发酵罐及灭菌方法PPT参考幻灯片
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
19
1、无菌空气系统
好气性发酵过程中需要大量的无菌空气，空气要 作到 绝对无菌在目前是不可能的，也是不经济的。
发酵对无菌空气的要求是 ：无菌，无灰尘，无杂 质，无水，无油，正压等几项指标；
发酵对无菌空气的无菌程度要求是：只要在发酵 过程中不因无菌空气染菌，而造成损失即可。
在工程设计中一般要求1000次使用周期中只允许 有一个菌通过，即经过滤后空气的无菌程度为 N=10-3
第三节 发酵设备及消毒灭菌
1
典型发酵设备
种子制备设备、主发酵设备、辅助 设备(无菌空气和培养基的制备)，发 酵液预处理设备，粗产品的提取设 备、产品精制与干燥设备、流出物 回收、利用和处理设备等。
2
一 发酵设备概述
发酵主要设备为发酵罐和种子罐，它们各自 都附有原料(培养基)调制、蒸煮、灭菌和冷
27
培养基
培养基（culture medium)是人工配制的适 合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物 的营养基质。
碳源 氮源 无机盐及微量元素 前体、促进剂与抑制剂
28
培养基的类型
孢子培养基：供菌种繁殖孢子，常用固体 培养基
种子培养基：提供大量优质的菌体，其配 方上应适合于菌体生长于繁殖
(表压). 4．pH：2～11。 5．需氧量：0．05～0.3 kmo1／m3·h。 6．通气量：0.3～2 VVM。 7．功率消耗：0.5～4kW／m3。 8. 发酵热量：5 000～20 000 kcal／m3．h。
12
发酵设备及检测控制系统
B|Braun公司
•发酵罐：Biostat系列 •参数检测 •多级控制：
23
两级分离、冷却、加热的空气 除菌流程
１——粗过滤器 ２——压缩机
３——贮罐
４——冷却器 ５——丝网分离器 ６——过滤器
24
高效前置过滤除菌流程
１——高效前置过滤器 ２——压缩机 ３——贮罐 ４——冷却器 ５——丝网分离器 ６——加热器 ７——过滤器
25
空气净化的流程
吸气口吸入的空气先经过压缩前的过滤 进入空气压缩机（120-150度） 冷却（20-25度），除去油、水，再加热至30-
35度。 最后通过总过滤器和分过滤器除菌，获得洁净
度、压力、温度和流量都符合要求的无菌空气。
26
空气压缩机：目前常用的是往复式空压机
过滤器：空气过滤器的类型很多，有棉花 活性炭过滤器、管式过滤器和接送式过滤 器等。
过滤介质：空气除菌用的过滤介质有：棉 花、活性炭玻璃纤维，超细玻璃纤维纸， 石棉滤板、烧结材料、聚乙烯醇(PVA)等多 孔合成树脂、素烧陶瓷筒和聚碳酸酯等。
发酵培养基：使微生物积累代谢产物，既 要有利于生长繁殖，防止菌体过早衰老， 又要有利于产物的大量合成。
29
2、培养基的灭菌
1）空罐灭菌 空罐灭菌也称空消。无论是种子罐、发酵罐、
还是尿素（或液氨）罐、消泡罐，当培养基 （或物料）尚未进罐前对罐进行预先灭菌，为 空罐灭菌。 为了杀死所有微生物特别是耐热的的芽孢，空 罐灭菌要求温度较高，灭菌时间较长，只有这 样才能杀死设备中各死角残存的杂菌或芽孢。
却设备，通气调节和除菌设备，以及搅拌器 等。
种子罐：以确保发酵罐培养所必需的菌体量 为目的。
发酵罐：承担产物的生产任务。它必须能够
提供微生物生命活动和代谢所要求的条件，
并便于操作和控制，保证工艺条件的实现，
从而获得高产。
3
(一)发酵罐
发酵罐的定义：是为一个特定生物化学过 程的操作提供良好而满意的环境的容器。 对于某些工艺来说，发酵罐是个密闭容器， 同时附带精密控制系统；而对于另一些简 单的工艺来说，发酵罐只是个开口容器， 有时甚至简单到只要有一个开口的坑。
13
Biostat B2
Biostat ED10
14
Pilot Biostat UD50 15
国内、外发酵设备公司
德国贝朗 占中国80%以上的市场 瑞士比欧 美国NBS 韩国 日本 华东理工大学 江苏理工大学
16
发酵罐按容积分类
