痢疾杆菌(志贺菌)的论文

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(五) 志贺氏菌的抗原结构以及分类
志贺氏菌属细菌的抗原由菌体抗原(O)及表面抗原(K)组成。O 抗原可分为群特异 性抗原和型特异性抗原,型特异性抗原可用于区别菌型。K 抗原可以阻止 O 抗原与 相应抗血清的凝集反应[3]。根据生化反应和 O 抗原结构的不同,志贺氏菌可以分为痢 疾志贺氏菌(S.dysenteriae)、福氏志贺氏菌(S.flexneri)、鲍氏志贺氏菌(S.boydii) 和宋内氏志贺氏菌(S.sonnei)。在发展中国家,由福氏志贺氏菌引起的感染性腹泻疾 病高居首位。
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(七)血清学特性
抗原构造与分型:志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原(O)及表面抗原(K) 组成。主要抗原有三种。
型特异性抗原:型多糖抗原为菌体抗原的一种,是光滑型菌株所含有的重要抗原。 当菌株变为粗糙型时,此抗原也常随之消失,各菌型所含的型抗原不同,可用于区别 菌种的型别。
群特异性抗原:为光滑型菌株的次要抗原,也是菌体抗原的一种。特异性较低, 常在数种近似的菌内出现。在福氏菌株中,由于所含群抗原不同,可将某些菌型分为 多种亚型,如福氏菌2型,根据群抗原不同,可分成2a、2b两个亚型。
研究内容摘要:(200 字以内) 目的:志贺菌的分离培养、鉴定及药敏实验。 方法:取新鲜粪便标本划线分离于琼脂平板。37℃培养24 h。挑取可疑菌落
进行革兰染色以及生化反应实验鉴定志贺菌,并进行药敏学试验。 预期研究结果:革兰染色镜检为阴性; 糖发酵、脲酶、V—P试验阴性;甲基
红实验阳性,为志贺菌。药敏实验:对庆大霉素敏感,其次是头孢噻吩,而对四 环素、利福平不敏感。
根据症状轻重及病情急缓分为以下五型。 1.轻型:无中毒症状,体温正常或稍高,腹痛腹泻较轻,大便次数多10次以下/日, 呈糊状或水样,含少量粘液,里急后重感不明显,可有恶心呕吐。 2.普通型(中型):起病较急,有畏寒、发热中毒症状,体温在39℃左右,伴有恶心 呕吐、腹痛腹泻、里急后重,大便次数为10~20次/日,脓血便量少,少数病人以水 样腹泻为特点,失水不明显。 3.重型:起病急骤,畏寒、高热、恶心呕吐、腹痛剧烈、粘液血便且次数频繁,20 次以上/日、里急后重、四肢厥冷、意识模糊。 4.中毒型:起病急,突发高热,24小时之内迅速出现休克、惊厥和意识障碍。大便次 数不多,常发生在儿童,病情凶险,死亡率极高。 5.慢性菌痢:多由于急性菌痢未彻底治疗或自行缓解而成为慢性菌痢,病程超过2个 月以上,有食欲不振、大便不正常,时干时稀,少有粘液。一般无腹痛,仅在排便前 有下腹部隐痛或肠绞痛,排便后腹痛消失。部分病人可有失眠、多梦、健忘、神经衰 弱等症状。
热,神志障碍等.
2)破坏肠粘膜,形成炎症,溃疡,呈现典型的脓血粘液便.
内毒素还能作用于肠壁植物神经系统,使肠功能发生紊乱,肠蠕动失调和痉挛.
尤其是直肠括约肌痉挛最明显,因而出现腹痛,里急后重等症状.
(3)外毒素 A 群志贺菌 I 型和 II 型还能产生外毒素,称志贺毒素.使蛋白质合
成中断(上皮细胞损伤).
表面抗原(K抗原):在新分离的某些菌株菌体表面含有此种抗原。不耐热,加热 100℃1小时即被破坏。具有此种抗原的菌株,可阻止菌体抗原与相应免疫血清发生凝 集。
根据抗原构造的不同,按最新国际分类法,将本属细菌分为四个群、39个血清型 (包括亚型)(见下表)
菌名
志贺氏菌 福氏菌
鲍氏菌 宋内氏菌
血清分类
生化特性
根据 WHO 统计[,每年有 1.647 亿人感染痢疾,1.1 万人死亡,其中多数为 5 岁以下的儿童。在成年患者中,10~100CF U 志贺氏菌就可通过感染肠道致病,
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引发严重的炎症反应。发展中国家由于缺乏清洁的水源、缺少必要的卫生医疗设 备、营养不良等诸多原因,成为痢疾的高发地。因此,建立快速、有效地检测和 鉴定志贺氏菌的方法显得尤为重要。
(二)致病性与免疫性
1.致病物质主要是侵袭力和内毒素,有的菌株尚产生外毒素.
