单抗标记 - 360文档中心

percp-cy5.5标记抗体原理

percp-cy5.5标记抗体原理
Percp-cy5.5标记抗体是一种用于细胞免疫分析的标记物。

它是一种荧光染料，可以与抗体结合，并在激发后产生荧光信号，用于检测细胞表面或细胞内的特定抗原。

下面是Percp-cy5.5标记抗体的工作原理：
1. Percp-cy5.5标记抗体的制备
Percp-cy5.5标记抗体是一种荧光标记的二抗，通常是在单抗上进行标记，具有很强的荧光强度和稳定性。

制备时，先制备出特异性抗体，然后添加荧光染料Percp-cy5.5 进行共价结合，制成Percp-cy5.5标记抗体。

2. 细胞或细胞组分标记
将Percp-cy5.5标记抗体与细胞或细胞组分中的特定抗原结合。

在细胞免疫分析中，标记的细胞通常是通过特异性抗体与表面抗原结合，形成免疫复合物。

3. 荧光检测
在荧光显微镜或流式细胞术中，通过使用适当波长的激光激发荧光标
记的抗体，并通过光学系统收集荧光信号，在分析仪中进行信号检测并进行荧光强度计算和数据分析，以获取目标细胞或分子的相关信息。

总的来说，Percp-cy5.5标记抗体通过与特定抗原结合并在荧光检测中产生强的荧光信号，可以用于快速、准确地检测细胞表面或细胞内的特定抗原，为细胞免疫学、生物医学研究等提供了重要工具。

单抗作用机制

单抗作用机制引言：单抗（Monoclonal Antibodies）是一种由单一抗体群体制备而成的药物，具有高度特异性和亲和力。

单抗通过与特定的分子靶标结合，发挥其治疗作用。

本文将重点介绍单抗的作用机制。

I. 单抗的起源和结构：单抗是通过细胞工程技术制备的，起源于被称为淋巴细胞瘤的B细胞克隆。

单抗的基本结构由两个重链和两个轻链组成，重链和轻链通过二硫键连接。

重链和轻链的不同组合形成了不同种类的单抗。

II. 单抗的作用机制：单抗的作用机制主要包括以下几个方面：1. 特异性识别和结合靶标：单抗通过其可变区域与靶标特异性结合，靶标可以是细胞表面的蛋白质、抗原或药物。

单抗的特异性结合使其能够选择性地作用于目标细胞或分子，减少对正常细胞的影响。

2. 激活免疫系统：单抗可以激活免疫系统，促进机体产生免疫反应。

例如，某些单抗可以结合肿瘤细胞表面的抗原，激活免疫细胞（如T细胞和自然杀伤细胞），引发免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。

3. 抑制信号通路：单抗可以通过抑制信号通路来发挥治疗作用。

例如，某些单抗可以结合肿瘤细胞表面的受体，阻断受体与其配体之间的结合，从而阻止信号传导，抑制肿瘤细胞的生长和增殖。

4. 介导细胞毒作用：某些单抗被设计用于介导细胞毒作用。

这些单抗被结合到细胞表面的抗原上后，可以激活免疫细胞，释放细胞毒性物质，直接杀伤目标细胞。

5. 促进药物输送：单抗可以与药物结合，促进药物的输送到特定的组织或细胞。

这种方法可以提高药物的局部浓度，减少对正常组织的毒性。

III. 单抗的临床应用：单抗作为一种重要的生物制剂，已经在临床上取得了显著的成效。

目前，单抗被广泛应用于肿瘤治疗、免疫调节、自身免疫性疾病治疗等领域。

1. 肿瘤治疗：单抗在肿瘤治疗中的应用主要包括以下几个方面：a) 靶向治疗：某些单抗可以选择性地结合肿瘤细胞表面的抗原，抑制肿瘤生长和扩散。

b) 免疫检查点抑制剂：通过阻断肿瘤细胞与T细胞之间的相互作用，增强机体免疫应答，提高肿瘤治疗效果。

188-Re直接法标记CD45单抗及其体内生物分布研究

ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｎｎｏｒｍａｌｍｉｃｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｄｉｓｕｌｉｄｆｅｂｏｎｄｉｎｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌｅｏｆＣＤ４５ｍｏｎｏｃｌｎａｏｌａｎｔｉｂｄｙｏｗａｓ
，
ｄｉｒｅｃｔｌｙｌａｂｅｌｅｄＣＤ４５ｍＡｂａｌｏｎｅ；ｈｅＴｒｅａｃｔｉｏｎｍｉｘｔｕｒｅｗａｓｓｅｐｒａａｔｅｄｎｄａｐｕｒｉｉｆｅｄｔｈｒｏｕｈｔｔｈｅＰＤ－１０ｃｏｌｕｍｎ；Ｌａｂｅｌｉｎｇｅｉｃｆｉｅｎｃｙａｎｄｒａｄｉｏｃｈｅｉｃｍｌａｐｕｒｉｔｙｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｔｈｅｐａｐｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．ｈｅＴｎｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆＳＲｅ
±０．０７）ＴＢｑ／ｍｍｏｌ；室温下放置２４ｈ，０Ｒｅ．ＣＤ４５单抗放化纯为（６４．３３ ±１．５３）％；在鼠血清和生理盐水中３７℃下孵育２４ｈ后，其放化纯仍有（６４．２ ±３．７７）％和（５６．７ ±４．１６）％。小鼠体内生物分布显示，埽Ｒｅ．ＣＤ４５
单抗主要分布于肾脏和肝脏，其次是肺脏、骨骼和血液。结论在肝脏有较高的浓聚，符合标记抗体的体内分布规律。

