反相液相色谱法测白头翁皂苷

HPLC反相色谱法测定白头翁皂苷B4
汪磊张彩凤贺志强邵见李
（杭州捷岛科学仪器有限公司应用部）
摘要：采用反相液相色谱法测定白头翁药材中的白头翁皂苷B4。

关键词：反相高效液相色谱；白头翁皂苷B4；
白头翁为毛茛科植物白头翁的干燥根，味苦，性寒，归胃、大肠经。

白头翁始载于《本经》，具有清热解毒，凉血止痢之功效，可用于治疗热毒血痢，阴痒带下，瘰疬，痈肿，秃疮等。

其主要有效成分为皂苷类成分，为其主要有效成分之一，其含量较高。

故测定白头翁皂苷B4含量，对白头翁药材或制剂的质量标准研究具有重要意义。

本文采用采用反相液相色谱法测定白头翁药材中的白头翁皂苷B4。

1 设备
1.1 液相色谱仪：EX1600系列液相色谱仪（上海伍丰），配UV检测器、Arcus 5自动进样器。

1.2 微量注射器。

1.3 超声波清洗仪
2 试剂
2.1甲醇（色谱纯）；
2.2 实验用水为超纯水
3 分析步骤
3.1 对照品溶液制备
取白头翁皂苷B4对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。

3.2 供试品溶液制备
取本品粉末（过二号筛）0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加甲醇10mL，密塞，超声处理25min，放冷，过滤，虑液置250mL量瓶中，加少量流动相洗涤容器及残渣，洗液并入同一量瓶中，加流动相至刻度，摇匀。

3.2 色谱条件
色谱柱: 略
流动相：甲醇-水（64:36）
检测波长：201nm
流速：1mL/min
进样量：10μL
3.3. 测定与计算
分别取对照品溶液和供试品溶液，按照“3.2”色谱条件，参照《中华人民共和国药典》2010 年版一部附录VI D，测定。

峰的理论塔板数应不低于3000。

3.4谱图
3.4.1白头翁皂苷B4对照品
如图1所示，白头翁皂苷B4峰的理论板数为4071，完全满足《中华人民共和国药典》2010 年版一部中要求的白头翁皂苷B4峰的理论塔板数应不低于3000，且该方法得到的白头翁皂苷B4峰，峰形好、峰面
积稳定，与杂质分离完全。

图1 白头翁皂苷B4色谱图（浓度为0.1mg/mL）
4 结论
利用EX1600系列液相色谱仪，测定白头翁药材中白头翁皂苷B4，该方法结果准确可靠，重复性好，完全能满足日常检测的要求。