(1)侵袭力 借菌毛粘附,穿入回肠末端和结肠粘膜上皮细胞,在上皮细胞内繁
殖,形成感染灶,引起炎症反应.细菌一般不进入血流.志贺菌穿透上皮细胞的能
力,由基因所控制.志贺菌只有侵入肠粘膜后才能致病.
(2)内毒素
1)作用于肠粘膜,使通透性增高,促进对内毒素的吸收,引起发


亚型
甘露醇 鸟氨酸脱羧

A
1~10
+
-
B
1~6x、y变 1a、1b、2a、2b、3a、 +
-

3b3c、4a、4b
C
1~15
+
-
D
1
+
-
所致疾病:志贺氏菌引起的细菌性痢疾可分为两类6型。
A、急性细菌性痢疾:又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型。急性 典型菌痢症状典型,有腹痛腹泻、脓血粘便、里急后重、发热等症状。各型菌都可引
医学微生物学实验设计论文
导致细菌性痢疾的菌种研究—志贺菌
指导老师:
赵巍
小组成员: 王斌 (学号 201050802180 )
王连凯 (学号 201050182 )
张珊 (学号 201050802190 )
班 级:2010 级 06 班
2012 年 月 日
可能引起.临床主要有高热,神志障碍,休克,病死率较高.
(2)慢性菌痢 病程>2 月,迁延不愈,局部症状为主.
3.病后建立的型特异免疫(SIgA)短暂,不持久,无交叉.
4 致病机制
痢疾杆菌经口进入消化道后,在抵抗力较强的健康人可被胃酸大部分杀灭,
即使有少量未被杀灭的病菌进入肠道,亦可通过正常肠道菌群的拮抗作用将其
排斥。此外,在有些过去曾受感染或隐性感染的患者,其肠黏膜表面有对抗痢
疾杆菌的特异性抗体(多属分泌性 IgA),能排斥痢疾杆菌,使之不能吸附于肠
黏膜表面,从而防止菌痢的发生。而当人体全身及局部抵抗力降低时,如一些
慢性病、过度疲劳、暴饮暴食及消化道疾患等,即使感染小量病菌也容易发病。
痢疾杆菌侵入肠黏膜上皮细胞后,先在上皮细胞内繁殖,然后通过基底
膜侵入黏膜固有层,并在该处进一步繁殖,在其产生的毒素作用下,迅速引起
炎症反应,其强度与固有层中的细菌数量成正比,肠上皮细胞坏死,形成溃疡。
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菌体内毒素吸收入血,引起全身毒血症。
中毒性菌痢的发病机制可能是特异性体质对细菌内毒素的超敏反应,产
生儿茶酚胺等多种血管活性物质引起急性微循环障碍、感染性休克、DIC 等,导
近些年,抗生素的大量使用,使得志贺菌的耐药菌株也有增加的趋势,通过 进行药敏试验其结果表明有不同抗生素对志贺菌的程度不同,所以,在使用抗菌 药前临床医师要常规送检志贺菌的培养和药敏检测, 即使经验用药也需不断参 考耐药谱的变化,提倡合理使用抗生素,这样不仅可提高诊断的准确性,也可提高 疗效,防止耐药株的产生。细菌性腹泻,临床特征近几年并无大的改变,但血清型 的变化较大,防治仍不容忽视,需引起有关部门的高度关注。
结论:此方法可检出志贺菌。
关键词(3-5 个):细菌性痢疾 志贺菌 分离培养 药敏实验
一、选题的目的和意义(主要说明:进行研究的必要性、预期达到的目的、实际应用价值和学术
意义)(600 字)
细菌性痢疾(简称菌痢)是由志贺氏菌引起的一种急性肠道传染病,也是《中 华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病。该病不但发病率高,其急性中 毒型菌痢容易误诊,危及生命。病人和带菌者是菌痢的主要传染源,传播途径主 要为粪-口传播,人群对菌痢普遍易感,病后免疫力持续时间较短,不同型别菌株 之间无交叉免疫,短时间内也可能再次发生感染。
(六)生化特性
本菌属都能分解葡萄糖,产酸不产气。大多不发酵乳糖,仅宋内氏菌迟缓发酵乳 糖。靛基质产生不定,甲基红阳性,VP 试验阴性,不分解尿素,不产生 H2S。根据生 化反应可进行初步分类。
志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不同,可分为二大组。
A、不分解甘露醇组:主要为志贺氏菌。又根据能否产生靛基质,进一步分靛基 质阳性(1、3、4、5、6、9、10 型)和靛基质阴性(2、7、8 型)的志贺氏痢疾菌。 B、分解甘露醇组:包括福氏、鲍氏、宋内氏菌。再按乳糖分解情况,分为迟缓分解 乳糖的宋内氏和不分解乳糖的福氏和鲍氏菌。后者进一步再根据靛基质产生与否,分 靛基质阳性(福氏菌 1、2、3、4、5 型和鲍氏菌 5、7、9、11、13、15 型)和靛基质 阴性(福氏菌 6 型和鲍氏菌 1、2、3、4、6、8、10、12、14)二类。
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二、国内研究现状(1000 字以内)
志贺菌
(一)生物学性状
革兰染色阴性,杆菌, 无鞭毛,有菌毛. 在肠道鉴别培养基上形成无色,
半透明的菌落.均能分解葡萄糖只产酸不产气,除宋内志贺菌迟缓发酵乳糖外,
均不分解乳糖. 抗原构造与分类 有 O 和 K 两种抗原.O 抗原是分类的依据,
将志贺菌属分为四群(种)40 余血清型(包括亚型).