单抗标记检测新城疫病毒免疫胶体金试纸条的研制

摘
Байду номын сангаас
要：利用柠檬酸钠还原氯金酸，形成胶体金颗粒，选择直径２ｍ的胶体金颗粒标记单克隆抗体４８，０ｎＥ用兔抗鼠二抗喷洒在硝
酸纤维素膜上作为对照线，另一株单抗５６作为检测线，用Ｅ制备成胶体金试纸条。用试纸条检测１０份泄殖腔样品，２结果与病毒
ｄａｔ０ｎ．ｈｔｏｙｏｂｉａａｓｍｕｅｗｘｄｏｉｏｅｌｌｅｍｅｂａｅ（Ｃｉｅｉ２ｌＴｅａｉｄｆａｂｔｇｉｔｏｓａｆｅｎｎｔｃｌｏｍｒｎＮＭ）ｔａｗｓｔｅｃｎｒｌｉｅｔｅｔｔｉｅｍｅｒｓｎｎｂｒｎｓｉｒｕｓｈｔａｏｔｎ；ｓｌｈｏｌｈｅｎＷｎｔｅｎｃｎｎｉｏｆＥ．２ａｐｅｅｅｄｔｔｒＮＶｂＩＡａｄＨＴｅｃｒｓｏｄｎｅｒｔｂｔｅｅｃｌｉｓａａｏｈｒｏｌａａｔｄ５６１０ｓｌｓｗｒｅｅｆＤｙＧＣＡ．ｏｒｐｎｅｃｅｅｎｔｏｌｄｍｏｏｌｂｍｃｅｄｏｎｈｅａｗｅｈｏａｌ
ＡｂｔａｔＴｅｅｏｐｓｌｎｉｐｃｃｇｌｍｕｏｈｏａｏｒｐｙａｓｙ（ＩＡ）ｆｅｄａｎｓｆＶＴｉｏｉｍｓｒｃ：ｏｄｖｌｐａｒｉｉｅａｄｈｇｓｅｉｏｄｉｎｅｒｍｔａｈｓａＧＣａｄ，ｍｐｈｉｆｍｇｏｔｉｏｉｏｒｈｇｓＮＤ．ｒ —ｓｄｕ
单抗标记检测新城疫病毒免疫胶体金试纸条的研制
李希友田夫林，，张秀娥李建亮，，崔言顺ｈ

单抗的临床应用

单抗的临床应用临床诊断自单抗问世以来，由于其特异性强、重复性好、操作简便易行，所以在大部分常规血清学检查中，取代了多克隆抗体而广泛应用于免疫学诊断。

体内微量成分和药物的测定放射免疫测定和酶标免疫测定法已被广泛应用，作为体内激素或药物等微量成分的测定。

用单抗取代传统的多抗，使感度、精度和重复性大为提高，例如转铁蛋白、肾素、甲状腺素(T 4)、三碘甲状腺素(T3)、干扰素、补体成分C3、cAMP、cGMP、生长素、绒毛膜促性腺激素(HCG)、促性腺激素(FSH)、胰岛素、IgG、IgE、地高辛、氨茶碱、苯巴比妥、氨基糖甙类抗生素、维生素B12等单抗。

癌症诊断甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CFA)在正常胎儿血清中大量存在，成人血中含量显著减少，而癌症患者则显著增加，被认为是癌症的标志。

甲胎蛋白(AFP)是用于肝癌和畸胎瘤诊断的癌标志抗原，分子中约含4%糖链，根据糖链的差别已能区别出来源于肝癌的AFP和来源于肝硬化的AFP，从而可以期待能细致区分不同AFP的糖链结构的单抗。

蛇毒鉴别毒蛇种类很多，其毒素的性质各不相同，应用相应的蛇毒单抗，便可迅速做出正确的诊断，从而采取相应的治疗。

传染病诊断流感、狂犬病、麻疹、疱疹、肝炎、流行性出血热等致病病毒，疟疾、血吸虫、锥虫等寄生虫和一些细菌等，用相应的单抗能正确地予以诊断，并能鉴别其抗原亚型。

如乙型肝炎病毒和流感病毒可以分成若干亚型，如果制成单抗就能鉴别出不同亚型，不仅对诊断有意义，而且在流行病学上也有重要意义。

体内定位诊断利用肿瘤单抗与其相应肿瘤抗原反应的特异性和放射性同位素可以进行体外探测等特点发展起来的放射免疫显像技术，是近年来开展对肿瘤及其转移灶或复发灶进行定位或定性诊断的无创伤性新技术。

其原理是从动物或组织培养中获得各种抗肿瘤抗体，采用合适的同位素标记后注入相应肿瘤患者体内，标记抗体可随血流到达肿瘤部位，与肿瘤抗原发生特异性结合。

放射性标记抗体随时间延长在相应肿瘤组织中的浓度越聚越高，以此了解肿瘤的大小、形状、位置、数量，还可帮助确定病变性质。

RP215单抗的131I标记及其对裸鼠肿瘤的作用

第４１卷第１０期
２０１３年５月
广
州
化
工
Ｖｏ１．４１Ｎｏ．１０Ｍａｖ．２０１３
ＧｕａｎｇｚｈｏｕＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙ
ＲＰ２１５单抗的Ｉ标记及其对裸鼠肿瘤的中表达，与癌症的各阶段相关，能作为肿瘤诊断和治疗的肿瘤标志物－２Ｊ。ＲＰ２１５单克隆抗体作用于一种卵巢癌细胞株ＯＣ一３一ＶＧＨ的表面抗原ＣＡ２１５［３Ｊ，由杂交瘤细胞分泌产生。这种杂交瘤细胞是荷卵巢癌细胞株ＯＣ一３一ＶＨＧ小鼠免疫后，从融合的３０００多个杂交克隆细胞中筛选出０ＭＴＩ是放射免疫显像和放射免疫治疗的常用放射性核素，其标记方法主要有Ｂｏｈｏｎ—Ｈｕｎｔｅｒｌ４Ｊ、超氧物歧化酶Ｊ、氯胺Ｔｌ６和Ｉｏｄｏｇｅｎ＂等法。其中Ｉｏｄｏｇｅｎ法由于对蛋白损伤较小，方法简便，易于控制，已经广泛用于蛋白、多肽、单抗等标记技术。本工作采用ｌｏｄｏｇｅｎ法进行ＲＰ２１５的” Ｉ标记，并观察” Ｉ —ＲＰ２１５对荷瘤ＯＣ一３一ＶＧＨ裸鼠抑瘤效果。结果表明， ” Ｉ — ＲＰ２１５可望开发成为实体肿瘤如卵巢癌的治疗药物。
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙＲＰ２１５ｗａｓｌａｂｅｌｅｄｗｉｔｈ ” ＩｂｙＩｏｄｏｇｅｎｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｌａｂｅｌｉｎｇｅｉｃｆｉｅｎｃｙｗａｓ６８．３％，ｔｈｅｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｕｒｉｔｙｗａｓ９８．５％，ｗｈｉｌｅｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓ３０．３ＧＢｑ／ｇ．Ｔｈｅｒａｄｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｕｒｉｔｙｏｆ

