紫外分光光度法的应用
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（3）定性和定量分析依据：同一物质在不同波长时ε值不同。 不同物质在同一波长时ε值不同。
εmax表明了该物质在最大吸收波长λmax处的最大吸光能力。
四、吸收光谱（吸收曲线） 1．定义：以A为纵坐标， λ为横坐标，绘制的λ~A曲线。 2．吸收光谱术语：
①吸收峰→λmax ,②吸收谷→λmin ③肩峰→λsh , ④末端吸收 ⑤强带： max>104，弱带： max<103
CrO42- ＋2H＋ = Cr2O72- ＋H2O 溶液中CrO42-、 Cr2O72-的颜色不同，吸光性质也不相同。 故此时溶液pH 对测定有重要影响。
• （二）光学因素
1．非单色光的影响：入射光为单色光是应用该定律的重要前提： 2．杂散光的影响：仪器本身缺陷；光学元件污染造成。
3．反射和散色光的影响：散射和反射使T↓，A↑，吸收光谱变形。 通常可用空白对比校正消除。
表观现象示意
黑色
复合光
无色
吸收黄光
蓝光
二、紫外-可见分光光度法
基于物质吸收紫外或可见光引起分子中价电子跃迁、产 生分子吸收光谱与物质组分之间的关系建立起来的分析方 法，称为紫外可见分光光度法（UV-vis）。
（1）灵敏度高，可测到10-7g/ml。 （2）准确度好，相对误差为1%-5%，满足微量组分测定要求。 （3）选择性好，多种组分共存，无需分离直接测定某物质。 （4）操作简便、快速、选择性好、仪器设备简单、便宜。 （5）应用广泛，无机、有机物均可测定。
特征值
定性、定量分析： 在吸收曲线λmax 处测吸光度A。 ●同一物质的吸收光谱特征值相同, (每一波长处吸光系数相同)。
同一物质相同浓度的吸收曲线重合。
●同一物质不同浓度，其吸收曲线形状相似,λmax相同。（定量） ●不同物质相同浓度，其吸收曲线形状,λmax不同。（定性）
吸收光谱 特征值：
λmax λmin λsh
朗伯定律： 比尔定律：
A=k1 ×L A=k1 ×C
朗伯-比尔定律: A=k C L 液层 厚度
射与光其一的浓束度波平C长行及、单液强A色层度=光厚-以lg通度T及吸系过L,溶的光数一T液乘=均1温积浓0匀-度成度A、=等正1非0保比-散kc持。L射不的变L吸时→光，2物L该质时溶溶，液2液AA的时、吸，TT光在2→度入？A
2、百分吸光系数 / 比吸光系数 E11c%m：
一定λ下,c=1%(W/V)，L=1cm时的吸光度。单位：100ml/g.cm
3、两者关系:
1g/100ml
来自百度文库
M 10
E1% 1cm
4、吸光系数的意义:
（1）一定条件下是一个特征常数。
（2）在温度和波长等条件一定时，ε仅与物质本身的性质有关，与
待测物浓度c和液层厚度L无关；
也会引起偏离。
尤其浓度过高(>0.01mol/L)会使C与A关系偏离定律：
①粒子相互作用加强，吸光能力改变。
②溶液对光的折射率显著改变。
• 故：朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。
溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学
平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。
•
例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡：
即透光率T反映溶液对光吸收程度，通常用1/T反映吸光度。
②吸光度（吸收度）A
定义：A = lg
1 T
I0 = -lgT = lg It
A=-lgT , T=10-A
③T与A关系： A∝1/T，T=0，A=∞ ，T=100%，A=0
二、光的吸收定律
朗伯(Lambert)和比尔(Beer)分别于1760年和1852年研究吸光度 Ａ与溶液厚度Ｌ和其浓度Ｃ的定量关系：
2019/5/28
五、偏离光的吸收定律原因
朗伯-比尔定律：A=k C L
依据Beer定律，A与C关系应 为经过原点的直线
偏离Beer定律的主要因素表 现为以下两个方面： （一）化学因素 （二）光学因素
（一）化学因素
朗—比耳定律假定所有的吸光质点之间不发生相互作用；
该定律适用于稀溶液，溶质的离解、缔合、互变异构及化学变化
称这两种单色光为互补色光，这种现象称为光的互补。
物质的颜色：是由于物质对不同波长的光具有选择性吸收而产生。 即物质的颜色是它所吸收光的互补色。
物质的本色
无色溶液：透过所有颜色的光 有色溶液：透过光的颜色 黑色： 吸收所有颜色的光 白色： 反射所有颜色的光
