中图版高中生物选修一6.1《蛋白质的提取和分离》PPT
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2．下列有关电泳现象的叙述，错误的是(
)
A．相同蛋白质的溶液，经过同一个电场电泳后，会在支持物凝胶上形成相同 的带纹 B．不同蛋白质的混合溶液，经过同一个电场电泳后，在支持物凝胶上形成不 同的带纹 C．每一种带纹可能就是一种蛋白质 D．每一种带纹一定不是一种蛋白质
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1．关于电泳，下列叙述不正确的是(
)
A．蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快 B．蛋白质所带的电荷数越少，移动得越快 C．电荷数相同时，分子量越大，移动越慢 D．电荷数相同时，分子量越小，移动越快
【解析】 电泳时蛋白质移动的速度与所带电荷，蛋白质分子量大小有关， 电荷越多、分子量越小、移动越快。
【答案】 B
B．α2－球蛋白 D．γ－球蛋白
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【解析】
根据电泳的原理进行分析。带电粒子在电场中向与其电性相反的
电极泳动的现象称为电泳。 因此， 移动越快的， 所带负电荷就越多(点样是在负极)， 移动越慢的，所带负电荷就越少。所以 γ－球蛋白所带负电荷最少。
【答案】 D
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一、蛋白质分离提纯的方法 1．蛋白质分离的基本过程 破碎细胞―→抽提(粗制品)―→纯化蛋白质
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2．破碎细胞的方法 在分离与纯化蛋白质之前，必须采用适当的方法使蛋白质呈溶解状态释放出 来：通常先将生物组织进行机械破碎，再根据细胞的特点，选择不同的破碎细胞 方法(常用的有研磨法、超声波法、酶解法)。 3．抽提 细胞破碎后，各种蛋白质被释放出来，再根据蛋白质的不同性质，选择不同 的溶剂进行抽提。
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在电场作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极方向移动。许多重 要的生物大分子，如多肽、蛋白质、核酸等都具有可解离基团，都能够对其利用 电泳技术分离、鉴定和提纯。
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根据血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳图谱示意图判断，所带负电荷最少的球蛋 白是( )
A．α1－球蛋白 C．β－球蛋白
【审题导析】 解答此题应准确把握以下几点：(1)氨基酸的带电情况，(2)影
响电泳速度的因素，(3)可用电泳法分离的物质。
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【精讲精析】 氨基酸是一种两性电解质，在一定 pH 条件下带电荷，作为带 电粒子，氨基酸向与其自身所带电荷相反的电极运动，即向正极运动的氨基酸带 负电荷，向负极运动的氨基酸带正电荷，在原点不动的氨基酸，所带正电荷和负 电荷相等。蛋白质也是一种两性电解质。
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【答案】 (1)赖氨酸
谷氨酸
氨基酸是一种两性电解质， 在一定 pH 条件下
带电荷，作为带电粒子，在进行电泳时氨基酸向与其自身所带电荷相反的电极方 向运动 (2)不一样。进行电泳时，若氨基酸带相同的电荷数，分子量越小，则移动越 快。两者分子量不相等，因此，到达两极的速度不同。 (3)蛋白质同氨基酸一样， 在一定 pH 条件下带电荷， 也会向与其自身所带电荷 相反的电极方向运动。
环 节 一
环 节 三
第一节
环 节 二
蛋白质的提取和分离
学 业 达 标 测 评
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一、蛋白质分离提纯技术 常用的蛋白质分离提纯技术包括 离心技术 、层析技术 中 电泳技术 最为快捷灵敏、简便易行。 和电泳技术 等。其
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二、电泳技术分离蛋白质的原理 1．蛋白质中含有游离的 氨基 件下带有电荷。 2．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷 相反 的电极方向移动。 3．蛋白质所带的电荷数越多，移动得 越快 ；电荷数相同时，分子量越小， 移动越快。 和 羧基 ，是 两性 电解质，在一定 pH 条
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三、结果分析 不同蛋白质的混合溶液经过 同一电场 电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹，
每种带纹 可能就是一种蛋白质。