单克隆抗体的标记

（1）在进行记之前，先选用截流分子量为20000-50000的凝胶，备1ml凝胶柱，然后分别用10倍积的1%BSA/PBS/0.02%叠氮钠和PBS洗涤柱，封住柱下口，备用。
（2）加入10ug纯化单抗至含有25ul 2.5mol/L磷酸钠（PH7.5）的1.5ml指形管内。随后，加入500uCi Na125I混匀。
（2）用含2% PBS不含甲硫氨酸的培养基悬浮杂交瘤细胞至106个/ml，加入35S甲硫氨酸（每次加入100uCi可产生105-106cpm的抗）。
（3）经C02培养箱中培养过夜，离心后，吸出培养上清，分别加入1/20积的1mol/L Tris（PH8.0）及叠氮钠至浓度0.02%。该记抗可按纯化单抗方法进行。
（5）将记单抗保存4℃可使用6周时间。
2、生物合法记
将杂交瘤细胞培养在含有放射性前的培养基中，随着抗分子的合、组装，同位素会记在抗分子的初级氨基酸链上，本方法不会导致抗活性的丧失。其步骤是：
（1）离心收集处对数生长期的杂交瘤细胞，约需2×106个细胞。以预热37℃不含甲硫氨酸的培养基洗涤上述细胞。
碱性磷酸酶（AP）用记抗，常用戊二醛一步法，将酶和单抗混合，再加入适量戊二醛，使酶和抗蛋白的NH2分别与两个醛基结合，备结合物。该法简便，但所得产物不均一，抗活性损失大，酶记率低。其序如下：
（1）将5mg AP加入1ml抗溶液（2mg/ml）中溶解，装入透析袋，4℃对0.01mol/L PH7.2 PBS透析18小时，换液三次。
序一：
（1）将5mg HRP溶0.5ml 0.1mol/L NaHCO3溶液中；加0.5ml 10mmol/L NaIO4溶液，混匀，盖紧瓶塞，室温避光作用2小时。
（2）加0.75ml 0.1mol/L Na2CO3混匀。

