血涂片复检规则及应用
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6 丢失部分重要病理改变的信息。
2020/3/17
21
复检规则制定的原则
1 根据仪器对细胞形态识别能力,决定筛选标 准的宽严程度。识别越差,标准越严。
2 筛选范围要涵盖所有人工镜检范围。 3 在保证筛选质量基础上,尽量使复检率低。
4 假阴性率是关键参数,具有诊断意义的重要 参数不能出现假阴性。其它参数假阴性率也要 尽可能最低。
2020/3/17
16
国内的筛选标准
2007年,中华医学会检验分会成立 “五分类血细胞分析仪复检标准制定 协作组”,拟制定复检标准规则。
国内朱忠勇等提出7条复检规则
目前国内五分类血细胞分析仪没有统 一的复检规则标准,41条是较为公认 的规则。
2020/3/17
17
朱忠勇教授提出的7条复检规则
⑥WBC:3天内Delta值超限,并<4.0×109/L或 >30.0×109/L;涂片镜检。
⑦PLT:首次结果<100×109/L或>1000×109/L; 涂片镜检(计数)。
⑧PLT:Delta值超限的任何结果;涂片镜检(计 数)。
2020/3/17
8
ISLH推荐的41条复检规则(3)
嗜酸性粒细胞(成熟)
2020/3/17
29
嗜碱性粒细胞(成熟)
2020/3/17
30
单核细胞
2020/3/17
31
中毒颗粒
2020/3/17
32
复检内容—红细胞形态观察
大小 形状 血红蛋白含量 细胞内包涵体 红细胞异形性
2020/3/17
33
正常红细胞
2020/3/17
范围;稀释标本后重新测定。 ③WBC、PLT:低于实验室确认的仪器线性范
围;按SOP文件进行。 ④WBC、RBC、Hb、PLT:无结果;①检查
标本是否有凝块,②重测标本,③如果维持不 变,用替代方法计数。
2020/3/17
7
ISLH推荐的41条复检规则(2)
⑤ WBC:首次结果<4.0×109/L或>30.0×109/L; 涂片镜检。
涂片镜检。 36.不典型和(或)变异Lym:WBC的Detal值超上限,
有以前确认的阳性报警结果;涂片镜检。 37.原始细胞报警:首次结果出现阳性报警;涂片镜
检。
2020/3/17
15
ISLH推荐的41条复检规则(10)
38.原始细胞报警:3~7天内WBC的Detal值通过,有 以前确认的阳性报警结果;按实验室SOP进行。
2020/3/17
13
ISLH推荐的41条复检规则(8)
27.RBC碎片:阳性报警;涂片镜检。
28.双形RBC:首次结果出现阳性报警;涂片镜检。
29.难溶性RBC:阳性报警;①检查WBC直方/散点图, ②根据实验室SOP证实Ret计数是否正确,③涂片镜 检是否有异常形态的红细胞。
30.PLT聚集报警:任何计数结果;①检查标本是否有 凝块,②涂片镜检估计PLT数,③如PLT仍聚集,按 实验室SOP进行。
⑦新生儿的血样
2020/3/17
18
目前我科还制定适合于本室的复 检规则
2020/3/17
19
血涂片复检的必要性(1)
实验室认可的要求
ISO15189:血液学检查部门应制定如下标准/程序并形成文件
1 血细胞分析的显微镜复检标准(检测结果出现异常计数,警示标志, 异常散点图等情况时结果的确认方法和程序)
40
复检内容—其他病理成分
寄生虫 真菌
2020/3/17
41
真菌
2020/3/17
42
疟原虫(左:环状体 右:裂殖体)
2020/3/17
43
锥虫
2020/3/17
44
2 血涂片制备和检验的书面程序/过程
3 对患者血液检查和凝固试验的标本进行重复检验的标准及程序
CAP认可:
HEM34200 实验室要建立标准以确保当分类计数仪标记出临床异常 结果时,必须对白细胞分类数据、直方图、和/或血涂片进行检查 和复检。
HEM34350 所有的血涂片必须有唯一的标识号,如病人的序列号, 姓名等。
虫检查。所以血细胞分析仪不能取代 细胞形态学镜检!
