《实验诊断学》骨髓细胞形态学检查PPT课件

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?晚期妊娠的孕妇作骨髓穿刺术应慎重 ?局部皮肤有弥漫化脓性炎症或局部骨髓

血细胞生成 发 育规律 正常形态学特征
㈠血细胞的生成 造血干细胞的分化及增殖示意图
(1)细胞大小及外形 ●大小:由大逐渐变小(巨核细胞相反) ●外形:由圆形变为不规则形 (红细胞始终呈圆形)
(2)细胞核 ●大小:由大变小(巨核细胞相反) ●核形:由圆变为分叶状或不规则形 (成熟红细胞无核) ●核位置:居中或偏位
AML(M1 — M5) (M6) AEOL POX(-)acute leukemia : AML(M0,M5a,M6,M7) ALL ABaL AUL
㈡中性粒细胞碱性磷酸酶染色 NAP
NAP 临床意义
1.慢性粒细胞性白血病和类白血病反应的 鉴别 2.再生障碍性贫血和阵发性睡眠性血红蛋 白尿的鉴别 3.化脓性感染和病毒性感染的鉴别
骨髓涂片和染色注意事项
? 载玻片要洁净;推端要光滑 ?推玻片与载玻片呈约 30度角 ?骨髓抽取后要立即涂片 ,推制骨髓片约 8张左右
送检 ? 涂片一般不用抗凝剂 ? 涂片时要保留片尾和边缘 ? 涂片制成后,快速摇动或扇干,不可火烤 ? 染色太浅-干燥后重染,若太深-干燥后-滴
数滴甲醇-稍停片刻-冲洗
●核染色质:由细致疏松变粗糙密集, 着色由浅变深
●核膜:由不明显到明显 ●核仁:从有到无 (3)细胞浆 ●量:由少到多 ●颜色:由深蓝变浅、变为红色
(成熟红细胞) ●颗粒:从无到有,从非特异性到特异性 (4)胞核与胞浆之比 一般由大变小
Rubriblast (原红细胞) 10-19 u
Nucleus -
贫血Anemia
增生性贫血Hyperproliferative anemia ?溶血性贫血 Hemolytic anemia ? 缺铁性贫血 Iron deficiency anemia ?失血后贫血 Posthemorrhagic anemia ? 巨幼细胞性贫血 Megaloblastic anemia
骨髓细胞形态学检查 Xiaoyan Zhang
概念
骨髓象检查是用细胞形态学检查的方法 来观察骨髓中细胞的数量和质量的变化, 借以了解骨髓的造血功能,对疾病的诊 断、疗效观察、预后的判断等都具有重 大价值。
骨髓细胞形态学检查的临床应用
⒈确诊某些造血系统或非造血系统疾病
特征性细胞形态改变
各类白血病
恶性组织细胞增生症 海兰组织细胞增生症
增生低下性贫血Hypoproliferative anemia ? 再生障碍性贫血 Aplastic anemia
再障 增生性贫血
白血病Leukemia
急性非淋巴细胞白血病AML
FAB classification WHO classification
急性淋巴细胞白血病ALL
APL
Fagot Auer bodies
多发性骨髓瘤
骨髓转移癌
霍奇金病 R-S细胞 NHL骨髓浸润
戈谢( Gancher )病 尼曼-匹克病 疟疾 黑热病
⒉辅助诊断某些造血系统疾病 骨髓造血功能改变为主 溶血性贫血(HA) 血小板减少性紫癜 骨髓增生异常综合征(MDS) 骨髓增殖性疾病(MPD) 真性红细胞增多症(PV) 原发性血小板增多症(ET)