乳胶法和胶体金法区别

乳胶法和胶体金法区别
首先应该了解乳胶法和胶体金法的基本概念：一、所谓胶体金法，就是用胶体金这种物质，标记血清或者血浆中相应抗体的含量。

二、胶体金是指胶体金标记的抗体，它主要包括两个方面的内容，即抗原和抗体。

三、使用胶体金法标记的抗体称为胶体金单抗，简称胶体金；
四、而使用乳胶法标记的抗体称为乳胶抗体，简称乳胶，在标记时必须将抗原（抗体）吸附到胶体金上。

从实际情况来看，采用乳胶法标记的抗体占绝大多数。

但由于胶体金技术具有操作步骤繁琐、对人员素质要求高等缺点，因此在检测时通常需要配合其他标记方法同时进行，才能保证检测结果准确可靠。

总之，不管使用何种方法来标记抗体，目的都只有一个——尽可能提供更加精确的检测报告。

五、相比而言，采用胶体金法更加灵敏、特异性好，且不受血型限制，还避免了交叉反应及血清稀释现象发生。

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酶免疫技术名词解释

酶免疫技术名词解释酶免疫技术是一种广泛应用于生命科学、生物技术和医学领域的技术。

它是利用酶作为探针，实现分子分析和检测的一种方法。

酶免疫技术拥有许多独特的优点，如高度灵敏、特异性强、操作简便等，因此被广泛应用于临床诊断、生物医学研究、环境监测和食品安全等领域。

下面是一些关于酶免疫技术相关的名词解释。

1. 酶标记：酶标记是指在酶免疫技术实验中，通过对探针分子进行修饰，使其与酶结合并形成稳定的复合物。

这种复合物可以作为信号源，在检测过程中被检测出来。

2. 性能参数：在酶免疫技术实验中，用来评估探针的性能的参数。

包括特异性，敏感性，可重复性等。

这些参数决定了实验的可靠性和准确性。

3. 单抗：单克隆抗体（Monoclonal Antibody，mAb）是一种特殊的抗体，可与目标分子的特定区域（表位）结合。

在酶免疫技术实验中，单抗被广泛应用于酶标记和检测分析。

4. 酶免疫法（ELISA）：酶免疫法是一种利用酶做为标记物，通过对抗体与抗原之间的特异性结合来检测抗原或抗体的方法。

这种方法广泛应用于多种疾病的诊断和治疗。

5. 酶反应体积：在酶免疫技术实验中，所需的反应体积越小，检测灵敏度越高。

然而，不同反应最优的体积需要通过实验来确定。

6. 活化酶底物：活化酶底物是一种反应物，被酶催化后可以产生可检测的信号，如荧光、发光、吸收光谱等。

在酶免疫技术实验中，活化酶底物被广泛应用于酶标记和检测分析。

7. 酶聚合素链反应（EPCR）：酶聚合素链反应是一种利用DNA聚合酶复制DNA分子的技术。

在酶免疫技术中，EPCR被广泛应用于检测遗传学分析。

8. 分子探针：分子探针是一种有机分子，在酶免疫技术中用于特定分子的检测。

它们可以与互补的DNA或RNA 配对，并用作免疫试剂或标记物。

分子探针在分子诊断学中起着至关重要的作用。

9. 酶抑制剂：酶抑制剂是一种分子化合物，可以抑制酶的活性。

在酶免疫技术中，酶抑制剂被广泛应用于检测分析中，以增加检测灵敏度和准确性。

免疫学练习题

免疫学练习题一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、免疫浊度测定的基本原则是A、抗原抗体达最比例B、抗原过剩C、抗体过剩D、反应溶液PH为6.5～8.5E、抗体特异性强正确答案：A2、沉淀反应中抗体过量的现象称为A、后带B、等价带C、带现象D、前带E、拖尾现象正确答案：D3、下列属于慢性移植反应病理特征的是A、间质纤维化和血管破坏B、间质水肿C、大动脉壁上出现急性纤维素样炎症D、单个核细胞为主的细胞浸润E、坏死性血管炎正确答案：A4、补体活化过程中不能被裂解为a和b两个片段的补体成分是A、C1B、C2C、C3D、C4E、C5正确答案：A5、流式细胞仪中最常用于单抗标记的荧光染料是A、FITC、RB200、TRITCB、FITC、PE、Pre-CP、APCC、FITC、RB200、PED、FITC、TRITC、PEE、FTTC、PE、ECD或PECY5正确答案：B6、抗原过剩时称为A、前带或后带B、后带C、前带D、前带或后带E、等价带正确答案：B7、在CP-CH50试验中，溶血程度与补体含量的关系为A、直线B、抛物线C、双曲线D、S形曲线E、正态分布曲线正确答案：D8、下列选项中，不属于黏附分子的是A、整合素家族B、选择素家族C、钙黏蛋白D、ILE、ICAM-1正确答案：D9、免疫胶乳比浊法的最大优点是A、减少抗体的用量B、提高免疫浊度测定的特异性C、减少抗原的用量D、减少伪浊度的形成E、提高免疫浊度测定的灵敏性正确答案：E10、补体经典激活途径的C5转化酶是A、C4b2aB、C4b2a3bC、C3bBbpD、C3bBb3bE、C5b67正确答案：B11、受体免疫细胞间接识别移植物后的作用是A、诱发亚急性排斥反应B、诱发超急性排斥反应C、以活化CD8 T细胞为主D、主要活化B细胞E、以活化CD4 T细胞为主正确答案：E12、下列物质中属于直接化学发光剂的是A、三丙胺B、吖啶酯C、异硫氰酸荧光素D、AMPPDE、4-MUP正确答案：B13、下述关于间接荧光免疫试验的描述中，不准确的是A、操作简便，特异性高B、第二抗体为荧光标记抗体，是针对一抗的抗抗体C、可用于检测抗原，也可用于检测抗体D、是检测一抗是否结合于组织抗原上的标记探针E、第一抗体为针对抗原的特异性抗体正确答案：A14、病理改变表现为血管平滑肌增生和纤维化改变的排斥反应是A、超急排斥反应B、急性排斥反应C、慢性排斥反应D、CVHRE、HVGR正确答案：C15、用于检测经典激活途径总补体活性的试验是A、CP-CH50试验B、AP-CH50试验C、补体结合试验D、免疫溶血法E、免疫化学法正确答案：A16、血清区带电泳γ区出现窄而尖的峰可见于A、恶性肿瘤B、细菌性感染C、多发性骨髓瘤D、肝硬化E、肾病综合征正确答案：C17、关于ABC法，不正确的叙述是A、游离亲合素桥联生物素化酶蛋白分子和抗体分子B、与BAB法相比，操作简便C、将生物素标记酶蛋白分子和抗体分子D、ABC试剂具有通用性E、不适合在放射免疫技术中使用正确答案：E18、在检测可溶性黏附分子中，ELISA常用A、直接法B、间接法C、夹心法D、竞争法正确答案：C19、不属于颗粒性抗原的是A、葡萄球菌B、抗体C、链球菌D、疟原虫E、绵羊红细胞正确答案：B20、在小鼠骨髓移植模型中，输人下列哪种丁细胞会明显推迟GVHR的发生A、CD4 CD25 Foxp3B、CD4 CD25 Foxp3C、CD4 CD25 Foxp3D、CD4 CD25 Foxp3 E CD8 CD25 