一般认为500L以下的是实验室发酵罐； 500-5000L是中试发酵罐； 5000L以上是生产规模的发酵罐。
20
发酵生产中制备无菌空气的大 致过程
21
高空取气管
高空取气管是远离地面几十米 的管子。一般而言，地面附近 空气中所含的 微生物和灰尘等 均比高空空气中含的多，据资 料介绍，每升高10米，空气中 杂菌可降低一个数量级，因此 从高空取气要比从低空取气有 利得多。
22
油水分离器
其内部同时采用直接拦截， 惯性碰撞，布朗扩散及凝 聚等机理，能有效地去除 空气中的水、油雾、尘埃， 内部不锈钢丝网可清洗， 使用寿命长。
17
现代发酵工程规模
低值工业品大型化 以规模来取胜 （几十数百吨）。如味精、氨基酸、 有机酸、抗生素、饲料、食品工业用 产品等；
高价值转基因产品小型化（几十数 百升）。基因工程大肠杆菌、酵母菌 高密度培养；动物细胞植物细胞培养；
研究中心智能化、全能性。
18
(二)发酵辅助设备
发酵辅助设备主要包括：无菌空气 系统，培养基配制和灭菌系统、发 酵车间的管道及阀门等。
4
5
6
ห้องสมุดไป่ตู้
发酵罐系统
一个优良的发酵罐装置和组成 （1）应具有严密的结构 （2）良好的液体混合特性 （3）好的传质、传热速率 （4）具有配套而又可靠的检测、控制仪表
7
发酵罐的特点
（1）发酵罐对纯种培养的要求高。因此，发酵 罐的严密性，运行的高度可靠性是发酵工业 的显著特点。
（2）发酵罐更加趋向大型化和自动化发展。 自动化方面，如pH电极、溶解氧电极、溶解 二氧化碳电极等的在线检测在国外巳相当成 熟。国内目前尚处于起步阶段，发酵检测参 数还只限于温度、压力、空气流量等一些最 常规的参数。
8
发酵罐基本类型
(1）搅拌釜反应器 （stirred tank reactor） (2）气泡柱式反应器 （bubble column) (3) 气升式生物反应器
（airlift reactor) 内管型；外管型
9
10
11
发酵罐工艺操作条件
1．温度：25～40℃。 2．压力：0～1 kg／cm3(表压)。 3．灭菌条件；温度100～140℃，压力0～3 kg／cm3
1、无菌空气系统
好气性发酵过程中需要大量的无菌空气，空气要 作到 绝对无菌在目前是不可能的，也是不经济的。
发酵对无菌空气的要求是 ：无菌，无灰尘，无杂 质，无水，无油，正压等几项指标；
发酵对无菌空气的无菌程度要求是：只要在发酵 过程中不因无菌空气染菌，而造成损失即可。
在工程设计中一般要求1000次使用周期中只允许 有一个菌通过，即经过滤后空气的无菌程度为 N=10-3
第三节 发酵设备及消毒灭菌
1
典型发酵设备
种子制备设备、主发酵设备、辅助 设备(无菌空气和培养基的制备)，发 酵液预处理设备，粗产品的提取设 备、产品精制与干燥设备、流出物 回收、利用和处理设备等。
2
一 发酵设备概述
发酵主要设备为发酵罐和种子罐，它们各自 都附有原料(培养基)调制、蒸煮、灭菌和冷
27
培养基
培养基（culture medium)是人工配制的适 合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物 的营养基质。
碳源 氮源 无机盐及微量元素 前体、促进剂与抑制剂
28
培养基的类型
孢子培养基：供菌种繁殖孢子，常用固体 培养基
种子培养基：提供大量优质的菌体，其配 方上应适合于菌体生长于繁殖
(表压). 4．pH：2～11。 5．需氧量：0．05～0.3 kmo1／m3·h。 6．通气量：0.3～2 VVM。 7．功率消耗：0.5～4kW／m3。 8. 发酵热量：5 000～20 000 kcal／m3．h。
12
发酵设备及检测控制系统
B|Braun公司
•发酵罐：Biostat系列 •参数检测 •多级控制：
23
两级分离、冷却、加热的空气 除菌流程
１——粗过滤器 ２——压缩机
３——贮罐
４——冷却器 ５——丝网分离器 ６——过滤器
24
高效前置过滤除菌流程
１——高效前置过滤器 ２——压缩机 ３——贮罐 ４——冷却器 ５——丝网分离器 ６——加热器 ７——过滤器