理想的血液检查:仪器计数细胞;镜检观 察形态。
镜检费人费时,必须制定筛选标准。
2020/3/17
3
镜检是细胞形态分析的 最终手段
具有特异诊断意义的形 态变化必须镜检
分析仪白细胞分类结
果可为镜检提供筛 选手段,提高镜检效 率,保证医疗质量
2020/3/17
①仪器出现血细胞计数、分类计数及相关指数的提示 信号(flags)
②直方图或散点图出现异常
③仪器检测结果各参数之间出现矛盾
④仪器检测结果与临床表现和初诊、拟诊明显不符
⑤临床初诊或提示有白血病等血液病
⑥临床医生指定要镜检,如重度感染病人,要求查中 性粒细胞左移程度和毒性改变,不典型淋巴细胞,找 寄生虫等。
⑨Hb:首次结果<70g/L或>Leabharlann Baidu年龄和性别参考 范围上限20g/L;①涂片镜检,②确认标本是 否符合要求。
⑩MCV:24h内标本的首次结果<75fl或>105fl (成人);涂片镜检。
⑾MCV:24h以上的成人标本>105fl;①涂片 镜检观察大红细胞相关变化,②如无大红细胞 相关变化,要求重送新鲜血标本,③如无新鲜 血标本,报告中注明。
39.原始细胞报警:WBC的Detal值超上限,有以前确 认的阳性报警结果;涂片镜检。
40.NRBC报警:阳性报警;①涂片镜检,②如发现 NRBC,计数NRBC,重新计算WBC结果。
41.Ret:散点/直方图异常;①检查仪器状态是否正常, ②如吸样有问题,重测标本,③如结果维持不变,涂 片镜检。
34
靶形红细胞
2020/3/17
35
椭圆形红细胞
2020/3/17
36
缗钱状红细胞
2020/3/17
37
豪-周氏小体(Howell-Jolly body)
2020/3/17
38
复检内容—血小板形态观察
大小 血小板聚集 血小板数量评估
2020/3/17
39
大血小板
2020/3/17
4
应用五分类血细胞分析仪的复检 规则
2005年,“国际血液学复检协作组”提出41 条规则。15个实验室,使用CD-4000、LH750、XE-2100、ADVIA-120,对13298份样 品检测并同时进行镜检。整理验证得出41条规 则
如此高档仪器在常规检查中需涂片复查的样本 仍有20-25%之多。
2020/3/17
25
复检内容—白细胞分类计数和形态观察
白细胞分类计数 粒细胞核象:核左移,核右移 中毒性改变:中毒性颗粒、空泡变性、核固缩、
核溶解。 原幼细胞 异形淋巴细胞 其他
2020/3/17
26
异形淋巴细胞?
2020/3/17
27
异形淋巴细胞
2020/3/17
28
⒂RDW:首次结果>22%;涂片镜检。
2020/3/17
10
ISLH推荐的41条复检规则(5)
⒃无DC结果或DC结果不全:无条件复检;人工分 类和涂片镜检。
⒄Neut#:首次结果<1.0×109/L或>20.0×109/L; 涂片镜检。
⒅Lym#:首次结果>5.0×109/L(成人)或 >7.0×109/L(<12岁);涂片镜检。
2020/3/17
12
ISLH推荐的41条复检规则(7)
24.怀疑性报警[不成熟粒细胞(IG)/杆状核中性 粒细胞(Band)报警提示除外]:首次成人结 果出现阳性报警;涂片镜检。
25.怀疑性报警:首次儿童结果出现阳性报警; 涂片镜检。
26.WBC结果不可信报警:阳性报警;①确认 标本是否符合要求并重测标本,②如出现同样 报警提示,检查仪器,③如需要,进行人工分 类。
31.PLT报警:除PLT聚集外的PLT和MPV报警;涂片 镜检。
2020/3/17
14
ISLH推荐的41条复检规则(9)
32.IG报警:首次结果出现阳性报警;涂片镜检。 33.IG报警:WBC的Detal值超上限,有以前确认的阳
性报警结果;涂片镜检。 34.左移报警:阳性报警;按实验室SOP进行。 35.不典型和(或)变异Lym:首次结果出现阳性报警;
HEM34450 所有的血涂片至少保存一周,以便复查或参考。
2020/3/17
20
血涂片复检的必要性(2)
1 过分依赖仪器,弱化人的能力及责任。 2 无或较少进行显微镜下形态学检查。 3 无或较少进行手工白细胞分类检查。 4 漏诊:白血病、传单、寄生虫感染等。 5 误诊:贫血、血小板减少性紫癜、白血病
2020/3/17
5
复检专家组的41条复检规则
关于血细胞计数—15条规则 关于白细胞分类参数—7条规则 关于网织红细胞—1条规则 关于可疑报警—18条规则
2020/3/17