Foxp3正确答案：A21、经典免疫学技术是A、酶免疫试验B、免疫凝集试验C、流式细胞术D、化学发光免疫试验E、荧光免疫试验正确答案：B22、在速率散射比浊法中抗原过量的检测方法是A、在抗原抗体预反应阶段进行B、在抗原-抗体反应完成后再加入相同抗原C、在抗原-抗体反应的第二阶段进行D、在抗原-抗体反应完成后再加入相同抗体E、在抗原-抗体反应的第一阶段进行正确答案：C23、在电极表面释放电子的是A、[Ru(bpy)₃]²B、TPAC、TPA·D、[Ru(bpy)₃]³E、A+B正确答案：E24、作为荧光抗体标记的荧光素必须具备的条件中，与提高观察效果有关的选项是A、与蛋白质的结合物稳定B、与蛋白质结合的方法简便快速C、荧光效率高，荧光与背景组织色泽对比鲜明D、性质稳定不会影响抗体的活性E、必须具有化学上的活性基团能与蛋白稳定结合正确答案：C25、HRP的酶活性基团是A、白蛋白B、色氨酸C、球蛋白D、亚铁血红素E、糖蛋白正确答案：D26、反复自然流产的患者体内免疫细胞异常的表现不包括A、Th1细胞介导的免疫伤作用B、CTL、NK细胞活性增强C、Th2细胞及其分泌的细胞因子减少D、滋养层细胞表达的HLA-G分子下降E、浆细胞分泌抗体减少正确答案：E27、NK细胞的典型标志是A、CD3B、CD4C、CD8D、CD14E、CD56正确答案：E28、最早出现的免疫标记试验是A、胶体金免疫试验B、酶免疫试验C、荧光免疫试验D、化学发光免疫试验E、放射免疫试验正确答案：C29、补体凝集素激活途径的C5转化酶是A、C4b2aB、C4b2a3bC、C3bBbpD、C3bBb3bE、C5b6730、抗CCP抗体最主要的类型是A、IgGB、IgMC、IgAD、IgDE、IgE正确答案：A31、下面选项中，不属于B细胞主要功能的是A、产生IgMB、抗原提呈C、产生IgGD、分泌细胞因子E、合成补体正确答案：E32、双向扩散试验中估计抗原或抗体的相对含量是根据下列选项中的A、沉淀线的数量B、沉淀线弯曲的方向C、沉淀线的位置D、沉淀线的粗细E、沉淀线的形态正确答案：C33、细胞因子生物学检测法最重要的优点是A、高特异性B、试验成本低C、操作简单D、活性测定正确答案：D34、下列选项中，属于非均一的双功能交联试剂法的是A、碳二亚胺缩合法B、N-羟基琥亚酰胺活化法C、N-琥酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫)-丙酸醋法D、过碘酸盐氧化法E、戊二醛法35、外周成熟的休止B细胞分为如下亚群A、CD4阳性细胞B、CD4阴性细胞C、B1细胞和B2细胞D、CD8阳性细胞E、CD8阴性细胞正确答案：C36、以下选项中，不属于分析前质量控制的内容的是A、检验项目的申请B、标本检测前的保存C、患者的准备D、标本的前处理E、标本的采集、运送和接收正确答案：D37、可鉴别腹腔盆腔包块的肿瘤标志物是A、CYFRA21-1B、HE4C、CA125D、CA19-9E、CA72-4正确答案：B38、质谱流式细胞仪主要优缺点是A、检测通道多、金属代替荧光素标记、有串色问题和金属标记物多B、检测通道多、荧光素代替金属标记、无串色问题和金属标记物多C、检测通道多、荧光素代替金属标记、无串色问题，但金属标记物少D、检测通道多、金属代替荧光素标记、无串色问题和金属标记物多E、检测通道多、金属代替荧光素标记、无串色问题，但金属标记物少正确答案：D39、用于包被金免疫层析试验载体膜质控线的物质是A、抗免疫金抗体B、人白蛋白C、胶体金标记抗体D、胶体金颗粒E、待测抗原标准品正确答案：A40、慢性肉芽肿属于A、T细胞缺陷病B、B细胞缺陷病C、联合免疫缺陷病D、吞噬细胞缺陷病E、补体系统缺陷病正确答案：D41、常用于纯化特异性抗体的方法是A、超速离心法B、亲和层析法C、盐析法D、离子交换层析法E、凝胶层析法正确答案：B42、IgG的亚类有A、6类B、3类C、2类D、4类E、5类正确答案：D43、关于“RIA”，描述错误的是A、一种竟争性免疫分析模式B、体系中抗体限量C、适合小分子抗原测定D、分离技术采用双抗体-PEG沉淀法E、游离标记物放射活性与待检抗原呈反比例函数关系正确答案：E44、下面不是剿系元素标记抗原或抗体作为示踪物优点的是A、荧光寿命长B、发射光光谱带较宽C、激发光谱带较宽D、stokes位移大E、镧系元素发光稳定正确答案：B45、下列说法不正确的是A、标记反应时，活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当的比例B、一个生物大分子可标记多个生物素分子C、生物素与抗原或抗体结合不影响其生物活性D、所有用于标记的示踪物均可与亲合素结合E、生物素与酶结合后，酶活性不受影响正确答案：E46、经典激活途径首先被活化的补体成分是A、C1B、C2C、C3D、C4E、C5正确答案：A47、可阻断红外线的透过，安装在荧光显微镜灯室聚光镜前面的是A、衍射滤光片B、折射滤光片C、激发滤光片D、吸收滤光片E、隔热滤光片正确答案：B48、CP-CH50试验时常用的SRBC悬液的浓度为A、1%B、2%C、5%D、10%E、20%正确答案：B49、关于链霉亲合素的特性，叙述不正确的是A、结构中不含糖基B、具有较高生物活性C、由四条相同肽链组成D、由链球菌属细菌分泌的一种蛋白质E、不能直接与固相载体连接正确答案：E50、分子量最小的小分子抗体是A、FabB、FvC、ScFvD、HcAbE、SdHcAb正确答案：E51、下列关于免疫电泳技术的描述中，正确的是A、抗原-抗体反应的高特异性与电泳技术的高分辨率结合的技术B、扩散方向不固定C、不加快沉淀反应D、交流电场作用下加快沉淀反应E、交流电场作用下的凝胶扩散试验正确答案：A52、胶乳凝集实验属于A、沉淀反应B、间接凝集血凝实验C、间接凝集反应D、直接凝集反应正确答案：C53、对非小细胞肺癌具有较高诊断价值的肿瘤标志物是A、CYFRA21-1B、HE4C、CA125D、CA19-9E、CA72-4正确答案：A54、输血前感染筛查不检测下列病原体中的A、TPB、HIVC、HPVD、HCVE、HBV正确答案：C55、下列方法中，在检测抗核抗体时无法准确鉴定靶抗原的是A、ELISAB、免疫印迹C、间接免疫荧光法D、对流免疫电泳E、放免法正确答案：C56、以下关于筛查试验和诊断试验的描述中，不正确的是A、筛查试验结果阳性仅提示阳性结果的可能，需要进一步的确认B、诊断试验用于检测临床上已怀疑某种疾病的患者中抗原或抗体的存在情况，阳性预测值高于筛查试验C、酶联免疫吸附试验只能用作筛查试验D、筛查试验结果阴性提示被检测人待测物阴性的可能性很高E、筛查试验应当具有较高的敏感性正确答案：C57、电化学发光反应的发光剂是A、鲁米诺B、AMPPDC、吖啶酯D、三丙胺E、三联吡啶钌正确答案：E58、荧光免疫组化技术中标本的类型不包括A、血清或血浆B、涂片和印片C、细胞培养标本D、活细胞染色E、组织切片正确答案：A59、垂直散射光(SSC)信号的强弱与下述选项相关的是A、体积大小B、细胞形状C、细胞内颗粒的复杂度D、位移速度E、细胞膜分子表达水平正确答案：C60、关于室内质量控制(IQC)和室间质量评价(EQA)的关系，下列说法正确的是A、EQA仅反映系统误差B、IQC仅反映测定分析步骤中间的误差C、IQC在控可保证该批次的标本检测结果均正确D、EQA与测定结果报告及解释无关E、IQC的靶值只能用厂家提供的浓度值正确答案：B61、髓样树突状细胞的主要标志为A、CD11c﹢HLA-B﹢LineagaB、CD11c﹢HLA-DR﹢LineagaC、CD11c﹣CD33 HLA-DR﹢Lineaga﹣cd123﹢D、CD11c﹣CD33 HLA-A﹢Lineaga﹣cd123﹢E、CD11c﹢CD33 