、24～48h 有毒株形成荚膜—黏液型菌落 无毒株不形成荚膜—粗糙型菌落 • 动物试验： 小鼠、家兔或豚鼠皮下接种
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鉴定试验：
形态和菌落特征 生化试验:表11-1 串珠试验: --接种于含青霉素(0.05～0.5U/ml)的肉汤
中，37℃ 6h，大而均匀成串的圆球状菌体 --与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关 --类炭疽无此现象
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•青霉素抑制试验： 接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板， 37℃24h
0.5%过氧乙酸 10min
--对磺胺、青霉素、链霉素、四环素、红霉素、
氯酶素均敏感
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三、微生物学检验
要求快速检出、分离鉴定病原菌，以利早 期确诊、查清疫源、及时治疗和采取预防 对策
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标本的采集与处理
皮肤炭疽：病灶深部标本 肺炭疽：痰和血液 肠炭疽：粪、呕吐物 脑膜炭疽：CSF、血液 死于败血症的动物，严禁宰杀和解剖，可消
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检验程序
皮毛、腐败脏器等
血液
Ascoli试验 以NG制成悬液 经加温或饱和 尿素处理
肉汤增 菌培养
BAP或戊 烷脒平板
2%兔血清肉汤4-8h G染色镜检
菌落特征
动 生 串 噬 荚青 毒
力 化 珠 菌 膜霉 力 观 反 试 体 肿素 试
确定报告
察 应 验 裂 胀抑 验
解 试制
验
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二、 微生物特性
形态染色:
致病菌中最大的G+杆菌， 两端平切、竹节状 有毒株可有明显荚膜
炭疽芽胞杆菌 亚甲基蓝染色 ×1000
革兰染色 ×1000
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芽胞——椭圆形，小于菌体，位于菌体中央 多在有氧条件下形成，25～30℃，在培养基
中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中， 都易形成芽胞
炭疽杆菌在血琼脂平板中菌落
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肉汤—絮状沉淀生长
明胶—37℃18～24h表面液化成漏斗状，由于 细菌沿穿刺线向四周扩散形成倒松树状。
NaHCO3BAP： --有毒株—5%CO2、37℃24～48h、产生荚膜 呈黏液型菌落，挑取时呈粘丝状(鉴别要点)
--无毒株—粗糙型菌落
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生化反应：
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第一节 炭疽芽胞杆菌 （Bacillus anthracis，B.anthraci )
一、临床意义 炭疽是人畜共患的急性传染病 主要是牛、羊等食草类动物的传染病，人可 通过接触或摄食病畜及畜产品而感染 皮肤炭疽、肠炭疽、肺炭疽等， 并发败血症，甚至炭疽性脑膜炎
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致病物质
荚膜：
毒皮肤后割取耳朵、舌尖采集少量血液，局 限性病灶可取病变组织或附近淋巴结。
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•无杂菌污染标本：直接接种肉汤增菌或固体培养基 •污染杂菌固体标本：加10倍量生理盐水充分浸泡，振
荡10～15min 、静置10min，取悬液65℃水浴30min或 85℃5min杀死杂菌，保留芽胞活性，再增菌和培养 •污染杂菌液体标本：离心 ，弃上清液后，加0.5%洗涤 剂振荡10～15min ，离心取沉淀物增菌和分离培养
痰、呕吐物、CSF及Biblioteka Baidu炎症分泌物
2%兔血清肉 汤快速增菌 37℃4h
荚膜肿胀试验
直接涂片
荚膜染色 G染色
0.2ml注射小白鼠 腹腔，8h后解剖
初步报告
涂片G染色、 荚膜染色
初步报告
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涂片染色： --G染色、荚膜染色、芽胞染色—初步报告 --荚膜荧光抗体染色 核酸检测：核酸杂交 分离培养： --BAP、戊烷脒多粘菌素B平板 --2%兔血清肉汤增菌→分离培养
在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞，尸
体严禁解剖
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培养特性：
•需氧或兼性厌氧，生长条件不严格，最适温 度30～35℃ •普通培养基—扁平、粗糙、不透明、灰白色、 无光泽，边缘不整齐的菌落，低倍镜下菌落边 缘呈卷发状
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BAP：12～15h不溶血，18～24h轻微溶血 其他需氧芽胞杆菌大多溶血明显而快速
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•荚膜多肽抗原：
--与毒力有关，有抗吞噬作用，有利于细 菌生长和扩散
--荚膜肿胀试验，对本菌鉴定有意义
•芽胞抗原：
有免疫原性和血清学诊断价值
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炭疽毒素：
--保护性抗原（PA)、致死因子（LF）、水肿 因子（EF）三个组分
--单独皆无致病性，与PA结合才显示出致病性 --具有抗吞噬和免疫原性