脱落细胞学检查技术及基本知识
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免疫组化
流式细胞仪DNA分析
染色体倍体分析 电镜
2013-8-5 29
第二章 脱落细胞检查的基本知识
第一节 细胞诊断学的基本概念
一、细胞增生活跃
细胞体积增大，核明显增大，核染色质增多，颗粒 增粗，核仁增大增多，核浆比例失常，胞浆蓝染（ 巴氏），可伴核分裂像。
二、组织修复细胞
组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞 特征：细胞多成片出现，似合体细胞，排列规则； 细胞稍增大，胞核也增大，核不深染，胞浆尚丰富，深 染；核仁明显增大或增多；可能出现核分裂像 。
成本较低
2013-8-5
去除血黏液和大量炎性遮盖物
细胞分布均匀集中，不易重叠
镜下观察省力，不易漏诊
成本较高
14
染色 一、瑞特染色法(Wright ' s)
特点:固定和染色合并在一起,手续简便,染色时间短,对白 细胞特异性颗粒着色较好,但对核的着色差. 1.瑞氏染料:由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复 合染料。 亚甲蓝(M+)为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种 结构。通常为氯盐，即氯化美蓝,其有色部分为阳离子，无 色部分为阴离子 。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等 次级染料。市售美蓝中部分已被氧化为天青。 伊红(E-)通常为钠盐,既伊红化钠有色部分为阴离子，无 色部分为阳离子，其有色部分为酸性 。 伊红和亚甲蓝混合后，产生一种憎液性胶体伊红化美蓝 中性沉淀(ME)，即瑞特染料(其溶于甲醇即瑞特染液)。 ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E -
2013-8-5 17
4.影响因素: ⑴PH对细胞染色影响:细胞各种成分均为不同蛋白质， 由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液PH而定， 在偏酸性环境中下在电荷增多，易与伊红结合，染 色偏红；在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝或 天青结合，染色偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度 十分敏感，染色用片必须清洁，无酸碱污染。配制 瑞特液必须用优质甲醇，稀释染液必须用缓冲液， 冲洗用水应近中性，否则可导致各种细胞染色反应 异常，以致识别困难，甚至造成错误。 ⑵空气氧化作用:新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是 37℃下贮存一定时间，待染料成熟，主要是美蓝逐 渐转变为天青B后才能使用，贮存时愈久，染色效 果愈好。 ⑶挥发:瑞特染液贮存过程中，必须塞严，以防止甲醇 挥发和被氧化成甲酸。有人主张在配方中加入甘油 30ml，防止甲醇挥发，并可使细胞染色清晰。甲醇 必须纯净(AR级)，如甲醇中丙酮含量过多，染色偏18 2013-8-5 酸，使白细胞着色不良。
5.瑞氏染液配制： (1) 瑞氏染液Ⅰ液： 瑞氏染料 830mg或 1g 甲醇（ AR ） 500ml 或 600ml 甘油 15ml 先将干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置 乳钵内， 用乳棒轻轻 敲碎染料成粉末，再行研磨 至听不到 研芝麻声 即呈细粉末声，加少许甲醇溶 解研磨，使染料在乳缸内显“一面镜”光泽，而无 染料粉粒沉着，再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮， 静置片刻，将上层液体倒入 一 清洁储存瓶内（最 好用装过甲醇的空瓶），再加甲醇研磨，重复数次， 直至乳钵内染料及甲醇用完为止，摇匀，用甘油密 封瓶口，存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分 解就越好，一般储存 3 个月以上为佳。
细胞诊断学的应用价值
（一）对初筛恶性肿瘤具有重要意义 （二）可发现早期癌，做到早期诊断 （三）具有广泛应用的基础 （四）对难于取得组织学诊断材料时，
细胞学诊断可弥补形态学诊断的空白。
பைடு நூலகம்
2013-8-5
26