HLA-A﹢Lineaga﹣cd123﹣正确答案：B62、在电极表面释放电子的是A、[Ru(bpy)₃]²B、TPAC、TPAD、[Ru(bpy)₃]³E、A+B正确答案：E63、下列是理想免疫检验室内质量控制品的条件，除了A、所含待测物的浓度接近试验或临床决定性水平B、对靶值确定的准确性有严格的要求C、基质对测定结果无影响D、试剂方法的性能验证E、稳定正确答案：B64、血清IgG、lgA、IgM最常用的检测方法是A、免疫散射比浊法B、免疫固定电泳C、乳胶凝聚试验D、荧光酶联免疫法E、单向免疫扩散试验正确答案：A65、在下列ELISA方法中，检测孔最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈负相关的是A、双抗原夹心法B、双抗体夹心法C、竟争法D、间接法E、捕获法正确答案：C66、HRP催化DAB的反应产物呈A、棕色B、橘红色C、深蓝色D、红色E、绿色正确答案：A67、下面描述错误的是A、金溶胶颗粒直径和加人的氯金酸量密切相关B、多种蛋白质、葡聚糖、PEG2000、明胶等均为胶体金良好的高分子稳定剂C、常用0.1mol/L K₂CO₃和0.1mol/L盐酸溶液调定胶体金溶液的PH值D、胶体金标记就是蛋白质等大分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程E、胶体金的PH值低于蛋白质的等电点时，则会聚集而失去结合能力正确答案：A68、细胞内细胞因子测定的方法为A、ELISAB、化学发光酶免疫试验C、流式细胞术D、酶联免疫斑点试验E、生物学检测法正确答案：C69、与克隆酶供体免疫试验(CEDIA)技术不符合的特点是A、是一种均相酶免疫技术B、单独的EA或ED片段不具有酶活性C、EA和ED片段结合后形成具有生物活性的碱性磷酸酶D、通常标记抗原的是ED片段E、酶活性大小与待检抗原含量呈正相关正确答案：C70、治疗抗体的最理想形式为A、人鼠嵌合抗体B、人源化抗体C、人源抗体D、鼠源性抗体E、免源性抗体正确答案：C71、检测抗精子抗体作用于精子部位的实验方法是A、免疫珠结合法B、ELISAC、免疫印迹试验D、补体依赖性细胞毒试验E、流式细胞测定法正确答案：A72、Bruton综合征患者骨髓中缺乏A、造血干细胞B、T细胞C、B细胞D、浆细胞E、中性粒细胞正确答案：D73、外斐试验是利用了A、可逆反应B、亲和性C、过量抗原D、共同抗原E、过量抗体正确答案：D74、肥达试验属于A、协同免疫凝集试验B、间接免疫凝集抑制试验C、间接免疫凝集试验D、直接免疫凝集试验E、反向间接凝集抑制试验正确答案：D75、在ABC-ELISA(双抗体夹心)体系中，需将HRP标记在A、抗体分子B、抗原分子C、生物素D、亲合素原E、第二抗体正确答案：C76、释放能量的是激发态的A、[Ru(bpy)₃]²B、TPAC、TPA·D、[Ru(bpy)₃]³E、A+B正确答案：A77、关于溶血素，错误的描述是A、为抗SRBC的抗体B、用SRBC免疫家兔获得C、可与SRBC特异性结合D、为羊抗兔红细胞的抗体E、使用自制的溶血素需先加热56℃30分钟以灭活补体后经效价滴定，确定使用浓度正确答案：D78、在速率散射比浊法中，测定下列哪个单位时间段内抗原-抗体复合物形成速率作为定量依据A、抗原-抗体复合物形成的最快时间段B、抗原-抗体复合物形成结束的时间段C、抗原-抗体复合物形成的最稳定时间段D、抗原-抗体复合物形成的最长时间段E、抗原-抗体复合物形成最大的时间段正确答案：A79、绒毛膜促性腺激素的分泌量达高峰的时间是A、妊娠16周B、临产时C、停经11～15天D、妊娠33～34周E、妊娠8～10周正确答案：E80、在呼吸道局部黏膜发挥抗病毒作用的是A、抗PIV SlgAB、抗-HBs IgGC、抗-RV IgGD、抗-HAV IgGE、抗-HBs IgG正确答案：A81、检测slgE时，灵敏度最好的是A、RASTB、western blotC、FEIAD、RASTF EIAE、RASTEIA正确答案：D82、时间分辨荧光免疫测定过程中，使Eu³﹢解离的方法是A、加入碱性磷酸酶B、加入辣根过氧化物酶C、加入酸性增强液D、加入氧化剂(H₂O₂)和PH纠正液E、加入增强剂3-氯4-羟基乙酰苯胺正确答案：C83、检测slgE时，可能出现交叉反应的检测方法是A、WESTERN BIOTB、RASTC、RAST EIAD、FEIAE、RAST FEIA正确答案：A84、HBsAg检测最常用的方法是A、间接法B、捕获法C、竟争抑制法D、双抗体夹心法E、双抗原夹心法正确答案：D85、淋巴细胞交叉配型的主要目的是A、检测供者血清中有无抗受者淋巴细胞抗体B、检测受者血清中有无抗供者淋巴细胞抗体C、检测供者HLA抗原D、检测受者HLA抗原正确答案：B86、ELISA检测方法中，关于竞争法下列说法正确的是A、只用于检测抗原B、只用于检测抗体C、待测管的颜色比参照管的淡表示被检测量物少D、被检测物含量高，则酶标记物被结合的机会少E、被检测物与酶标记物的免疫活性各不相同正确答案：D87、FITC呈现的荧光颜色为A、黄绿色B、橘红色C、橘黄色D、红色正确答案：A88、艾滋病的病原体是A、HSVB、HIVC、HCVD、HPVE、HAV正确答案：B89、目前国内HIV确认实验采用的方法是A、免疫层析试验B、斑点酶免疫吸附试验C、酶联免疫吸附试验D、免疫印迹试验E、免疫渗滤试验正确答案：D90、与肝癌细胞的门静脉侵犯相关的标志物是A、AFPB、AFP-13C、DCPD、GP-73E、GCP-3正确答案：B91、ELISA板包被后，最常用的封闭剂是A、人血清球蛋白B、牛血清球蛋白C、人血清白蛋白D、牛血清白蛋白E、2％脱脂牛奶正确答案：D92、五聚体IgM与抗原的实际结合价是A、5价B、1价C、4价E、3价正确答案：A93、均相酶免疫试验主要用于测定下列物质中的A、细菌抗原B、药物和小分子物质C、病毒D、补体E、Ig正确答案：B94、对室间质量评价的描述，正确的是A、室间质量评价为室内质量控制的补充，属于实验室的内部质量控制措施B、是对实验室操作和实验方法的即时性评价C、室内质量控制是室间质评的有益补充，做好室间质评就完全说明一个实验室质量控制得很好D、通过参加室间质量评价，实验室可对自身的实验操作进行纠正，从而起到自我教育的作用E、可以提高实验室常规工作中批内、批间样本检验的一致性正确答案：D95、只能说明供、受体抗原配合程度，不能判断HLA型别的实验方法是A、血清学分型法B、单向混合淋巴细胞培养C、双向混合淋巴细胞培养D、基因分型法E、基于基因测序的HLA分型法正确答案：C96、在免疫散射比浊中，当颗粒直径小于入射光波长的1/10时，颗粒对入射光所产生的散射称之为A、Rayleigh散射B、Mile散射C、Debye散射D、定时散射E、速率散射正确答案：A97、纯化特异性抗体时，去除杂抗体的方法是A、凝胶层析法B、离子交换层析法C、亲和层析法D、盐析法E、有机溶剂沉淀法正确答案：C98、较为受青睐的量子点的制备方法是A、低温等离子法B、蒸汽冷凝法C、水相合成法D、气相沉积E、有机相合成法正确答案：C99、关于反复性自然流产的免疫学检测，以下描述不正确的是A、测定夫妇的HLA抗原，检测双方HLA抗原的相容性B、检测母体抗父系淋巴毒抗体C、抗精子抗体检测D、NK细胞活性及亚类测定E、雌激素定量检测正确答案：E100、不能通过飞沫传播的病毒是A、乙型肝炎病毒B、SARS冠状病毒C、甲型流感病毒D、高致病性禽流感病毒E、埃博拉病毒正确答案：A。