6
ISLH推荐的41条复检规则(1)
① 新生儿:首次检测标本;涂片镜检。 ②WBC、RBC、Hb、PLT、Reti:超出线性
5 在低假阴性率前提下,调整标准降低假阳性率
2020/3/17
22
复检规则制定的原则
6 白血病患者(不管初诊还是复诊)不能筛选。 7 临床医生提出阅片者,必须镜检 。 8 筛选标准涉及的参数,应用的仪器能够提
供。 9 不同型号仪器筛选标准不同,同一型号仪
器实验室要求不同,标准也不同。
⒆Mono#:首次结果>1.5×109/L(成人)或 >3.0×109/L(<12岁);涂片镜检。
2020/3/17
11
ISLH推荐的41条复检规则(6)
(20)Eos#:首次结果>2.0×109/L;涂片镜检。 (21)Baso#:首次结果>0.5×109/L;涂片镜检。 (22)NRBC#:首次出现任何结果;涂片镜检。 (23)Ret#:首次结果>0.10×109/L;涂片镜检。
2020/3/17
9
ISLH推荐的41条复检规则(4)
⑿MCV:24h内标本的Delta值超限的任何结 果;:确认标本是否符合要求。
⒀MCHC:≥参考范围上限20g/L;检查标本是 否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。
⒁MCHC:<300g/L,同时,MCV正常或增高; 寻找可能因静脉输液污染或其他标本原因
2020/3/17
23
复检内容,内涵丰富
标本的复查
人工对仪器报告的审核
涂片镜检
人工分类
标本的确认和鉴定
仪器运行状态的检查
复检≠人工分类
2020/3/17
24
复检内容—细胞数量的验证
白细胞数量 血小板数量
在细胞分布适中部位浏览血片,根据其与 红细胞的比例估计白细胞数、血小板数。 Ex:正常情况下,每10-40个红细胞会见到1个血 小板。
血涂片复检规则 及应用
全血细胞分析检测
标本接收及拒收 标本前处理 血细胞分析仪检测操作 外周血涂片及染色 显微镜镜检
2020/3/17
2
细胞形态学镜检是判断血细胞形态 病理变化的金标准
质量高的“镜检”包括观察炎症引起的白细胞 毒性变化;白血病细胞病理变化;贫血红细胞 形态变化;血小板形态特点,以及血液内寄生
2020/3/17
21
复检规则制定的原则
1 根据仪器对细胞形态识别能力,决定筛选标 准的宽严程度。识别越差,标准越严。
2 筛选范围要涵盖所有人工镜检范围。 3 在保证筛选质量基础上,尽量使复检率低。
4 假阴性率是关键参数,具有诊断意义的重要 参数不能出现假阴性。其它参数假阴性率也要 尽可能最低。
2020/3/17
16
国内的筛选标准
2007年,中华医学会检验分会成立 “五分类血细胞分析仪复检标准制定 协作组”,拟制定复检标准规则。
国内朱忠勇等提出7条复检规则
目前国内五分类血细胞分析仪没有统 一的复检规则标准,41条是较为公认 的规则。
2020/3/17
17
朱忠勇教授提出的7条复检规则
⑥WBC:3天内Delta值超限,并<4.0×109/L或 >30.0×109/L;涂片镜检。
⑦PLT:首次结果<100×109/L或>1000×109/L; 涂片镜检(计数)。
⑧PLT:Delta值超限的任何结果;涂片镜检(计 数)。
2020/3/17
8
ISLH推荐的41条复检规则(3)
嗜酸性粒细胞(成熟)
2020/3/17
29
嗜碱性粒细胞(成熟)
2020/3/17
30
单核细胞
2020/3/17
31
中毒颗粒
2020/3/17
32
复检内容—红细胞形态观察
大小 形状 血红蛋白含量 细胞内包涵体 红细胞异形性
2020/3/17
33
正常红细胞
2020/3/17
范围;稀释标本后重新测定。 ③WBC、PLT:低于实验室确认的仪器线性范
围;按SOP文件进行。 ④WBC、RBC、Hb、PLT:无结果;①检查
标本是否有凝块,②重测标本,③如果维持不 变,用替代方法计数。
2020/3/17
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ISLH推荐的41条复检规则(2)
⑤ WBC:首次结果<4.0×109/L或>30.0×109/L; 涂片镜检。
涂片镜检。 36.不典型和(或)变异Lym:WBC的Detal值超上限,
有以前确认的阳性报警结果;涂片镜检。 37.原始细胞报警:首次结果出现阳性报警;涂片镜
检。
2020/3/17
15