25
空气净化的流程
吸气口吸入的空气先经过压缩前的过滤 进入空气压缩机（120-150度） 冷却（20-25度），除去油、水，再加热至30-
35度。 最后通过总过滤器和分过滤器除菌，获得洁净
度、压力、温度和流量都符合要求的无菌空气。
26
空气压缩机：目前常用的是往复式空压机
过滤器：空气过滤器的类型很多，有棉花 活性炭过滤器、管式过滤器和接送式过滤 器等。
过滤介质：空气除菌用的过滤介质有：棉 花、活性炭玻璃纤维，超细玻璃纤维纸， 石棉滤板、烧结材料、聚乙烯醇(PVA)等多 孔合成树脂、素烧陶瓷筒和聚碳酸酯等。
发酵培养基：使微生物积累代谢产物，既 要有利于生长繁殖，防止菌体过早衰老， 又要有利于产物的大量合成。
29
2、培养基的灭菌
1）空罐灭菌 空罐灭菌也称空消。无论是种子罐、发酵罐、
还是尿素（或液氨）罐、消泡罐，当培养基 （或物料）尚未进罐前对罐进行预先灭菌，为 空罐灭菌。 为了杀死所有微生物特别是耐热的的芽孢，空 罐灭菌要求温度较高，灭菌时间较长，只有这 样才能杀死设备中各死角残存的杂菌或芽孢。
却设备，通气调节和除菌设备，以及搅拌器 等。
种子罐：以确保发酵罐培养所必需的菌体量 为目的。
发酵罐：承担产物的生产任务。它必须能够
提供微生物生命活动和代谢所要求的条件，
并便于操作和控制，保证工艺条件的实现，
从而获得高产。
3
(一)发酵罐
发酵罐的定义：是为一个特定生物化学过 程的操作提供良好而满意的环境的容器。 对于某些工艺来说，发酵罐是个密闭容器， 同时附带精密控制系统；而对于另一些简 单的工艺来说，发酵罐只是个开口容器， 有时甚至简单到只要有一个开口的坑。
13
Biostat B2
Biostat ED10
14
Pilot Biostat UD50 15
国内、外发酵设备公司
德国贝朗 占中国80%以上的市场 瑞士比欧 美国NBS 韩国 日本 华东理工大学 江苏理工大学
16
发酵罐按容积分类
一般认为500L以下的是实验室发酵罐； 500-5000L是中试发酵罐； 5000L以上是生产规模的发酵罐。
20
发酵生产中制备无菌空气的大 致过程
21
高空取气管
高空取气管是远离地面几十米 的管子。一般而言，地面附近 空气中所含的 微生物和灰尘等 均比高空空气中含的多，据资 料介绍，每升高10米，空气中 杂菌可降低一个数量级，因此 从高空取气要比从低空取气有 利得多。
22
油水分离器
其内部同时采用直接拦截， 惯性碰撞，布朗扩散及凝 聚等机理，能有效地去除 空气中的水、油雾、尘埃， 内部不锈钢丝网可清洗， 使用寿命长。
17
现代发酵工程规模
低值工业品大型化 以规模来取胜 （几十数百吨）。如味精、氨基酸、 有机酸、抗生素、饲料、食品工业用 产品等；
高价值转基因产品小型化（几十数 百升）。基因工程大肠杆菌、酵母菌 高密度培养；动物细胞植物细胞培养；
研究中心智能化、全能性。
18
(二)发酵辅助设备
发酵辅助设备主要包括：无菌空气 系统，培养基配制和灭菌系统、发 酵车间的管道及阀门等。
4
5
6
ห้องสมุดไป่ตู้
发酵罐系统
一个优良的发酵罐装置和组成 （1）应具有严密的结构 （2）良好的液体混合特性 （3）好的传质、传热速率 （4）具有配套而又可靠的检测、控制仪表
7
发酵罐的特点
（1）发酵罐对纯种培养的要求高。因此，发酵 罐的严密性，运行的高度可靠性是发酵工业 的显著特点。
（2）发酵罐更加趋向大型化和自动化发展。 自动化方面，如pH电极、溶解氧电极、溶解 二氧化碳电极等的在线检测在国外巳相当成 熟。国内目前尚处于起步阶段，发酵检测参 数还只限于温度、压力、空气流量等一些最 常规的参数。
8
发酵罐基本类型
(1）搅拌釜反应器 （stirred tank reactor） (2）气泡柱式反应器 （bubble column) (3) 气升式生物反应器
（airlift reactor) 内管型；外管型
9
10
11
发酵罐工艺操作条件
1．温度：25～40℃。 2．压力：0～1 kg／cm3(表压)。 3．灭菌条件；温度100～140℃，压力0～3 kg／cm3