物质的颜色与光的关系
光谱示意 完全吸收
完全透过
吸收曲线的讨论：
（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应 的波长称为最大吸收波长λmax （2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而 对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。
（3）③吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的 依据之一。 （4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，在 λmax处吸光度A 的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。 （5）在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收 曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。
一、物质对光的选择性吸收
●物质的颜色由物质与光的相互作用方式决定。 ●人眼能感觉到的光称可见光，波长范围是：400~760nm。 ●让白光通过棱镜，能色散出红、橙、黄、绿、蓝、紫等各色光。 ●单色光：单一波长的光 ●复合光：由不同波长的光组合而成的光，如白光。 ●光的互补：若两种不同颜色的单色光按一定比例混合得到白光，
紫外-可见分光光度法的基本原理
一、透光率（透光度）和吸收度
透过光 吸收光 反射光
①透光率T
Ir
t Ia
I0 = It + Ia + Ir
定义：
T=
It I0
×100%
T 取值为0.0 % ~ 100.0 % T = 0.0 % ： 光全吸收 T = 100.0 % ：光全透过
显然，T↑，溶液吸收度↓；T ↓，溶液吸收度↑。
注意! 适用范围
①入射光为单色光，适用于可见、红外、紫外光。 ②均匀、无散射溶液、固体、气体。 ③吸光度A具有加和性。Aa+b+c= Aa + Ab + Ac
三、吸光系数
A=k c L
k = A /c L
1、摩尔吸光系数或Em： 在一定λ下，c=1mol/L，L=1cm时的吸光度。单位：L/(mol.cm)
εmax表明了该物质在最大吸收波长λmax处的最大吸光能力。
四、吸收光谱（吸收曲线） 1．定义：以A为纵坐标， λ为横坐标，绘制的λ~A曲线。 2．吸收光谱术语：
①吸收峰→λmax ,②吸收谷→λmin ③肩峰→λsh , ④末端吸收 ⑤强带： max>104，弱带： max<103
CrO42- ＋2H＋ = Cr2O72- ＋H2O 溶液中CrO42-、 Cr2O72-的颜色不同，吸光性质也不相同。 故此时溶液pH 对测定有重要影响。
• （二）光学因素
1．非单色光的影响：入射光为单色光是应用该定律的重要前提： 2．杂散光的影响：仪器本身缺陷；光学元件污染造成。
3．反射和散色光的影响：散射和反射使T↓，A↑，吸收光谱变形。 通常可用空白对比校正消除。
表观现象示意
黑色
复合光
无色
吸收黄光
蓝光
二、紫外-可见分光光度法
基于物质吸收紫外或可见光引起分子中价电子跃迁、产 生分子吸收光谱与物质组分之间的关系建立起来的分析方 法，称为紫外可见分光光度法（UV-vis）。
（1）灵敏度高，可测到10-7g/ml。 （2）准确度好，相对误差为1%-5%，满足微量组分测定要求。 （3）选择性好，多种组分共存，无需分离直接测定某物质。 （4）操作简便、快速、选择性好、仪器设备简单、便宜。 （5）应用广泛，无机、有机物均可测定。
特征值
定性、定量分析： 在吸收曲线λmax 处测吸光度A。 ●同一物质的吸收光谱特征值相同, (每一波长处吸光系数相同)。
同一物质相同浓度的吸收曲线重合。
●同一物质不同浓度，其吸收曲线形状相似,λmax相同。（定量） ●不同物质相同浓度，其吸收曲线形状,λmax不同。（定性）
吸收光谱 特征值：
λmax λmin λsh
朗伯定律： 比尔定律：
A=k1 ×L A=k1 ×C
朗伯-比尔定律: A=k C L 液层 厚度
射与光其一的浓束度波平C长行及、单液强A色层度=光厚-以lg通度T及吸系过L,溶的光数一T液乘=均1温积浓0匀-度成度A、=等正1非0保比-散kc持。L射不的变L吸时→光，2物L该质时溶溶，液2液AA的时、吸，TT光在2→度入？A
2、百分吸光系数 / 比吸光系数 E11c%m：