ISLH推荐的41条复检规则(10)
38.原始细胞报警:3~7天内WBC的Detal值通过,有 以前确认的阳性报警结果;按实验室SOP进行。
2020/3/17
13
ISLH推荐的41条复检规则(8)
27.RBC碎片:阳性报警;涂片镜检。
28.双形RBC:首次结果出现阳性报警;涂片镜检。
29.难溶性RBC:阳性报警;①检查WBC直方/散点图, ②根据实验室SOP证实Ret计数是否正确,③涂片镜 检是否有异常形态的红细胞。
30.PLT聚集报警:任何计数结果;①检查标本是否有 凝块,②涂片镜检估计PLT数,③如PLT仍聚集,按 实验室SOP进行。
⑦新生儿的血样
2020/3/17
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目前我科还制定适合于本室的复 检规则
2020/3/17
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血涂片复检的必要性(1)
实验室认可的要求
ISO15189:血液学检查部门应制定如下标准/程序并形成文件
1 血细胞分析的显微镜复检标准(检测结果出现异常计数,警示标志, 异常散点图等情况时结果的确认方法和程序)
40
复检内容—其他病理成分
寄生虫 真菌
2020/3/17
41
真菌
2020/3/17
42
疟原虫(左:环状体 右:裂殖体)
2020/3/17
43
锥虫
2020/3/17
44
2 血涂片制备和检验的书面程序/过程
3 对患者血液检查和凝固试验的标本进行重复检验的标准及程序
CAP认可:
HEM34200 实验室要建立标准以确保当分类计数仪标记出临床异常 结果时,必须对白细胞分类数据、直方图、和/或血涂片进行检查 和复检。
HEM34350 所有的血涂片必须有唯一的标识号,如病人的序列号, 姓名等。
虫检查。所以血细胞分析仪不能取代 细胞形态学镜检!
理想的血液检查:仪器计数细胞;镜检观 察形态。
镜检费人费时,必须制定筛选标准。
2020/3/17
3
镜检是细胞形态分析的 最终手段
具有特异诊断意义的形 态变化必须镜检
分析仪白细胞分类结
果可为镜检提供筛 选手段,提高镜检效 率,保证医疗质量
2020/3/17
①仪器出现血细胞计数、分类计数及相关指数的提示 信号(flags)
②直方图或散点图出现异常
③仪器检测结果各参数之间出现矛盾
④仪器检测结果与临床表现和初诊、拟诊明显不符
⑤临床初诊或提示有白血病等血液病
⑥临床医生指定要镜检,如重度感染病人,要求查中 性粒细胞左移程度和毒性改变,不典型淋巴细胞,找 寄生虫等。
⑨Hb:首次结果<70g/L或>Leabharlann Baidu年龄和性别参考 范围上限20g/L;①涂片镜检,②确认标本是 否符合要求。
⑩MCV:24h内标本的首次结果<75fl或>105fl (成人);涂片镜检。
⑾MCV:24h以上的成人标本>105fl;①涂片 镜检观察大红细胞相关变化,②如无大红细胞 相关变化,要求重送新鲜血标本,③如无新鲜 血标本,报告中注明。
39.原始细胞报警:WBC的Detal值超上限,有以前确 认的阳性报警结果;涂片镜检。
40.NRBC报警:阳性报警;①涂片镜检,②如发现 NRBC,计数NRBC,重新计算WBC结果。
41.Ret:散点/直方图异常;①检查仪器状态是否正常, ②如吸样有问题,重测标本,③如结果维持不变,涂 片镜检。
34
靶形红细胞
2020/3/17
35
椭圆形红细胞
2020/3/17
36
缗钱状红细胞
2020/3/17
37
豪-周氏小体(Howell-Jolly body)
2020/3/17
38
复检内容—血小板形态观察
大小 血小板聚集 血小板数量评估
2020/3/17
39
大血小板
2020/3/17
4
应用五分类血细胞分析仪的复检 规则
2005年,“国际血液学复检协作组”提出41 条规则。15个实验室,使用CD-4000、LH750、XE-2100、ADVIA-120,对13298份样 品检测并同时进行镜检。整理验证得出41条规 则
如此高档仪器在常规检查中需涂片复查的样本 仍有20-25%之多。
2020/3/17
25
复检内容—白细胞分类计数和形态观察
白细胞分类计数 粒细胞核象:核左移,核右移 中毒性改变:中毒性颗粒、空泡变性、核固缩、
核溶解。 原幼细胞 异形淋巴细胞 其他
2020/3/17
26
异形淋巴细胞?