细胞学诊断的局限性和片面性
原因：
（一）取材不佳 （二）制片质量欠佳 （三）病变的情况：肿块大小、肿物的性 质、肿瘤分化程度、肿瘤的组织类型、 肿瘤的早晚、肿瘤与周围组织关系等。
6.染色: a.取已干燥的血涂片，用蜡笔在血膜两端划 线 b.将血涂片放平 ( 置于染色架上 ) ，用滴管滴 染液 3 － 5 滴于片上，并用滴管或吸球将染 液驱散，使其布满整个血膜，放置约 30 秒钟。 c. 加入等量缓冲液，用吸球轻轻吹动，使染 液与缓冲液充分混匀，放置染色约 5 － 10 分 钟。 d.然后用细小流水自片端冲去染液，切勿先 倾去染液再用水冲。 2013-8-5 21 e.血片自然干燥后即可镜检。
2013-8-5 10
结果判定：胞核呈紫蓝色，核仁红色，底 层细胞、中层细胞和表层角化前细胞为淡 蓝色，不全角化细胞（角化前细胞）呈粉 红色，角化细胞呈桔黄色。
适用于上皮细胞染色和阴道涂片观察女性 激素的影响 优点：细胞具有多色性
缺点：染色程序较复杂
2013-8-5
11
注意事项：
2013-8-5
16
3.染色原理: 细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学 的亲和作用，各种细胞成分化学性质不同， 对各种染料的亲和力也不一样。 ⑴.血红蛋白，嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与 酸性染料伊红结合，染红色，称为嗜酸性物 质； ⑵细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质， 与碱性染料美蓝或天青结合，染蓝色，称为 嗜碱性物质； ⑶中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结 合，染淡紫红色，称为中性物质。
2013-8-5 6
（二）涂片制备方法
推片法 涂抹法 压拉涂片法 吸管推片法 喷射法 印片法
2013-8-5 7
（三）涂片的固定
目的：保持细胞形态结构，防止其自溶。 固定液：首选95％酒精，乙醇乙醚，氯仿 乙醇 注意事项：巴氏染色，涂片勿在空气中干 燥后染色；固定时间不短于15分钟（48h内 进行巴氏染色）；固定液要达到90％以上； 液体标本离心后涂片，待潮干后再固定， 宫颈的刮片、痰涂片、拉网涂片、内窥镜 的刷片、针吸涂片应立即固定。
2013-8-5 19
(2) 瑞特染液Ⅱ液缓冲液： 1) 缓冲液作用：染色对氢离子浓度是十分敏感的， 据观察 pH 值的改变，可使蛋白质与染料形成的化 合物重新离解。 缓冲液须保持 一定的 pH 使染色稳 定， pH 一般在 6.4~6.8 ，偏碱性染料可与缓冲液中 酸基起 中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基 起中和作用，使 pH 恒定。 2) 缓冲液配制（ pH6.4~6.8 ，弱酸性）： 配方 1 ： 配方 2 ： KH 2 PO 4 —0.3g Na 2 HPO 4 —0.2g(1% 磷酸二氢 钾 30ml 加 1% 磷酸氢二钠 20ml ) H 2 O( 新鲜 ) 加至 1000ml 置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污 染则应报废。 2013-8-5 20
2013-8-5 22
诊断回报方式
分级诊断法和描述性诊断法。
改良巴氏五级分类法：
Ⅰ级：为见异常细胞 Ⅱ级：细胞有异型性但无恶性特征 Ⅲ级：疑为恶性但证据不足 Ⅳ级：高度提示恶性 Ⅴ级：肯定恶性
2013-8-5 23
细胞学诊断的质量管理体系
标本采集
制片过程 阅片诊断 理论学习
3 瑞氏－吉姆萨染色：多用于血液、骨髓细 胞学检查
2013-8-5
13
常规巴氏制片与液基薄层制片比较
巴氏
10～20％标本移至玻片 干固定 制片技术不稳定，不能重 复
液基薄层制片
100％标本收集至保存液中 湿固定 技术稳定，可重复
易受血黏液炎性渗出物覆 盖 细胞分布不均匀，易重叠 镜下观察费力，易漏诊
2013-8-5 8
固定方法：带湿固定
干燥固定 固定时间：15～30min （四）涂片的染色 目的：使细胞结构清晰显示；应用各种染色使细 胞浆与核恰当显示不同颜色；使细胞透明度高， 结构清晰。
方法：常规染色为巴氏染色，配合HE、Giemsa、
特染等。
2013-8-5 9
1 巴氏染色法
• 水化：固定好的涂片→80％、70％、50％乙醇→蒸馏水
染液要充分溶解
苏木素要染前月余配制，用时每天过滤1次，加
新液。室温低时不易着色，可<50℃加热
盐酸分化前镜下观察以确定分化时间