Cytoplasm pink-tan with blue tinge
晚幼红细胞脱核
原粒细胞
早幼粒细胞
中百度文库粒细胞
晚幼粒细胞
杆状核中性粒细胞
分叶核中性粒细胞
标本的采集
骨髓取材的部位和方法 ?部位:胸骨、棘突、髂骨等处
?方法:多用穿刺法吸取
标本采集的质量保证
?穿刺必须严格无菌 ?吸取骨髓液的动作要缓慢:首次吸取量
㈢非特异性酯酶染色NSE 和氟化钠抑制试验
NSE染色和NaF抑制实验的临床意义
? 急性单核细胞白血病时白血病细胞呈强 阳性反应,但单核细胞中的酶活性可被 NaF抑制。急性粒细胞白血病时呈阴性或 弱阳性反应,阳性反应不被NaF抑制。本 染色法主要用于急性单核细胞白血病与 急性粒细胞白血病的鉴别。
㈣糖原染色( PAS)
⒈白细胞分类计数 ⒉成熟红细胞形态有无异常 ⒊略估血小板形态与数量 ⒋注意有无寄生虫疟原虫
四.血细胞的细胞化学染色
细胞化学染色是以细胞形态学 为基础,根据化学反应的原理应 用骨髓涂片进行固定,化学反应 显色,复染等程序染色光学显微 镜下观察
㈠过氧化物酶染色( Peroxidase POX)
Peroxidase( POX ) Staining
PAS Reaction
结果:
正常血细胞 PAS反应: 原粒(-),早幼粒细胞 – 中性分叶核( +) 单核细胞(弱 +) 淋巴细胞大多为( -) 幼红细胞及成熟红细胞( -) 巨核细胞及血小板( +)
PAS Reaction
临床意义:
1. 急性白血病的鉴别诊断: ? AML原粒细胞阴性或弱阳,阳性反应物为细颗粒或均 匀红色. ? 急单白血病细胞多阳性反应,呈均匀红色或细颗粒状 ? ALL细胞常阳性,呈粗颗粒状或块状 ? 急性巨核细胞白血病细胞呈阳性反应 ? 急性红白血病中幼红细胞呈强阳性反应
打印骨髓结果图文报告单
将骨髓图文结果存入计算机
骨髓片存档保存
常见血液病 骨髓细胞形态学特征
正常骨髓象
?有核细胞增生:活跃,粒/红比例为2~4:1
?粒细胞系:占全部有核细胞的50%~60%左右,其中原粒 细胞<2%,早幼粒细胞<4%,分叶核<杆状核,嗜碱性粒细 胞<1%,嗜酸性粒细胞<5%
?红细胞系:幼红细胞占有核细胞20%,其中原红细胞<1%, 早幼红细胞<3%,中、晚幼红细胞各10%。
结果:
POX存在于粒细胞和单核细胞系中。
POX(+)细胞:
原粒细胞II型
早幼粒细胞---中性分叶核粒细胞
嗜酸性粒细胞
幼稚和成熟单核细胞
POX(-)细胞:
原粒细胞I型
嗜碱性粒细胞
原单核细胞
淋巴细胞
幼红细胞
巨核细胞
Peroxidase( POX ) Staining
临床意义:
用于急性白血病类型的鉴别诊断 POX(+)acute leukemia :
评估 ?是否见到特殊的病理细胞和寄生虫
?报告血涂片检查结果
?分类计数有核细胞 ?注意观察红细胞形态有无异常 ?有无其他异常细胞出现 ?观察血小板是否有异常 ?观察有无血液寄生虫
?报告组织化学染色结果 ?填写诊断意见
?肯定性诊断 ?符合性诊断 ?疑似性诊断 ?阴性(或排除性)诊断 ?描述骨髓象特征
2. MDS与其他红细胞系统疾病相鉴别 3. 其他: 腺癌细胞强阳性;Gaucher细胞(+);Nieman-Pick(-)
几种常见急性白血病的细胞化学染色结果
急淋 急粒
急单
红白血病
POX

