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24
压片法制备植物减数分裂装片
1)取材 获得处于适当减数分裂期的材料是制片成败的关键因素,而 最适的时期又因实验主要目的不同而异。 (2) 固定 最常用的固定液是卡诺氏固定液。经过固定处理的材料更易 于染色、分色和保存。 (3) 涂抹 用镊子直接从固定液或保存液中取出材料(花蕾、花序、幼 穗等),用洁净的刀片或镊子压在小孢子囊或花药上向一端轻轻抹去, 将花粉母细胞压挤出来,注意勿使花药太过破碎;将挤出花粉母细 胞(呈半透明胶状)小范围内涂成薄层。 (4)染色 在涂好的载玻片上滴加一滴或半滴染液,稍后用镊子把所 有可见花药壁残渣清除干净。 (5) 初检与压片 染色后置于低倍显微镜下初步检查,若花粉母细胞正 处于分裂期,即可压片。 (6) 镜检观察 在低倍镜下寻找适当视野,并正确区分处于减数分裂 各个时期的花粉母细胞、二分体、四分体以及花粉粒、花药壁残留 组织与细胞。
8
终变期:两条同源染色体仍有交叉联系着,所以仍为n 个双价体。染色体变得更为粗短,螺旋化达到最高度, 双价体开始向赤道面移动,分裂进入中期I。
终变期 diakinesis
交叉节端化,染色体更粗短,二价
体分散在核区内靠近核膜,可计数。
9
(2) 中期I: 各个双价体排列在赤道面上,两个同源染色体上的着丝粒逐 渐远离,双价体开始分离,但仍有交叉联系着。
减数分裂的观察
1
实验目的
学习并掌握动植物减数分裂玻片标本的 制作方法。
了解动植物减数分裂的过程,观察减数 分裂中染色体的动态变化。
2
实验原理
(二)减数分裂
3
4
第一次分裂 前期I(prophaseI)
第一次减数分裂的前期特别长,包括细 线期、偶线期、粗线期、双线期、终变 期。
细线期 leptotene
11
(4) 末期I: 核膜重建,核仁重新形成,接着进行胞质分裂,成为两个子
细胞。 注意:末期I的染色体只有n个,但每个染色体具有两条染色
单体;而有丝分裂末期的染色体数为2n个,每个染色体只 有一条染色单体。
染色体到达两极,解螺旋,核膜 核仁逐渐形成,胞质分裂形成二分体。
12
(5) 减数间期:
壁,可见上方两侧(第4~7背板之间)各有一团黄色团 状块(精巢)。 (2)固定 卡诺氏固定液固定2~4小时,经95%酒精洗2~3 次后,转入70%酒精保存。 (3)染色 夹取一小枚管状精巢,放置于载玻片上,滴加 适量醋酸洋红(或改良品红液)染色10~20min。 (4)压片 用解剖针挑取少量材料(一条精小管)到一张 新载片上,加1滴新鲜染料或45%醋酸,拔碎,加盖玻片, 复吸水纸压片。 (5)镜检。
核膜核仁消失,纺锤丝出现。每 条染色体以着丝粒排列在赤道面上。
16
后期II anaphaseⅡ
每条染色体的着丝粒分裂为二,每条 单体在纺锤丝作用下分别移向两极。
17ห้องสมุดไป่ตู้
末期II telophaseⅡ
到达两极的染色体解螺旋, 核膜核仁相继出现,胞质分裂
18
四分体the tetrad
由原来的一个母细胞经过两次连续 的分裂产生四个子细胞,称为四分子。
22
实验用品
蝗虫(Oxya intricata stal),其染色体数为:雌虫
(2n=2x=24,XX);雄虫(2n=2x=23,XO)。雌虫比雄虫个体长, 腹部末端为产卵器,呈分叉状。雄虫腹部末端为交配器,形似船
尾。性成熟的雄性小白鼠(Mus musculus,2n=2x=40)。玉米 (Zea mays, 2n=2x=20)、蚕豆(Vicia faba, 2n=2x=12)、
19
20
实验原理
在植物的花粉形成过程中,花药内 的一些细胞分化为小孢子母细胞(2n), 每个小孢子母细胞经减数分裂产生4个小 孢子(n)。在适当的时期采集植物的花 药,经固定、染色、压片等操作程序后, 就可以在显微镜下看到细胞减数分裂过 程中染色体的动态变化。
21
实验原理
在动物的有性生殖过程中,精巢首 先分化为精母细胞(2n),经第一和第 二次分裂,形成4个精子(n)。在适当 的时间给动物注射秋水仙素,并取动物 的精巢,经低渗、固定等处理后,可观 察到减数分裂不同时期染色体的变化。
二价体凝缩变短变粗呈粗线状
7
可发生非姊妹染色单体的交换。
双线期:双价体中的两条同源染色体开始分开,但分开 不完全,并不形成两个独立的单价体,而是在两个同源 染色体之间仍有若干处发生交叉而相互连接。交叉的地 方实际上是染色单体发生了交换的结果
双线期 diplotene
染色体继续变短变粗,同源染色体
开始排斥,有交叉结出现,呈麻花状。