涂片在橘黄液中不宜过长EA36染液配制和使用前
应用滤纸调试
2013-8-5
12
2
HE染色：透明度好、核浆对比鲜明、染
色效果稳定，核紫蓝色、浆淡玫瑰红色。 步骤简单，适用于痰涂片。
2013-8-5 4
浆膜腔积液的处理：
抽出应立即送检（4℃保存，24h内处理完
标本） 对检查影响较大的是过多成熟的红细胞和 标本的严重凝固，需处理，淋巴细胞分离 液或低渗方法可去除红细胞，凝固的积液 将凝块吸出，剩余液体离心涂片。
2013-8-5 5
二、涂片制作
（一）要求： 1 标本要新鲜 2 操作要轻柔：细胞分布均匀；薄厚适当 勿挤压摩擦，以免细胞损伤变形； 3 玻片要清洁 4 涂片要牢固 5 涂片数量 6 标号准确
各1min • 染核：苏木素染3～5min • 分色：1％盐酸中数秒，水洗 • 蓝化：置饱和碳酸锂溶液中1min，水洗 • 脱水：50％、70％、80％、95％乙醇各1min • 染浆：置于橘黄G液中染2～4min→95％乙醇洗2次→置于 EA36染液中4～5min • 脱水：95％、无水乙醇各1～2min→二甲苯透明2～ 3min ×2 • 封片：中性树胶封固
脱落细胞学
哈尔滨医科大学大庆校区临床基 础检验教研室 梁松鹤
2013-8-5 1
第一章 脱落细胞检查技术和临床应用评价
脱落细胞学：是对人体各部位特别是管腔器 官表面的脱落细胞，或对病变组织通过细针 吸取的方法获得的细胞染色并在显微镜下观 察作出诊断，又称诊断细胞学。 标本来源：自然排出物
体腔抽出液
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27
不足：
1
有一定误诊率：细针穿刺10％假阴性，痰涂 片>20％的假阴性
2 具体部位难确定 3 肿瘤分型困难 4 非肿瘤性疾病诊断研究少
细胞诊断学与病理诊断的关系
细胞学诊断准确性低于病理组织学诊断，因 此细胞学诊断有赖于病理组织学诊断的证实。
2013-8-5 28
辅助检查
组织化学
2013-8-5
15
2.甲醇的作用:用 甲醇作瑞氏 染料溶剂，即成瑞氏染液。
甲醇是瑞氏染料良好溶剂，有两种作用： （ 1 ）溶解:甲醇使瑞氏染料中美蓝（ M ）与伊红（ E ）在 溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着 色。 ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E 在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天 青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色，但不能使胞 浆染为蓝色，多余 美蓝就可以 使胞浆染成蓝色，染色主要 是化学作用，是离子彼此结合的反应。 （ 2 ）固定,升温:甲醇具有强大的脱水力，可将细胞固定在 一定形态及增加细胞结构的表面积，提高细胞对染料吸收作 用，同时由于甲醇吸附染色液中的水，使染色液升温，加速 染色反应。
细针穿刺吸取液
2013-8-5 2
第一节 标本采集和涂片制作
一、标本采集
原则：尽量减少受检者的痛苦，取得合 作；方法简便、实用、经济；尽量取得 足够供诊断的细胞成分；及时快速送检 立刻制片；绝对避免污染；标本号标记 清楚。
途径： 细针穿刺；脱落细胞学检查
2013-8-5 3
常用方法：
直视采集法：直接用刮片刮取、吸管吸取、 刷洗 自然分泌液采取法：痰涂片、尿液涂片、 前列腺液涂片、乳头溢液涂片 灌洗法：空腔器官、盆腔或腹腔 摩擦法：鼻咽、食管、胃 针穿抽吸法：浆膜腔关节腔积液，淋巴结、 软组织、甲状腺、肝
第二节 显微镜检查
一、阅片
要求：核对送检单与涂片的编号；了解病史及临 床情况与送检目的；涂片应封固；先低倍镜逐个 视野仔细阅片每个视野部分重叠，以免遗漏；找 到具有诊断意义或值得讨论的细胞，要作标记。 观察项目：涂片中的细胞成分；细胞的排列方式； 一群细胞的毗邻关系；单个细胞的特征；核浆比 例；细胞的退变情况；涂片背景中细胞成分和非 细胞成分。
复查会诊
定期随访
2013-8-5 24
第三节 脱落细胞学检查的临床应用评价
优势：安全简便、快速准确、检查范围大 细胞诊断学的应用范畴 （一）防癌普查 （二）肿瘤治疗后随访观察 （三）癌前病变的追踪观察 （四）作为某种治疗手段的监测指标 （五）估计卵巢功能，指导内分泌治疗
2013-8-5 25
2013-8-5 30
流式细胞仪DNA分析
染色体倍体分析 电镜
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第二章 脱落细胞检查的基本知识