一抗的选择

随着生命科学的发展，围绕蛋白进行的研究越来越多，抗体试剂在实验中的重要性越来越举足轻重。

面临着纷呈复杂的抗体试剂市场，如何选择到适合自己实验的抗体就变得尤为重要。

当我们要检测目的蛋白在组织中表达情况的时候，如何选择适合我们实验需要的抗体，并恰当保存使用，是每个科研人员需要细心考虑的。

抗体种类繁多，品牌众多，技术参数不一，价格和质量更是相差甚大，如何购买到高质量价格合适的抗体，并准确地做出我们想要的结果，其中有很多细节需要注意。

一、抗体选择总体原则1. 关于特异性的选择特异性的选择主要需要考虑四个方面：蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。

（1）蛋白特异性针对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分，重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测，对抗体的要求是不一样的，注意查看抗体说明书的检测说明。

如果重组蛋白不是全长表达，则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。

内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式，特殊表型的蛋白需要进行序列比对，并结合抗体免疫原序列，查看交叉反应的情况。

磷酸化蛋白检测需要确定具体位点，不同位点的磷酸化意味着可能有不同的机制存在，不宜一概而论。

（2）种属特异性同种蛋白不同物种，有着或大或小的差异。

目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或设计多肽抗原的，根据蛋白的同源性情况与其他种属发生交叉反应。

需要参照说明书注明的可反应种属信息。

一些稀有种属很难找到抗体，可以通过蛋白的序列比对，选择同源序列免疫的抗体，不过一般这种情况生产商不会受理其关于质量的申诉，如果可以申请到免费的抗体样品，则利于抗体选择。

（3）实验方法特异性目前使用抗体的实验方法有很多，不同的使用方法过程中，因为对蛋白样品的处理方式不一样，蛋白的含量有差异，对抗体的识别表位和效价要求都是不一样的。

具体的根据说明书注明的产品应用方法进行选择。

但是生产商一般不会将每个抗体都进行各种实验的检测，目前检测比较多的只是WB、IHC、IF等，如果针对具体的实验方法没有找到合适的抗体的，可以结合蛋白序列分析和抗体的抗原信息，选择尽可能有效果的抗体。

单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和生物素标记)

单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和生物素标记)目前动物用单抗，在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用，大多以诊断试剂（盒）的形式提供，其中核心试剂为标记的单抗。

下面将介绍最常用的几种标记技术。

一、酶标记1、辣根过氧化物酶（HRP）标记辣根过氧化物酶（HRP）标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。

其原理是HRP的糖基用过碘酸钠氧化成醛基，加入抗体IgG后该醛基与 IgG氨基结合，形成Schiff氏碱。

为了防止HRP中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合，在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。

氧化反应末了，用硼氢化钠稳定Schiff氏碱。

这里介绍两种程序。

程序一：（1）将5mg HRP溶于0.5ml 0.1mol/L NaHCO3溶液中；加0.5ml 10mmol/L NaIO4溶液，混匀，盖紧瓶塞，室温避光作用2小时。

（2）加0.75ml 0.1mol/L Na2CO3混匀。

（3）加入0.75ml小鼠已处理的腹水，或纯化单抗等（15mg/ml），混匀。

（4）称取Sephadex G25干粉0.3g，加入一支下口垫玻璃棉的5ml注射器外筒内；随后将上述交联物移入注射器外套；盖紧，室温作用（避光）3小时或4℃过夜。

（5）用少许PBS将交联物全部洗出，收集洗出液，加1/20V体积新鲜配制的5mg/ml NaBH4溶液，混匀，室温作用30分钟；再加入3/20V NaBH4溶液，混匀，室温作用1小时（或4℃过夜）。

（6）将交联物过Sephadex G200或Sepharose 6B（2.6×50cm）层析纯化，分管收集第一峰。

（7）酶结合物质量鉴定：克分子比值测定酶量（mg/ml）=OD403×0.4IgG量（mg/ml）=（OD280-OD403×0.3）×0.62克分子比值（E/P）=酶量×4/IgG量，一般在1-2之间。

D-二聚体

血浆D-二聚体检测
目的：掌握胶乳凝集法测定血浆D-二聚体的原理、方法、注意事项和临床意义。原理：抗D-二聚体单抗标记胶乳颗粒悬液，当血浆中的D-二聚体含量大于0.5mg/L时，与胶乳颗粒上的抗体结合，发生凝集反应。根据被检血浆的稀释度可计算出血浆D-二聚体的含量。
器材：试管、微量加样器、离心机、计时器试剂：D-二聚体检测胶乳凝集试剂盒，包括：胶乳试剂一瓶，缓冲液一瓶，阳性对照一瓶，阴性对照一瓶，胶乳反应板一块。
方法步骤
1.制备血浆 2.取胶乳试剂20ul，置于胶乳反应板的圆圈内，加入血浆20ul ，用玻璃棒迅速搅匀，轻轻摇动3~5min。 3.在较强的光线下观察，出现明显均匀的凝集颗粒者为阳性，无凝集颗粒者为阴性。 4.若为阳性进一步将被检血浆用缓冲液做1： 2、1:4、1:8、1:16等倍比稀释，，分别按上法进行测定，以发生凝集反应的最高稀释度作为半定量：<0.4mg/L

131 Ⅰ标记抗肺癌单克隆抗体1E2在荷瘤小鼠体内分布及对小鼠移植瘤作用

一
is
肺癌小鼠体内分布评估瘤内注射碘
，。
一
13 1
标记抗肺癌单克隆抗体 1E 2 (
Le
w
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I
一
1E 2
)对小
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鼠Le
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肺癌的生长抑制作用
，
方法
w
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鼠右后腿皮下接种
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。
一
is
。只肺癌细胞 (L L C ) 1 × 10 ／建立荷 L e w
．
1E 2 标记
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率为 6 7
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一
1 E 2 主要分布在肿瘤组
织
，
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，
重量为 ( 1 6 0 ± O 19 ) g 抑瘤率 7 8 3 0 ％与对照组间比较差异有统
13 6 4
中国肿瘤临床
2008
年第 3 5 卷第 2 3 期
伯 ’
I
标记抗肺癌单克隆抗体 1 E 2 在荷瘤小鼠体内分布及对小鼠移植瘤作用冰
摘要
”。目的：分析碘 1 3 1 ( I ) 标记抗肺癌单克隆抗体 1 E 2 在荷 L e w
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免疫标记：四大免疫标记原理介绍