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四、“血清蛋白的提取和分离”活动程序 1．点样：取新制血清 5 微升、质量浓度为 0.4 克/毫升的 蔗糖溶液 和质量分 数为 0.1%的 溴酚蓝 指示剂 等体积 混匀后，用微量加样器吸取 5 μL 样品加到电 泳样品槽的胶面上。 2．电泳。 3．染色：用质量分数为 0.05%的 考马斯亮蓝R250 染色液对凝胶进行染色。
4．脱色：用体积分数为 7%的醋酸溶液对凝胶板进行浸泡漂洗，至底色脱净。 5．制干胶板：将已 脱色 的凝胶板放在 保存液 中浸泡 3 h～4 h 后，放在两 层透气的 玻璃纸 中间自然干燥。
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预习完成后，请把你认为难以解决的问题记录在下面的表格中 问题1 问题2 问题3 问题4
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4．纯化 (1)原理：纯化主要是指根据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间在分子大 小、溶解度大小、所带电荷的多少、吸附性质等方面存在的差异进行的。 (2)方法：①透析法——分子大小 ②离心沉淀法——分子大小、密度大小 ③电泳——所带电荷多少
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二、“血清蛋白质的分离”实验中应注意的问题 1．由于制备凝胶的丙烯酰胺和双丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并且容易被 皮肤吸收，因此操作必须在通风橱内或通风处进行。 2.将电泳凝胶片放在考马斯亮蓝 R250 染色液中染色 30 min 后，多次更换脱色 液至背景清晰。脱色后，可将凝胶浸于保存液中，长期封装在塑料袋内使其不会 降低染色强度。为保存永久性记录，可对凝胶进行拍照，或将凝胶干燥成胶片。
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电泳的原理及应用
如图为某些氨基酸在 pH 为 6 时进行电泳的结果，请回答：
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(1) 由 图 示 可 知 ， 带 正 电 荷 的 氨 基 酸 是 ________ ， 带 负 电 荷 的 氨 基 酸 是 ________。请说明理由_____________________________________。 (2)假设谷氨酸和赖氨酸所带电荷数相同，它们到达两极的速度一样吗？为什 么？ (3)若把氨基酸换成蛋白质，会出现什么现象？
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【解析】
不同蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上
形成不同的带纹。不同的蛋白质可以在同一带纹中，同一种蛋白质一定存在于同 一带纹中。
2．下列有关电泳现象的叙述，错误的是(
)
A．相同蛋白质的溶液，经过同一个电场电泳后，会在支持物凝胶上形成相同 的带纹 B．不同蛋白质的混合溶液，经过同一个电场电泳后，在支持物凝胶上形成不 同的带纹 C．每一种带纹可能就是一种蛋白质 D．每一种带纹一定不是一种蛋白质
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1．关于电泳，下列叙述不正确的是(
)
A．蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快 B．蛋白质所带的电荷数越少，移动得越快 C．电荷数相同时，分子量越大，移动越慢 D．电荷数相同时，分子量越小，移动越快
【解析】 电泳时蛋白质移动的速度与所带电荷，蛋白质分子量大小有关， 电荷越多、分子量越小、移动越快。
【答案】 B
B．α2－球蛋白 D．γ－球蛋白
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【解析】
根据电泳的原理进行分析。带电粒子在电场中向与其电性相反的
电极泳动的现象称为电泳。 因此， 移动越快的， 所带负电荷就越多(点样是在负极)， 移动越慢的，所带负电荷就越少。所以 γ－球蛋白所带负电荷最少。
【答案】 D
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一、蛋白质分离提纯的方法 1．蛋白质分离的基本过程 破碎细胞―→抽提(粗制品)―→纯化蛋白质
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2．破碎细胞的方法 在分离与纯化蛋白质之前，必须采用适当的方法使蛋白质呈溶解状态释放出 来：通常先将生物组织进行机械破碎，再根据细胞的特点，选择不同的破碎细胞 方法(常用的有研磨法、超声波法、酶解法)。 3．抽提 细胞破碎后，各种蛋白质被释放出来，再根据蛋白质的不同性质，选择不同 的溶剂进行抽提。
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在电场作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极方向移动。许多重 要的生物大分子，如多肽、蛋白质、核酸等都具有可解离基团，都能够对其利用 电泳技术分离、鉴定和提纯。