第一节 细胞诊断学的基本概念
一、细胞增生活跃
细胞体积增大，核明显增大，核染色质增多，颗粒 增粗，核仁增大增多，核浆比例失常，胞浆蓝染（ 巴氏），可伴核分裂像。
二、组织修复细胞
组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞 特征：细胞多成片出现，似合体细胞，排列规则； 细胞稍增大，胞核也增大，核不深染，胞浆尚丰富，深 染；核仁明显增大或增多；可能出现核分裂像 。
成本较低
2013-8-5
去除血黏液和大量炎性遮盖物
细胞分布均匀集中，不易重叠
镜下观察省力，不易漏诊
成本较高
14
染色 一、瑞特染色法(Wright ' s)
特点:固定和染色合并在一起,手续简便,染色时间短,对白 细胞特异性颗粒着色较好,但对核的着色差. 1.瑞氏染料:由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复 合染料。 亚甲蓝(M+)为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种 结构。通常为氯盐，即氯化美蓝,其有色部分为阳离子，无 色部分为阴离子 。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等 次级染料。市售美蓝中部分已被氧化为天青。 伊红(E-)通常为钠盐,既伊红化钠有色部分为阴离子，无 色部分为阳离子，其有色部分为酸性 。 伊红和亚甲蓝混合后，产生一种憎液性胶体伊红化美蓝 中性沉淀(ME)，即瑞特染料(其溶于甲醇即瑞特染液)。 ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E -
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4.影响因素: ⑴PH对细胞染色影响:细胞各种成分均为不同蛋白质， 由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液PH而定， 在偏酸性环境中下在电荷增多，易与伊红结合，染 色偏红；在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝或 天青结合，染色偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度 十分敏感，染色用片必须清洁，无酸碱污染。配制 瑞特液必须用优质甲醇，稀释染液必须用缓冲液， 冲洗用水应近中性，否则可导致各种细胞染色反应 异常，以致识别困难，甚至造成错误。 ⑵空气氧化作用:新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是 37℃下贮存一定时间，待染料成熟，主要是美蓝逐 渐转变为天青B后才能使用，贮存时愈久，染色效 果愈好。 ⑶挥发:瑞特染液贮存过程中，必须塞严，以防止甲醇 挥发和被氧化成甲酸。有人主张在配方中加入甘油 30ml，防止甲醇挥发，并可使细胞染色清晰。甲醇 必须纯净(AR级)，如甲醇中丙酮含量过多，染色偏18 2013-8-5 酸，使白细胞着色不良。
5.瑞氏染液配制： (1) 瑞氏染液Ⅰ液： 瑞氏染料 830mg或 1g 甲醇（ AR ） 500ml 或 600ml 甘油 15ml 先将干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置 乳钵内， 用乳棒轻轻 敲碎染料成粉末，再行研磨 至听不到 研芝麻声 即呈细粉末声，加少许甲醇溶 解研磨，使染料在乳缸内显“一面镜”光泽，而无 染料粉粒沉着，再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮， 静置片刻，将上层液体倒入 一 清洁储存瓶内（最 好用装过甲醇的空瓶），再加甲醇研磨，重复数次， 直至乳钵内染料及甲醇用完为止，摇匀，用甘油密 封瓶口，存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分 解就越好，一般储存 3 个月以上为佳。
细胞诊断学的应用价值
（一）对初筛恶性肿瘤具有重要意义 （二）可发现早期癌，做到早期诊断 （三）具有广泛应用的基础 （四）对难于取得组织学诊断材料时，
细胞学诊断可弥补形态学诊断的空白。
பைடு நூலகம்
2013-8-5
26
细胞学诊断的局限性和片面性
原因：
（一）取材不佳 （二）制片质量欠佳 （三）病变的情况：肿块大小、肿物的性 质、肿瘤分化程度、肿瘤的组织类型、 肿瘤的早晚、肿瘤与周围组织关系等。