+~+++
+~+++ 视合并的白细胞类似而定
SB

++~+++
+~ –
同上
ASD、NEC –
++~+++
+~±
为0.1-0.2ml ?多部位穿刺:可提高某些疾病诊断率
骨髓取材满意的指标
?抽取时病人有短暂的疼感 ?骨髓液中可见到淡黄色骨髓小粒或油滴 ?涂片检查有骨髓特有的细胞 ?含大量幼稚细胞,杆状核多于分叶核
干抽
?概念:是指非技术错误或穿刺位置不当 而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。
?原因: ?原发性和继发性骨髓纤维化症 ?骨髓极度增生 ?骨髓增生减低 ?肿瘤骨髓浸润
?将骨髓图文结果存入计算机并存档保存
低倍镜观察(取材 涂片 有核细胞增生 巨核细胞 病理细胞
油镜观察 骨髓有核细胞分类计数200-500个
细胞系形态学观察
粒系 红系 单核系 淋巴系 浆系 其他细胞
计算结果(各细胞系百分比 粒红比值)
观察血片
组织化学染色
填写骨髓图文结果报告单
(骨髓细胞特征 血片细胞特征 组化特征 录入典型图像)
⒊鉴别诊断
原因不明发热、淋巴结、脾或肝 肿大,骨痛或关节痛
PB异形淋巴细胞、类白血病反应、 嗜酸细胞增多症
适应症
?确诊某些造血系统疾病 ?协助诊断部分血液系统疾病 ?提高某些疾病的诊断率 ?患者多次检查外周血异常;有不明原因
的肝脾淋巴结肿大
禁忌症
?由于凝血因子缺陷引起的出血性疾病如 血友病
Rubricyte (中幼红细胞) 8-12 u Nucleus no nucleoli with clumpy chromatin Cytoplasm moderate amount gray-blue with pink-tan
Metarubricyte (晚幼红细胞) 8-10 u
Nucleus round and pycnotic
?巨核细胞系:在一张骨髓片上可见巨核细胞7~35个,主 要是颗粒性和产生血小板性巨核细胞,血小板散在或成簇
?淋巴细胞系:占20%,小儿可占40%。主要是成熟淋巴细 胞
?单核细胞及其他细胞:单核细胞一般<5%,浆细胞一般<2%。 其他细胞可少量。
?无异常细胞及寄生虫
?正常骨髓象应具备的条件
?有核细胞增生活跃 ?各系各阶段细胞所占有核细胞的比例大 致在正常参考范围 ?各系各阶段细胞形态上无明显异常 ?无特殊病理细胞及血液寄生虫
round with fine chromatin and 2-5 nucleoli
Cytoplasm scanty and deep blue
Prorubricyte (早幼红细胞) 10-15u Nucleus 2-4 nucleoli with thickened chromatin Cytoplasm small amount and blue
M:E=2~4:1
粒红比例改变的临床意义
? 正常:见于①正常骨髓象;②粒红两系平行增 多如红白血病,平行减少如再生障碍性贫血; ③粒红两系基本不变化的造血系统疾病如多发 性骨髓瘤、骨髓转移瘤、特发性血小板减少性 紫癜。
? 增高:①粒细胞系增多,如急慢性粒细胞白血 病、急性化脓菌感染、中性粒细胞性类白血病 反应;②红细胞系减少,如纯红细胞性再生障 碍性贫血
三.骨髓细胞形态学检查的方法和内容 ㈠低倍镜检查 ⒈确定骨髓标本取材和涂片满意?
⒉观察骨髓增生度
骨髓增生程度分级
有核细胞:成熟红细胞 有核细胞% 常见原因
增生极度活跃 1:0.5-2
1:1
>50
白血病
增生明显活跃 1:5-12
1:10
>10 白血病,增贫
增 生 活 跃 1:16-32
1:20
1-10 正常,各种贫血
Chronic Myelocytic Leukemia
同上
α-NAE

– ~++
++~+++
同上
α-NAE+NaF – 不被NaF抑制 能被NaF抑制
同上
NAP
增加
减少
正常或增加
同上
PAS
+,粗 – 或+,弥漫 – 或+,弥漫性 +++
颗粒状 或块状
性淡红色 淡红色或细颗 粒状
㈤铁染色 细胞外铁 细胞内铁
铁染色
原理
细胞外铁 (幼红细胞之外的铁): 储存在单核 -吞噬细胞系统内的铁 为体内储存铁
2. 铁粒幼细胞性贫血 :环形铁粒幼细胞 >15% 3. 血色病的诊断
骨髓象报告单的填写
1.骨髓特征 2.报告血涂片检查结果 3.报告组织化学检查结果 4.填写诊断意见
?骨髓特征
?对取材、涂片、染色的评价:采用“良 好”“尚可”“不佳”三级标准
?骨髓有核细胞的增生程度和粒红 比值 ?分别叙述各系细胞的情况 ?巨核细胞和血小板的数量和形态是从全片
增 生 减 低 1:35-70
1:50
0.5-1
CAA
增生明显减低 1:100-300 1:200
<0.5
AAA
⒊观察巨核细胞
数量:低倍镜 成熟程度:油镜 产血小板功能 形态
4.异常细胞
异常组织细胞 转移癌细胞 Gaucher细胞 Niemann-Pick细胞
(二)油浸镜检查
㈡油镜下检查
有核细胞计数、分类 粒、红比值(myeloid:erythroid)
细胞内铁 : 幼红细胞内的铁。正常幼红细胞的胞核 周围可见 1-5个细小铁颗粒。 含铁颗粒的幼红细胞称为 铁粒幼细胞
环形铁粒幼细胞 : 如含>10个粗大铁粒并环绕 胞核排列超过核周径 2/3
铁染色
参考值
1.细胞外铁: 1+ -- 2+ 2.细胞内铁: 20% -- 90%
临床意义
1. IDA (细胞内铁 <15%)与非缺铁性贫血 之间的鉴别
粒红比例改变的临床意义
? 减低:①粒细胞系减少,如粒细胞缺乏 症;②红细胞系增多,如增生性贫血、 红细胞增多症。
观察细胞形态:异常细胞,寄生虫 粒系总数各阶段比例 红系总数各阶段比例 淋巴细胞系统各阶段比例、总数 注意单核细胞总数比例 浆细胞总数、比例 巨核细胞计数、分类
㈢Blood Smear
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