高中生物---检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质ppt课件
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制片
洗去浮色:用吸水纸吸去染液,滴加体积分数为50%的酒精12滴
制成临时装片:滴12滴蒸馏水,盖上盖玻片
镜检观察:在低倍镜下寻找到已着色的 圆形小颗粒,然后用高倍镜观察.。
视野中 有橘黄 色颗粒
8
橘黄色小圆颗粒 即为脂肪颗粒
脂肪 + 苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ).染液 橘黄色(或红色) 9
.
10
注意事项:
能和Cu2+作用生成紫色的络化物,这个反应叫做双缩脲反应。 蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似,因此,蛋白
质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。
.
13
2mL 组织 样液
双缩脲试 剂A 2mL
双缩脲试 剂B 3-4滴
(创造碱性条件) (提供Cu2+)
无色
紫色
在碱性条件(NaOH)下,蛋白质中的肽键(—NH—CO—) 与Cu2+作用生生紫色络合物。因此,操作时,应先加A再加B, 且A多B少,如果B过量, Cu2+的蓝色就会遮盖生成的紫色。
振荡混匀
呈现浅蓝色
50~65℃水浴 加热2min
变成砖红色(Cu2O)
还原糖:含有半缩醛羟基的糖类,主要是葡萄糖、果糖和麦
芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。
.
3
当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量
浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后,立即生成淡
蓝色的Cu(OH)2悬浊液。 Cu(OH)2与葡萄糖、 果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热,能够生成砖红
浅蓝色
棕色
观察颜色变化 砖红色
【斐林试剂】:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05
g/mL的CuSO4溶液,使用前等体积混合均匀(生成浅蓝色
的Cu(OH)2悬浊液),现配现用(时间一长,Cu(OH) 2 沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。
.
6
还原糖的检测结果
斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下,生成砖红色的 Cu2O沉淀。
(1)原理:蛋白质 + 双缩脲试剂
紫色络合物
(2)选材:黄豆、鸡蛋清(稀释)、牛奶、豆浆
(3)检测过程:
3-4滴双缩脲试剂B液,摇匀
2 ml组织样液
2 ml双缩脲试剂A液,摇匀
观察颜色变化
色紫
.
12
双缩脲≠双缩脲试剂
将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。 反应式为:
双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性环境(NaOH)中
15
蛋白质的检. 测结果
16
注意事项:
(1)如果用鸡蛋清作为材料,则必须进行充分稀释,否则反应 后的产物会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷 干净。 (2)【双缩脲试剂】:A液:0.1g/mL NaOH,B液:0.01g/mL CuSO4。先加A液后加B液,且B不能过量,不需要加热。 (3)过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩 盖生成的紫色。 (4)先加入A液2ml,摇匀;再加入B液3-4滴,摇匀。
滤液
(用单层纱布)
显色反应
向试管中加入 2ml组织样液
向试管中加入2ml 振荡混匀 50~65℃水
新配制的斐林试剂
浴加热2min
或本尼迪特试剂
观察现象 观察溶液颜色变化:浅蓝色→棕色→砖红色
结论:生成砖红色沉淀,说明梨. 或苹果中含有还原糖。 5
2 ml组织样液
1 ml新配制的斐林试剂
5065℃水浴加热 约2min
.
14
制备组织样液 黄豆组织样液(或鸡蛋清稀释液)
浸泡
黄豆
研磨
去皮、切片
过滤
鸡蛋
蛋清液 稀释 鸡蛋清稀释液
滤液
显色反应
向试管中注入 2ml组织样液
向试管中注入 2ml双缩脲试剂A
加入3-4滴双缩 脲试剂B
观察现象 观察颜色变化:无→紫色
结论:加入双缩脲试剂A后,颜色呈现为无色,加入B后,变为
紫色,说明鸡蛋清中有蛋白质存在. 。
结论:溶液变蓝,说明马铃薯组织中有淀粉存在。
.
19
鉴定物质 生物材料
所用试剂 颜色变化
还原糖 脂肪
蛋白质 淀粉
苹果、梨、白萝卜 花生种子
豆浆、牛奶、鸡蛋清 面粉、马铃薯匀浆液
斐林试剂
苏丹Ⅲ染液 苏丹Ⅳ染液 双缩脲试剂
碘液
砖红色沉淀
橘黄色 红色 紫色
(1)若用花生种子作实验材料,必须提前浸泡3~4小时,浸 泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,则组织太软,切下 的薄片不易成形,切片要尽可能的薄。
(2)染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色(酒精能溶解 苏丹Ⅲ),染色和洗浮色时间不宜过长。
.