6.染色: a.取已干燥的血涂片，用蜡笔在血膜两端划 线 b.将血涂片放平 ( 置于染色架上 ) ，用滴管滴 染液 3 － 5 滴于片上，并用滴管或吸球将染 液驱散，使其布满整个血膜，放置约 30 秒钟。 c. 加入等量缓冲液，用吸球轻轻吹动，使染 液与缓冲液充分混匀，放置染色约 5 － 10 分 钟。 d.然后用细小流水自片端冲去染液，切勿先 倾去染液再用水冲。 2013-8-5 21 e.血片自然干燥后即可镜检。
2013-8-5 10
结果判定：胞核呈紫蓝色，核仁红色，底 层细胞、中层细胞和表层角化前细胞为淡 蓝色，不全角化细胞（角化前细胞）呈粉 红色，角化细胞呈桔黄色。
适用于上皮细胞染色和阴道涂片观察女性 激素的影响 优点：细胞具有多色性
缺点：染色程序较复杂
2013-8-5
11
注意事项：
2013-8-5
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3.染色原理: 细胞的染色既有物理的吸附作用，又有化学 的亲和作用，各种细胞成分化学性质不同， 对各种染料的亲和力也不一样。 ⑴.血红蛋白，嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与 酸性染料伊红结合，染红色，称为嗜酸性物 质； ⑵细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质， 与碱性染料美蓝或天青结合，染蓝色，称为 嗜碱性物质； ⑶中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结 合，染淡紫红色，称为中性物质。
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（二）涂片制备方法
推片法 涂抹法 压拉涂片法 吸管推片法 喷射法 印片法
2013-8-5 7
（三）涂片的固定
目的：保持细胞形态结构，防止其自溶。 固定液：首选95％酒精，乙醇乙醚，氯仿 乙醇 注意事项：巴氏染色，涂片勿在空气中干 燥后染色；固定时间不短于15分钟（48h内 进行巴氏染色）；固定液要达到90％以上； 液体标本离心后涂片，待潮干后再固定， 宫颈的刮片、痰涂片、拉网涂片、内窥镜 的刷片、针吸涂片应立即固定。
2013-8-5 19
(2) 瑞特染液Ⅱ液缓冲液： 1) 缓冲液作用：染色对氢离子浓度是十分敏感的， 据观察 pH 值的改变，可使蛋白质与染料形成的化 合物重新离解。 缓冲液须保持 一定的 pH 使染色稳 定， pH 一般在 6.4~6.8 ，偏碱性染料可与缓冲液中 酸基起 中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基 起中和作用，使 pH 恒定。 2) 缓冲液配制（ pH6.4~6.8 ，弱酸性）： 配方 1 ： 配方 2 ： KH 2 PO 4 —0.3g Na 2 HPO 4 —0.2g(1% 磷酸二氢 钾 30ml 加 1% 磷酸氢二钠 20ml ) H 2 O( 新鲜 ) 加至 1000ml 置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污 染则应报废。 2013-8-5 20
2013-8-5 22
诊断回报方式
分级诊断法和描述性诊断法。
改良巴氏五级分类法：
Ⅰ级：为见异常细胞 Ⅱ级：细胞有异型性但无恶性特征 Ⅲ级：疑为恶性但证据不足 Ⅳ级：高度提示恶性 Ⅴ级：肯定恶性
2013-8-5 23
细胞学诊断的质量管理体系
标本采集
制片过程 阅片诊断 理论学习
3 瑞氏－吉姆萨染色：多用于血液、骨髓细 胞学检查
2013-8-5
13
常规巴氏制片与液基薄层制片比较
巴氏
10～20％标本移至玻片 干固定 制片技术不稳定，不能重 复
液基薄层制片
100％标本收集至保存液中 湿固定 技术稳定，可重复
易受血黏液炎性渗出物覆 盖 细胞分布不均匀，易重叠 镜下观察费力，易漏诊
2013-8-5 8
固定方法：带湿固定
干燥固定 固定时间：15～30min （四）涂片的染色 目的：使细胞结构清晰显示；应用各种染色使细 胞浆与核恰当显示不同颜色；使细胞透明度高， 结构清晰。
方法：常规染色为巴氏染色，配合HE、Giemsa、
特染等。
2013-8-5 9
1 巴氏染色法
• 水化：固定好的涂片→80％、70％、50％乙醇→蒸馏水
染液要充分溶解
苏木素要染前月余配制，用时每天过滤1次，加
新液。室温低时不易着色，可<50℃加热
盐酸分化前镜下观察以确定分化时间