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根据血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳图谱示意图判断，所带负电荷最少的球蛋 白是( )
A．α1－球蛋白 C．β－球蛋白
【审题导析】 解答此题应准确把握以下几点：(1)氨基酸的带电情况，(2)影
响电泳速度的因素，(3)可用电泳法分离的物质。
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【精讲精析】 氨基酸是一种两性电解质，在一定 pH 条件下带电荷，作为带 电粒子，氨基酸向与其自身所带电荷相反的电极运动，即向正极运动的氨基酸带 负电荷，向负极运动的氨基酸带正电荷，在原点不动的氨基酸，所带正电荷和负 电荷相等。蛋白质也是一种两性电解质。
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【答案】 (1)赖氨酸
谷氨酸
氨基酸是一种两性电解质， 在一定 pH 条件下
带电荷，作为带电粒子，在进行电泳时氨基酸向与其自身所带电荷相反的电极方 向运动 (2)不一样。进行电泳时，若氨基酸带相同的电荷数，分子量越小，则移动越 快。两者分子量不相等，因此，到达两极的速度不同。 (3)蛋白质同氨基酸一样， 在一定 pH 条件下带电荷， 也会向与其自身所带电荷 相反的电极方向运动。
环 节 一
环 节 三
第一节
环 节 二
蛋白质的提取和分离
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一、蛋白质分离提纯技术 常用的蛋白质分离提纯技术包括 离心技术 、层析技术 中 电泳技术 最为快捷灵敏、简便易行。 和电泳技术 等。其
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二、电泳技术分离蛋白质的原理 1．蛋白质中含有游离的 氨基 件下带有电荷。 2．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷 相反 的电极方向移动。 3．蛋白质所带的电荷数越多，移动得 越快 ；电荷数相同时，分子量越小， 移动越快。 和 羧基 ，是 两性 电解质，在一定 pH 条
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三、结果分析 不同蛋白质的混合溶液经过 同一电场 电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹，
每种带纹 可能就是一种蛋白质。
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四、“血清蛋白的提取和分离”活动程序 1．点样：取新制血清 5 微升、质量浓度为 0.4 克/毫升的 蔗糖溶液 和质量分 数为 0.1%的 溴酚蓝 指示剂 等体积 混匀后，用微量加样器吸取 5 μL 样品加到电 泳样品槽的胶面上。 2．电泳。 3．染色：用质量分数为 0.05%的 考马斯亮蓝R250 染色液对凝胶进行染色。
4．脱色：用体积分数为 7%的醋酸溶液对凝胶板进行浸泡漂洗，至底色脱净。 5．制干胶板：将已 脱色 的凝胶板放在 保存液 中浸泡 3 h～4 h 后，放在两 层透气的 玻璃纸 中间自然干燥。
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4．纯化 (1)原理：纯化主要是指根据蛋白质之间以及蛋白质与其他物质之间在分子大 小、溶解度大小、所带电荷的多少、吸附性质等方面存在的差异进行的。 (2)方法：①透析法——分子大小 ②离心沉淀法——分子大小、密度大小 ③电泳——所带电荷多少
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二、“血清蛋白质的分离”实验中应注意的问题 1．由于制备凝胶的丙烯酰胺和双丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并且容易被 皮肤吸收，因此操作必须在通风橱内或通风处进行。 2.将电泳凝胶片放在考马斯亮蓝 R250 染色液中染色 30 min 后，多次更换脱色 液至背景清晰。脱色后，可将凝胶浸于保存液中，长期封装在塑料袋内使其不会 降低染色强度。为保存永久性记录，可对凝胶进行拍照，或将凝胶干燥成胶片。
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电泳的原理及应用
如图为某些氨基酸在 pH 为 6 时进行电泳的结果，请回答：
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(1) 由 图 示 可 知 ， 带 正 电 荷 的 氨 基 酸 是 ________ ， 带 负 电 荷 的 氨 基 酸 是 ________。请说明理由_____________________________________。 (2)假设谷氨酸和赖氨酸所带电荷数相同，它们到达两极的速度一样吗？为什 么？ (3)若把氨基酸换成蛋白质，会出现什么现象？
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【解析】
不同蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上
形成不同的带纹。不同的蛋白质可以在同一带纹中，同一种蛋白质一定存在于同 一带纹中。