11
三、蛋白质的检测: 双(双缩脲)子(紫色)弹(蛋白质)
-CHO+Cu(OH)2悬浊液
-.COOH+Cu2O↓(砖红色) 7
二、脂肪的检测 (1)选材:经浸泡去种皮的花生种子。 (2)检测过程: 苏三(苏丹Ⅲ)送了我一个橘黄色的胭脂(脂肪) 切片:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片。
选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央
染色:在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液,染色23min
第一章 细胞的分子组成
第三节 有机化合物及生物大分子
实验1:检测生物组织中的糖类、脂肪和 蛋白质
.
1
实 有实肪机验和验化原:蛋合理检白物:产某测质生些生特化物定学组的试织颜剂中色能的反够应使糖。生类物、组脂织中的有关
水浴加热
①还原糖 + 斐林试剂
砖红色沉淀
②脂肪 + 苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液→橘黄色(或红色)
③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
④淀粉 + 碘→蓝色
化学试剂+有机化合物→特定的颜 色
.
2
一、可溶性还原糖的检测:
(1)原理:还原糖 + 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀。 (2)选材:苹果、梨、白萝卜。含糖量较高,颜色为 白色或近于白色的植物组织。 (3)检测过程:
2mL 组织 样液
刚配制的斐 林试剂2mL
.
17
四、淀粉的检测: 蓝(蓝色)点(淀粉wenku.baidu.com点(碘)
(1)原理:淀粉 + 碘
蓝色
(2)选材:马铃薯匀浆
(3)检测过程:
2 ml组织样液
2滴碘液
观察颜色变化
蓝色
.
18
制备组织样液
洗净、去皮、切块
马铃薯块茎
研磨
取5g,放入研钵中
过滤
滤液
显色反应
向试管中注入2ml组织样液
加入5滴碘-碘化钾
观察现象 观察溶液颜色变化:无色→蓝色
色的Cu2O沉淀。因此,利用该反应,可证明样液中 含可溶性还原糖。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
甲液乙液等量混合,现用现配,切不可分开滴 加,或者久置后才用。
.
4
制备组织样液
砖红色的糖(还原糖)非(斐林试剂)常好吃
洗净、去皮、切块
梨或苹果
研磨
取5g,放入研钵中
过滤
洗去浮色:用吸水纸吸去染液,滴加体积分数为50%的酒精12滴
制成临时装片:滴12滴蒸馏水,盖上盖玻片
镜检观察:在低倍镜下寻找到已着色的 圆形小颗粒,然后用高倍镜观察.。
视野中 有橘黄 色颗粒
8
橘黄色小圆颗粒 即为脂肪颗粒
脂肪 + 苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ).染液 橘黄色(或红色) 9
.
10
注意事项:
能和Cu2+作用生成紫色的络化物,这个反应叫做双缩脲反应。 蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似,因此,蛋白
质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。
.
13
2mL 组织 样液
双缩脲试 剂A 2mL
双缩脲试 剂B 3-4滴
(创造碱性条件) (提供Cu2+)
无色
紫色
在碱性条件(NaOH)下,蛋白质中的肽键(—NH—CO—) 与Cu2+作用生生紫色络合物。因此,操作时,应先加A再加B, 且A多B少,如果B过量, Cu2+的蓝色就会遮盖生成的紫色。
振荡混匀
呈现浅蓝色
50~65℃水浴 加热2min
变成砖红色(Cu2O)
还原糖:含有半缩醛羟基的糖类,主要是葡萄糖、果糖和麦
芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。
.
3
当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量
浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后,立即生成淡
蓝色的Cu(OH)2悬浊液。 Cu(OH)2与葡萄糖、 果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热,能够生成砖红
浅蓝色
棕色
观察颜色变化 砖红色
【斐林试剂】:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05
g/mL的CuSO4溶液,使用前等体积混合均匀(生成浅蓝色
的Cu(OH)2悬浊液),现配现用(时间一长,Cu(OH) 2 沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。
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6
还原糖的检测结果
斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下,生成砖红色的 Cu2O沉淀。
(1)原理:蛋白质 + 双缩脲试剂
紫色络合物
(2)选材:黄豆、鸡蛋清(稀释)、牛奶、豆浆
(3)检测过程:
3-4滴双缩脲试剂B液,摇匀
2 ml组织样液
2 ml双缩脲试剂A液,摇匀
观察颜色变化
色紫
.
