反相液相色谱法测白头翁皂苷

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HPLC反相色谱法测定白头翁皂苷B4

汪磊张彩凤贺志强邵见李

(杭州捷岛科学仪器有限公司应用部)

摘要:采用反相液相色谱法测定白头翁药材中的白头翁皂苷B4。

关键词:反相高效液相色谱;白头翁皂苷B4;

白头翁为毛茛科植物白头翁的干燥根,味苦,性寒,归胃、大肠经。白头翁始载于《本经》,具有清热解毒,凉血止痢之功效,可用于治疗热毒血痢,阴痒带下,瘰疬,痈肿,秃疮等。其主要有效成分为皂苷类成分,为其主要有效成分之一,其含量较高。故测定白头翁皂苷B4含量,对白头翁药材或制剂的质量标准研究具有重要意义。本文采用采用反相液相色谱法测定白头翁药材中的白头翁皂苷B4。

1 设备

1.1 液相色谱仪:EX1600系列液相色谱仪(上海伍丰),配UV检测器、Arcus 5自动进样器。

1.2 微量注射器。

1.3 超声波清洗仪

2 试剂

2.1甲醇(色谱纯);

2.2 实验用水为超纯水

3 分析步骤

3.1 对照品溶液制备

取白头翁皂苷B4对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。

3.2 供试品溶液制备

取本品粉末(过二号筛)0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加甲醇10mL,密塞,超声处理25min,放冷,过滤,虑液置250mL量瓶中,加少量流动相洗涤容器及残渣,洗液并入同一量瓶中,加流动相至刻度,摇匀。

3.2 色谱条件

色谱柱: 略

流动相:甲醇-水(64:36)

检测波长:201nm

流速:1mL/min

进样量:10μL

3.3. 测定与计算

分别取对照品溶液和供试品溶液,按照“3.2”色谱条件,参照《中华人民共和国药典》2010 年版一部附录VI D,测定。峰的理论塔板数应不低于3000。

3.4谱图

3.4.1白头翁皂苷B4对照品

如图1所示,白头翁皂苷B4峰的理论板数为4071,完全满足《中华人民共和国药典》2010 年版一部中要求的白头翁皂苷B4峰的理论塔板数应不低于3000,且该方法得到的白头翁皂苷B4峰,峰形好、峰面

积稳定,与杂质分离完全。

图1 白头翁皂苷B4色谱图(浓度为0.1mg/mL)

4 结论

利用EX1600系列液相色谱仪,测定白头翁药材中白头翁皂苷B4,该方法结果准确可靠,重复性好,完全能满足日常检测的要求。

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