核仁核膜消失,纺锤丝形成, 二 价体着丝粒相对排列在赤道面上,同 10 源染色体两个成员随机朝向一极。
(3) 后期I:
双价体中的两条同源染色体分开,分别向两极移动,每一染 色体有两个染色单体,在着丝粒区相连(相当于有丝分裂前 期的一条染色体)。这样,每一极得到n条染色体,即在后期 I时染色体数目减半。双价体中哪一条染色体移向哪一极是 完全随机的。
染色体细长如丝,首尾难分, 彼此缠绕在一起
5
偶线期 zygotene
同源染色体开始彼此靠拢联会配对
6
粗线期:染色体继续缩短变粗,两条同源染色体配对完 毕。因此原来是2n条染色体,经配对后形成n组染色体, 每一组合有2条同源染色体,这种配对的染色体叫做双价 体(二价体)。
粗线期 pachytene
显微镜、离心机、培养皿、小手术剪、解剖针、小弯镊、离心管、 吸管、载玻片、镊子、大培养皿、染缸、酒精灯、吸水纸等。
甲醇、冰乙酸、0.075N氯化钾、0.1%秋水仙素、Giemsa染色液、、 醋酸洋红、改良品红、二甲苯、加拿大树胶、正丁醇等。
23
实验步骤
压片法制备蝗虫精巢减数分裂装片 (1)取材 剪去翅膀,在翅基部后方的背端,仔细剪开体
在第一次分裂之末,两个子细胞进入间期,这时细 胞核的形态与有丝分裂间期相似,但有许多生物没 有间期,后期染色体直接进入第二次减数分裂的晚 前期,染色体仍旧保持原来的浓缩状态。不过不论 有没有间期,在两次减数分裂之间都没有DNA的合 成及染色体的复制。
13
(6) 前期II、中期II、后期II和末 期II
前期II、中期II、后期II和末期II的情况和 有丝分裂过程完全一样,也是每一染色 体具有两条染色单体,所不同的是染色 体在第一次分裂过程中已经减数,只有n 个染色体了。
14
第二次分裂
前期II prophase Ⅱ
每条染色体有两个单体,共一个着丝 点,常呈X状。子细胞染色体数目为 n。
15
中期II metophaseⅡ
压片法制备植物减数分裂装片
1)取材 获得处于适当减数分裂期的材料是制片成败的关键因素,而 最适的时期又因实验主要目的不同而异。 (2) 固定 最常用的固定液是卡诺氏固定液。经过固定处理的材料更易 于染色、分色和保存。 (3) 涂抹 用镊子直接从固定液或保存液中取出材料(花蕾、花序、幼 穗等),用洁净的刀片或镊子压在小孢子囊或花药上向一端轻轻抹去, 将花粉母细胞压挤出来,注意勿使花药太过破碎;将挤出花粉母细 胞(呈半透明胶状)小范围内涂成薄层。 (4)染色 在涂好的载玻片上滴加一滴或半滴染液,稍后用镊子把所 有可见花药壁残渣清除干净。 (5) 初检与压片 染色后置于低倍显微镜下初步检查,若花粉母细胞正 处于分裂期,即可压片。 (6) 镜检观察 在低倍镜下寻找适当视野,并正确区分处于减数分裂 各个时期的花粉母细胞、二分体、四分体以及花粉粒、花药壁残留 组织与细胞。
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终变期:两条同源染色体仍有交叉联系着,所以仍为n 个双价体。染色体变得更为粗短,螺旋化达到最高度, 双价体开始向赤道面移动,分裂进入中期I。
终变期 diakinesis
交叉节端化,染色体更粗短,二价
体分散在核区内靠近核膜,可计数。
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(2) 中期I: 各个双价体排列在赤道面上,两个同源染色体上的着丝粒逐 渐远离,双价体开始分离,但仍有交叉联系着。
减数分裂的观察
1
实验目的
学习并掌握动植物减数分裂玻片标本的 制作方法。
了解动植物减数分裂的过程,观察减数 分裂中染色体的动态变化。
2
实验原理
(二)减数分裂
3
4
第一次分裂 前期I(prophaseI)
第一次减数分裂的前期特别长,包括细 线期、偶线期、粗线期、双线期、终变 期。
细线期 leptotene
11
(4) 末期I: 核膜重建,核仁重新形成,接着进行胞质分裂,成为两个子
细胞。 注意:末期I的染色体只有n个,但每个染色体具有两条染色
单体;而有丝分裂末期的染色体数为2n个,每个染色体只 有一条染色单体。
染色体到达两极,解螺旋,核膜 核仁逐渐形成,胞质分裂形成二分体。
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(5) 减数间期:
壁,可见上方两侧(第4~7背板之间)各有一团黄色团 状块(精巢)。 (2)固定 卡诺氏固定液固定2~4小时,经95%酒精洗2~3 次后,转入70%酒精保存。 (3)染色 夹取一小枚管状精巢,放置于载玻片上,滴加 适量醋酸洋红(或改良品红液)染色10~20min。 (4)压片 用解剖针挑取少量材料(一条精小管)到一张 新载片上,加1滴新鲜染料或45%醋酸,拔碎,加盖玻片, 复吸水纸压片。 (5)镜检。
核膜核仁消失,纺锤丝出现。每 条染色体以着丝粒排列在赤道面上。
16
后期II anaphaseⅡ
每条染色体的着丝粒分裂为二,每条 单体在纺锤丝作用下分别移向两极。
17ห้องสมุดไป่ตู้
末期II telophaseⅡ
到达两极的染色体解螺旋, 核膜核仁相继出现,胞质分裂
18
四分体the tetrad
由原来的一个母细胞经过两次连续 的分裂产生四个子细胞,称为四分子。
22
实验用品
蝗虫(Oxya intricata stal),其染色体数为:雌虫
(2n=2x=24,XX);雄虫(2n=2x=23,XO)。雌虫比雄虫个体长, 腹部末端为产卵器,呈分叉状。雄虫腹部末端为交配器,形似船
尾。性成熟的雄性小白鼠(Mus musculus,2n=2x=40)。玉米 (Zea mays, 2n=2x=20)、蚕豆(Vicia faba, 2n=2x=12)、
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20
实验原理
在植物的花粉形成过程中,花药内 的一些细胞分化为小孢子母细胞(2n), 每个小孢子母细胞经减数分裂产生4个小 孢子(n)。在适当的时期采集植物的花 药,经固定、染色、压片等操作程序后, 就可以在显微镜下看到细胞减数分裂过 程中染色体的动态变化。
21
实验原理
在动物的有性生殖过程中,精巢首 先分化为精母细胞(2n),经第一和第 二次分裂,形成4个精子(n)。在适当 的时间给动物注射秋水仙素,并取动物 的精巢,经低渗、固定等处理后,可观 察到减数分裂不同时期染色体的变化。
二价体凝缩变短变粗呈粗线状
7
可发生非姊妹染色单体的交换。
双线期:双价体中的两条同源染色体开始分开,但分开 不完全,并不形成两个独立的单价体,而是在两个同源 染色体之间仍有若干处发生交叉而相互连接。交叉的地 方实际上是染色单体发生了交换的结果
双线期 diplotene
染色体继续变短变粗,同源染色体
开始排斥,有交叉结出现,呈麻花状。
核仁核膜消失,纺锤丝形成, 二 价体着丝粒相对排列在赤道面上,同 10 源染色体两个成员随机朝向一极。
(3) 后期I:
双价体中的两条同源染色体分开,分别向两极移动,每一染 色体有两个染色单体,在着丝粒区相连(相当于有丝分裂前 期的一条染色体)。这样,每一极得到n条染色体,即在后期 I时染色体数目减半。双价体中哪一条染色体移向哪一极是 完全随机的。
染色体细长如丝,首尾难分, 彼此缠绕在一起
5
偶线期 zygotene
同源染色体开始彼此靠拢联会配对
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粗线期:染色体继续缩短变粗,两条同源染色体配对完 毕。因此原来是2n条染色体,经配对后形成n组染色体, 每一组合有2条同源染色体,这种配对的染色体叫做双价 体(二价体)。
粗线期 pachytene
显微镜、离心机、培养皿、小手术剪、解剖针、小弯镊、离心管、 吸管、载玻片、镊子、大培养皿、染缸、酒精灯、吸水纸等。
甲醇、冰乙酸、0.075N氯化钾、0.1%秋水仙素、Giemsa染色液、、 醋酸洋红、改良品红、二甲苯、加拿大树胶、正丁醇等。
23
实验步骤
压片法制备蝗虫精巢减数分裂装片 (1)取材 剪去翅膀,在翅基部后方的背端,仔细剪开体
在第一次分裂之末,两个子细胞进入间期,这时细 胞核的形态与有丝分裂间期相似,但有许多生物没 有间期,后期染色体直接进入第二次减数分裂的晚 前期,染色体仍旧保持原来的浓缩状态。不过不论 有没有间期,在两次减数分裂之间都没有DNA的合 成及染色体的复制。
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(6) 前期II、中期II、后期II和末 期II
前期II、中期II、后期II和末期II的情况和 有丝分裂过程完全一样,也是每一染色 体具有两条染色单体,所不同的是染色 体在第一次分裂过程中已经减数,只有n 个染色体了。
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第二次分裂
前期II prophase Ⅱ
每条染色体有两个单体,共一个着丝 点,常呈X状。子细胞染色体数目为 n。
15
中期II metophaseⅡ