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双缩脲≠双缩脲试剂
将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。 反应式为:
双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性环境(NaOH)中
15
蛋白质的检. 测结果
16
注意事项:
(1)如果用鸡蛋清作为材料,则必须进行充分稀释,否则反应 后的产物会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷 干净。 (2)【双缩脲试剂】:A液:0.1g/mL NaOH,B液:0.01g/mL CuSO4。先加A液后加B液,且B不能过量,不需要加热。 (3)过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩 盖生成的紫色。 (4)先加入A液2ml,摇匀;再加入B液3-4滴,摇匀。
滤液
(用单层纱布)
显色反应
向试管中加入 2ml组织样液
向试管中加入2ml 振荡混匀 50~65℃水
新配制的斐林试剂
浴加热2min
或本尼迪特试剂
观察现象 观察溶液颜色变化:浅蓝色→棕色→砖红色
结论:生成砖红色沉淀,说明梨. 或苹果中含有还原糖。 5
2 ml组织样液
1 ml新配制的斐林试剂
5065℃水浴加热 约2min
.
14
制备组织样液 黄豆组织样液(或鸡蛋清稀释液)
浸泡
黄豆
研磨
去皮、切片
过滤
鸡蛋
蛋清液 稀释 鸡蛋清稀释液
滤液
显色反应
向试管中注入 2ml组织样液
向试管中注入 2ml双缩脲试剂A
加入3-4滴双缩 脲试剂B
观察现象 观察颜色变化:无→紫色
结论:加入双缩脲试剂A后,颜色呈现为无色,加入B后,变为
紫色,说明鸡蛋清中有蛋白质存在. 。
结论:溶液变蓝,说明马铃薯组织中有淀粉存在。
.
19
鉴定物质 生物材料
所用试剂 颜色变化
还原糖 脂肪
蛋白质 淀粉
苹果、梨、白萝卜 花生种子
豆浆、牛奶、鸡蛋清 面粉、马铃薯匀浆液
斐林试剂
苏丹Ⅲ染液 苏丹Ⅳ染液 双缩脲试剂
碘液
砖红色沉淀
橘黄色 红色 紫色
(1)若用花生种子作实验材料,必须提前浸泡3~4小时,浸 泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,则组织太软,切下 的薄片不易成形,切片要尽可能的薄。
(2)染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色(酒精能溶解 苏丹Ⅲ),染色和洗浮色时间不宜过长。
.
11
三、蛋白质的检测: 双(双缩脲)子(紫色)弹(蛋白质)
-CHO+Cu(OH)2悬浊液
-.COOH+Cu2O↓(砖红色) 7
二、脂肪的检测 (1)选材:经浸泡去种皮的花生种子。 (2)检测过程: 苏三(苏丹Ⅲ)送了我一个橘黄色的胭脂(脂肪) 切片:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片。
选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央
染色:在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液,染色23min
第一章 细胞的分子组成
第三节 有机化合物及生物大分子
实验1:检测生物组织中的糖类、脂肪和 蛋白质
.
1
实 有实肪机验和验化原:蛋合理检白物:产某测质生些生特化物定学组的试织颜剂中色能的反够应使糖。生类物、组脂织中的有关
水浴加热
①还原糖 + 斐林试剂
砖红色沉淀
②脂肪 + 苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液→橘黄色(或红色)
③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
④淀粉 + 碘→蓝色
化学试剂+有机化合物→特定的颜 色
.
2
一、可溶性还原糖的检测:
(1)原理:还原糖 + 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀。 (2)选材:苹果、梨、白萝卜。含糖量较高,颜色为 白色或近于白色的植物组织。 (3)检测过程:
2mL 组织 样液
刚配制的斐 林试剂2mL
.
17
四、淀粉的检测: 蓝(蓝色)点(淀粉wenku.baidu.com点(碘)
(1)原理:淀粉 + 碘
蓝色
(2)选材:马铃薯匀浆
(3)检测过程:
2 ml组织样液
2滴碘液
观察颜色变化
蓝色
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18
制备组织样液
洗净、去皮、切块
马铃薯块茎
研磨
取5g,放入研钵中
过滤
滤液
显色反应
向试管中注入2ml组织样液
加入5滴碘-碘化钾
观察现象 观察溶液颜色变化:无色→蓝色
色的Cu2O沉淀。因此,利用该反应,可证明样液中 含可溶性还原糖。
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
甲液乙液等量混合,现用现配,切不可分开滴 加,或者久置后才用。
.
4
制备组织样液
砖红色的糖(还原糖)非(斐林试剂)常好吃
洗净、去皮、切块
梨或苹果
研磨
取5g,放入研钵中
过滤