涂片在橘黄液中不宜过长EA36染液配制和使用前
应用滤纸调试
2013-8-5
12
2
HE染色：透明度好、核浆对比鲜明、染
色效果稳定，核紫蓝色、浆淡玫瑰红色。 步骤简单，适用于痰涂片。
2013-8-5 4
浆膜腔积液的处理：
抽出应立即送检（4℃保存，24h内处理完
标本） 对检查影响较大的是过多成熟的红细胞和 标本的严重凝固，需处理，淋巴细胞分离 液或低渗方法可去除红细胞，凝固的积液 将凝块吸出，剩余液体离心涂片。
2013-8-5 5
二、涂片制作
（一）要求： 1 标本要新鲜 2 操作要轻柔：细胞分布均匀；薄厚适当 勿挤压摩擦，以免细胞损伤变形； 3 玻片要清洁 4 涂片要牢固 5 涂片数量 6 标号准确
各1min • 染核：苏木素染3～5min • 分色：1％盐酸中数秒，水洗 • 蓝化：置饱和碳酸锂溶液中1min，水洗 • 脱水：50％、70％、80％、95％乙醇各1min • 染浆：置于橘黄G液中染2～4min→95％乙醇洗2次→置于 EA36染液中4～5min • 脱水：95％、无水乙醇各1～2min→二甲苯透明2～ 3min ×2 • 封片：中性树胶封固
脱落细胞学
哈尔滨医科大学大庆校区临床基 础检验教研室 梁松鹤
2013-8-5 1
第一章 脱落细胞检查技术和临床应用评价
脱落细胞学：是对人体各部位特别是管腔器 官表面的脱落细胞，或对病变组织通过细针 吸取的方法获得的细胞染色并在显微镜下观 察作出诊断，又称诊断细胞学。 标本来源：自然排出物
体腔抽出液
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不足：
1
有一定误诊率：细针穿刺10％假阴性，痰涂 片>20％的假阴性
2 具体部位难确定 3 肿瘤分型困难 4 非肿瘤性疾病诊断研究少
细胞诊断学与病理诊断的关系
细胞学诊断准确性低于病理组织学诊断，因 此细胞学诊断有赖于病理组织学诊断的证实。
2013-8-5 28
辅助检查
组织化学
2013-8-5
15
2.甲醇的作用:用 甲醇作瑞氏 染料溶剂，即成瑞氏染液。
甲醇是瑞氏染料良好溶剂，有两种作用： （ 1 ）溶解:甲醇使瑞氏染料中美蓝（ M ）与伊红（ E ）在 溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着 色。 ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E 在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天 青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色，但不能使胞 浆染为蓝色，多余 美蓝就可以 使胞浆染成蓝色，染色主要 是化学作用，是离子彼此结合的反应。 （ 2 ）固定,升温:甲醇具有强大的脱水力，可将细胞固定在 一定形态及增加细胞结构的表面积，提高细胞对染料吸收作 用，同时由于甲醇吸附染色液中的水，使染色液升温，加速 染色反应。
细针穿刺吸取液
2013-8-5 2
第一节 标本采集和涂片制作
一、标本采集
原则：尽量减少受检者的痛苦，取得合 作；方法简便、实用、经济；尽量取得 足够供诊断的细胞成分；及时快速送检 立刻制片；绝对避免污染；标本号标记 清楚。
途径： 细针穿刺；脱落细胞学检查
2013-8-5 3
常用方法：
直视采集法：直接用刮片刮取、吸管吸取、 刷洗 自然分泌液采取法：痰涂片、尿液涂片、 前列腺液涂片、乳头溢液涂片 灌洗法：空腔器官、盆腔或腹腔 摩擦法：鼻咽、食管、胃 针穿抽吸法：浆膜腔关节腔积液，淋巴结、 软组织、甲状腺、肝
第二节 显微镜检查
一、阅片
要求：核对送检单与涂片的编号；了解病史及临 床情况与送检目的；涂片应封固；先低倍镜逐个 视野仔细阅片每个视野部分重叠，以免遗漏；找 到具有诊断意义或值得讨论的细胞，要作标记。 观察项目：涂片中的细胞成分；细胞的排列方式； 一群细胞的毗邻关系；单个细胞的特征；核浆比 例；细胞的退变情况；涂片背景中细胞成分和非 细胞成分。
复查会诊
定期随访
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第三节 脱落细胞学检查的临床应用评价
优势：安全简便、快速准确、检查范围大 细胞诊断学的应用范畴 （一）防癌普查 （二）肿瘤治疗后随访观察 （三）癌前病变的追踪观察 （四）作为某种治疗手段的监测指标 （五）估计卵巢功能，指导内分泌治疗
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