免疫标记：四大免疫标记原理介绍！为提高抗原和抗体检测的敏感性，将已知抗体或抗原标记上易显示的物质，通过检测标记物，反映有无抗原抗体反应，从而间接测出微量的抗原或抗体。

常用的标记物有酶、荧光素、放射性同位素、胶体金及电子致密物质等。

这种抗原或抗体标记上显示物所进行的特异性反应称为免疫标记技术(immunolabelling technique)。

免疫标记不仅大大提高了试验敏感性，若与光镜或电镜技术相结合，能对组织或细胞内的待测物质作精确定位，从而为基础与临床医学研究及诊断提供方便。

免疫标记技术大致分为两大类：一类属于免疫组织化学技术(immunohistochemical technique)，用于组织切片或其他标本中抗原的定位。

另一类称为免疫测定(immunoassay)，用于液体标本中抗原或抗体的测定。

一，免疫酶技术(immunoenzymatic technique)最早应用的免疫酶技术是免疫酶组织化学染色，即用标记的抗体与标本中的抗原发生特异性结合，当加入酶的底物时，在酶的作用下经一系列生化反应产生有色物质，借助光镜作出定位判断。

目前，应用最广泛的是酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)。

该法特异性强，敏感性高，既可检测抗体，又能测定可溶性抗原。

主要方法及操作要领见图18.5，除了图示的两种方法外，还有抗原竞争法，现较少应用。

ELISA常采用的酶为辣根过氧化物酶(hosradish peroxidase，HRP)，其底物是二氨基苯胺(DAB)，底物被分解则呈棕褐色，可目测或借助酶标仪比色。

ELISA为非均相免疫测定，另外还有均相法，在此不作介绍。

由于酶免疫测定无需特殊仪器和试剂，且操作简便，利于普及。

因此，在免疫标记技术中，该法应用最为广泛，并在原有方法基础上加以改良，使得众多新的，更敏感的方法应运而生。

①生物素-亲和素放大系统(biotin-avidin system，BAS)，建立于70年代后期，通过将酶标记在生物素或亲和素上，借助生物素与亲和素的高度亲力和生物素能与抗体结合的特点应用于ELISA，显著提高了检测的敏感性。

Iodogen法125I标记CD28单克隆抗体2F5的方法

００）与国内文献报告一致。．５，
ＣＳＡ０被认为是一种广谱的肿瘤标志物，主要分布于糖脂及高分子蛋白中，同肿瘤患者血清的阳性率不同。本不文结果表明，乳腺癌患者在术前血清Ｃ５Ａ０水平非常显著地高于正常人组（００）术后６个月与正常人组比较无显Ｐ＜．１，
后经手术后病理切片证实）。其中浸润性导管癌２８例、单纯癌２例、原位癌２例，术后根据病情分别采用化疗、放疗或内分泌治疗或综合治疗。１１２正常人组：５人，．．３均为我院体检中心经健康体检合格
的正常人，无心、、、肝肺肾等重要脏器疾患，肾功能试验正肝常，且无乳腺疾患。
射免疫杂志２）２牛２（１５器第ｌ期ＪｏＲｄｏｍｎｌ￣２１２（ｔａｉｉｍｕｏ：０２，５１ｏ
一
１ — ５
０Ｏ）术后６个月则与正常人组比较无显著性差异（．１，Ｐ＞
１资料和方法
１１临床一般资料．
所测数据以 ±ｓ示，表组间比较采用ｔ验，检相关分析采用
：回归。直线
ＣＦ水平的变化，Ｓ可作为肿瘤的诊断和疗效的观察。
２结果
２１正常人组和乳腺癌患者手术治疗前后血清Ｃ５３．Ａ１－、Ｃ５Ａ０和Ｍ．ＳＣＦ含量，见表１。
烷将其溶解（ｇＬ，１不同量的Ｉｄｇｎ加入反应管底１／）取Ｏｏｏｅ部，用氮气吹干，反应管底部形成均匀的薄膜，涂好的反使将应管放人内有干燥剂的塑料袋内密封，一２℃保存备用。置０

抗原、抗体酶标记技术

抗原、抗体酶标记技术-转自博升生物酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体，酶标记的抗原或抗体称为结合物（conjugate）。

抗原由于化学结构不同，可用不同的方法与酶结合，如为蛋白质抗原，基本上可参考抗体酶标记的方法。

酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体，作为抗体标记的酶常用的有辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AP），不同的酶标记方法也不相同。

1、辣根过氧化物酶（HRP）标记辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）广泛分布于植物中，因辣根中含量最高而得名，由无色酶蛋白和深棕色铁卟啉（辅基）构成一种糖蛋白（含糖18%）。

此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。

由于辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)比活性高，稳定，分子量小，纯酶容易制备，所以最常用。

辣根过氧化物酶（HRP）标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。

其原理是HRP的糖基用过碘酸钠氧化成醛基，加入抗体IgG后该醛基与IgG氨基结合，形成Schiff氏碱。

为了防止HRP中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合，在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。

氧化反应末了，用硼氢化钠稳定Schiff氏碱。

标记步骤：(1)称取5mgHRP溶解于1ml蒸馏水中。

(2)于上液中加入0.2ml新配的0.1M NaIO４溶液，室温下避光搅拌20分钟。

(3)将上述溶液装入透析袋中，对1mM PH4.4的醋酸钠缓冲液透析，4℃过夜。

(4)加20μl 0.2M PH9.5碳酸盐缓冲液，使以上醛化桯RP的PH升高到9.0～9.5，然后立即加入10mg IgG(抗体，或SPA5mg)在1ml 0.01M碳酸盐缓冲液中，室温避光轻轻搅拌2小时。

(5)加0.1ml新配的4mg／ml NaBH４液，混匀，再置4℃2小时。

(6)将上述液装入透析袋中，对0.15M PH7.4 PBS透析，4℃过夜。

矿产

矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。

如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。

㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。

(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。

如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。

对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。

二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。

2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。

㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。

2、矿产品价格稳定性及变化趋势。

三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。

2、矿区矿产资源概况。

3、该设计与矿区总体开发的关系。

㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。

2、矿床开采技术条件及水文地质条件。

矿产