一定λ下,c=1%(W/V)，L=1cm时的吸光度。单位：100ml/g.cm
3、两者关系:
1g/100ml
来自百度文库
M 10
E1% 1cm
4、吸光系数的意义:
（1）一定条件下是一个特征常数。
（2）在温度和波长等条件一定时，ε仅与物质本身的性质有关，与
待测物浓度c和液层厚度L无关；
也会引起偏离。
尤其浓度过高(>0.01mol/L)会使C与A关系偏离定律：
①粒子相互作用加强，吸光能力改变。
②溶液对光的折射率显著改变。
• 故：朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。
溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学
平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。
•
例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡：
即透光率T反映溶液对光吸收程度，通常用1/T反映吸光度。
②吸光度（吸收度）A
定义：A = lg
1 T
I0 = -lgT = lg It
A=-lgT , T=10-A
③T与A关系： A∝1/T，T=0，A=∞ ，T=100%，A=0
二、光的吸收定律
朗伯(Lambert)和比尔(Beer)分别于1760年和1852年研究吸光度 Ａ与溶液厚度Ｌ和其浓度Ｃ的定量关系：
2019/5/28
五、偏离光的吸收定律原因
朗伯-比尔定律：A=k C L
依据Beer定律，A与C关系应 为经过原点的直线
偏离Beer定律的主要因素表 现为以下两个方面： （一）化学因素 （二）光学因素
（一）化学因素
朗—比耳定律假定所有的吸光质点之间不发生相互作用；
该定律适用于稀溶液，溶质的离解、缔合、互变异构及化学变化
称这两种单色光为互补色光，这种现象称为光的互补。
物质的颜色：是由于物质对不同波长的光具有选择性吸收而产生。 即物质的颜色是它所吸收光的互补色。
物质的本色
无色溶液：透过所有颜色的光 有色溶液：透过光的颜色 黑色： 吸收所有颜色的光 白色： 反射所有颜色的光
物质的颜色与光的关系
光谱示意 完全吸收
完全透过
吸收曲线的讨论：
（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应 的波长称为最大吸收波长λmax （2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而 对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。
（3）③吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的 依据之一。 （4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，在 λmax处吸光度A 的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。 （5）在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收 曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。
一、物质对光的选择性吸收
●物质的颜色由物质与光的相互作用方式决定。 ●人眼能感觉到的光称可见光，波长范围是：400~760nm。 ●让白光通过棱镜，能色散出红、橙、黄、绿、蓝、紫等各色光。 ●单色光：单一波长的光 ●复合光：由不同波长的光组合而成的光，如白光。 ●光的互补：若两种不同颜色的单色光按一定比例混合得到白光，
紫外-可见分光光度法的基本原理
一、透光率（透光度）和吸收度
透过光 吸收光 反射光
①透光率T
Ir
t Ia
I0 = It + Ia + Ir
定义：
T=
It I0
×100%
T 取值为0.0 % ~ 100.0 % T = 0.0 % ： 光全吸收 T = 100.0 % ：光全透过
显然，T↑，溶液吸收度↓；T ↓，溶液吸收度↑。
注意! 适用范围
①入射光为单色光，适用于可见、红外、紫外光。 ②均匀、无散射溶液、固体、气体。 ③吸光度A具有加和性。Aa+b+c= Aa + Ab + Ac
三、吸光系数
A=k c L
k = A /c L
1、摩尔吸光系数或Em： 在一定λ下，c=1mol/L，L=1cm时的吸光度。单位：L/(mol.cm)