抗血小板聚集药

抗血小板聚集药

一、动物的选择

常用家兔和大鼠，个别试验可用小鼠。为避免周期影响宜用雄性动物。兔每组至少5只，大鼠每组10只。

二、模型及方法

(一) 血小板功能测定(体内给药)

1. 血小板聚集性用比浊法或其他方法观察血小板聚集性。聚集诱导剂有二磷酸腺苷(ADP)、胶原、花生四烯酸(AA)、凝血酶、钙离子载体A23187、血小板激活因子(PAF)等。选择至少3种诱导剂，观察最大聚集率。诱导剂的聚集率应在50%以上。对照组与实验组结果用统计学处理。

2. 血小板粘附常用玻璃球法(用粘附仪测定)或玻柱法，也可用其他方法。

3. 血小板释放产物测定可根据药物的不同作用选择一下1—2种释放物质。

(1) 5羟色胺用[14C]5HT或[3H]5HT标记血小板。也可用荧光光度法。

(2) 血栓素A2 (TXA2) 用放免法测TXB2。

C2+有的血小板聚集仪除测聚集性外，同日可测

(3) 三磷酸腺苷(ATP)或a

ATP或Ca2+。

(4) β—血小板球蛋白(β—TG) 放免法测定。

(5) 血小板因子4(PF4) 放免法测定。

4. 血管壁前列环素(PGI2)活性测定放免法测6—keto—PGF1α。

5. 出血时间测定

（二）血小板依赖性血栓形成试验(体内给药)

1. 动静脉旁路丝线上血栓形成法可采用大鼠或兔，测血栓干重和湿重。

2. 主动脉旁路聚乙烯管内血栓形成法可用大鼠测定聚乙烯管内血栓形成所需时间。

3. 电流损伤颈动脉内膜法常用大鼠。检验有无血栓形成，并测血栓形成时间。

4. 激光损伤微血管法常用小鼠肠细膜血管。记录栓塞形成时间，第一个栓子出现时间和15分钟内栓子数目。

5. 静脉注射血小板诱导剂法血小板聚集诱导剂至少用一种。常用小鼠，观察呼吸窘迫症状和死亡率。也可用大鼠和兔。

以上实验应做量效曲线关系。要求尽量求出ED50或有效剂量范围。量效关系不明确时要说明原因。

创新药物基本上要求完成上述各项模型。

三、药物

阳性对照药可选用机理相似的药。例如环氧酶抑制剂阿司匹林；TXB2合酶抑制剂咪唑(imidazole)；腺苷酸环化酶激活剂前列腺素E1。

四、注意事项

实验时要注意动物种属差异。例如肾上腺素只能诱导人和猫的血小板聚集；大鼠血小板无PAF受体，PAF不能使其血小板聚集。