2020/3/17
27
异形淋巴细胞
2020/3/17
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⒂RDW:首次结果>22%;涂片镜检。
2020/3/17
10
ISLH推荐的41条复检规则(5)
⒃无DC结果或DC结果不全:无条件复检;人工分 类和涂片镜检。
⒄Neut#:首次结果<1.0×109/L或>20.0×109/L; 涂片镜检。
⒅Lym#:首次结果>5.0×109/L(成人)或 >7.0×109/L(<12岁);涂片镜检。
2020/3/17
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ISLH推荐的41条复检规则(7)
24.怀疑性报警[不成熟粒细胞(IG)/杆状核中性 粒细胞(Band)报警提示除外]:首次成人结 果出现阳性报警;涂片镜检。
25.怀疑性报警:首次儿童结果出现阳性报警; 涂片镜检。
26.WBC结果不可信报警:阳性报警;①确认 标本是否符合要求并重测标本,②如出现同样 报警提示,检查仪器,③如需要,进行人工分 类。
31.PLT报警:除PLT聚集外的PLT和MPV报警;涂片 镜检。
2020/3/17
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ISLH推荐的41条复检规则(9)
32.IG报警:首次结果出现阳性报警;涂片镜检。 33.IG报警:WBC的Detal值超上限,有以前确认的阳
性报警结果;涂片镜检。 34.左移报警:阳性报警;按实验室SOP进行。 35.不典型和(或)变异Lym:首次结果出现阳性报警;
HEM34450 所有的血涂片至少保存一周,以便复查或参考。
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血涂片复检的必要性(2)
1 过分依赖仪器,弱化人的能力及责任。 2 无或较少进行显微镜下形态学检查。 3 无或较少进行手工白细胞分类检查。 4 漏诊:白血病、传单、寄生虫感染等。 5 误诊:贫血、血小板减少性紫癜、白血病
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复检专家组的41条复检规则
关于血细胞计数—15条规则 关于白细胞分类参数—7条规则 关于网织红细胞—1条规则 关于可疑报警—18条规则
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6
ISLH推荐的41条复检规则(1)
① 新生儿:首次检测标本;涂片镜检。 ②WBC、RBC、Hb、PLT、Reti:超出线性
5 在低假阴性率前提下,调整标准降低假阳性率
2020/3/17
22
复检规则制定的原则
6 白血病患者(不管初诊还是复诊)不能筛选。 7 临床医生提出阅片者,必须镜检 。 8 筛选标准涉及的参数,应用的仪器能够提
供。 9 不同型号仪器筛选标准不同,同一型号仪
器实验室要求不同,标准也不同。
⒆Mono#:首次结果>1.5×109/L(成人)或 >3.0×109/L(<12岁);涂片镜检。
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ISLH推荐的41条复检规则(6)
(20)Eos#:首次结果>2.0×109/L;涂片镜检。 (21)Baso#:首次结果>0.5×109/L;涂片镜检。 (22)NRBC#:首次出现任何结果;涂片镜检。 (23)Ret#:首次结果>0.10×109/L;涂片镜检。
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ISLH推荐的41条复检规则(4)
⑿MCV:24h内标本的Delta值超限的任何结 果;:确认标本是否符合要求。
⒀MCHC:≥参考范围上限20g/L;检查标本是 否有脂血、溶血、RBC凝集及球形红细胞。
⒁MCHC:<300g/L,同时,MCV正常或增高; 寻找可能因静脉输液污染或其他标本原因
2020/3/17
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复检内容,内涵丰富
标本的复查
人工对仪器报告的审核
涂片镜检
人工分类
标本的确认和鉴定
仪器运行状态的检查
复检≠人工分类
2020/3/17
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复检内容—细胞数量的验证
白细胞数量 血小板数量
在细胞分布适中部位浏览血片,根据其与 红细胞的比例估计白细胞数、血小板数。 Ex:正常情况下,每10-40个红细胞会见到1个血 小板。
血涂片复检规则 及应用
全血细胞分析检测
标本接收及拒收 标本前处理 血细胞分析仪检测操作 外周血涂片及染色 显微镜镜检
2020/3/17
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细胞形态学镜检是判断血细胞形态 病理变化的金标准
质量高的“镜检”包括观察炎症引起的白细胞 毒性变化;白血病细胞病理变化;贫血红细胞 形态变化;血小板形态特点,以及血液内寄生