B、慢性细菌性痢疾:又分慢性迁延型、慢性隐伏型、急性发作型三型。慢性迁 延型,通常由急性菌痢治疗不彻底等引起。病程超过2个月,时愈时发,大便培养阳 性率低。在有临床症状时为急性发作型,该型往往在半年内有急性菌痢病史。慢性隐 伏型菌痢,是在一年内有过菌痢病史,临床症状早已消失,但直肠镜可发现病变或大 便培养阳性。
致重要脏器功能衰竭,以脑组织受累较重。
(三)微生物学检查
1.粘液脓血便,肛拭标本.
2.分离培养与鉴定
标本接种肠道鉴别或选择培养基,
↓ 37℃ 24h
取无色较透明菌落进行生化反应和血清学试验,以确定菌群和菌型.
3.毒力试验 测定志贺菌的侵袭力可用 Senery 试验(致豚鼠角膜结膜炎).
4.快速诊断法 (1)免疫染色法 (镜下观察有无凝集现象). (2)免疫荧
2.所致疾病
传染源是病人和带菌者. 传播途径主要为粪一口.人类对志贺氏菌较易感.
痢疾志贺菌引起病情较重;宋内志贺菌多引起轻型感染;福氏志贺菌感染易转变
为慢性,病程迁延;福氏和宋内志贺菌是我国常见的流行型别.
临床感染类型
(1)急性菌痢 局部症状有脓血便,腹痛,里急后重.
急性中毒性菌痢,以小
儿多见,无明显的消化道症状,主要表现全身严重的中毒症状.各型志贺菌都有
志贺氏菌带菌者有三种类型。A.健康带菌者,是指临床上无肠道症状而又 能排出痢疾杆菌者。这种带菌者是主要传染源,特别是饮食业、炊事员、和保 育员中的带菌者,潜在的危险性更大。B.恢复期带菌者,是指临床症状已治愈 的病人,仍继续排菌达 2 周之久者。C.慢性带菌者,是指临床症状已治愈,但 长期排菌者。
(八)志贺氏菌的检测技术 1 常规生化鉴定方法 常规生化检测须经过增殖培养、分离纯化、生化试验、血清学实验等,检验步
光菌球法 简便,快速,特异性高.
(3)协同凝集试验 (查粪便中有无志贺菌
可溶性抗原). (4)乳胶凝集试验 (既可查抗原又可查抗体). (5)分子
生物学方法 (PCR,核酸杂交等查细菌 DNA)
(四)防治原则 特异性预防 口服依赖链霉素株(Sd)制成的多价活疫苗有一定保护作用. 药物治疗 抗生素,注意多重耐药菌株.五
通过对志贺菌的研究,应当采取有效措施进行预防,如搞好环境卫生,加强 厕所及粪便管理,消灭苍蝇孳生地,发动群众消灭苍蝇;加强饮食卫生及水源管 理,尤其对个体及饮食摊贩做好卫生监督检查工作;加强卫生教育,人人做到饭 前便后洗手,不引生水,不吃变质和腐烂食物,不吃被苍蝇沾过的食物。
人体在感染后都可能出现恶心、呕吐、腹痛等症状,对于症状不典型者,极容 易被误诊为沙门菌、致泻性大肠埃希氏菌或霍乱弧菌感染,影响治疗而导致慢性 感染或带菌者,这一方面延误了患者的早期治疗,另一方面扩大了病原体的传播。 因此,迫切需要对病因进行准确而快速的诊断。目前,包括我国在内的许多国家对 这类致病菌的检验,大多仍沿用传统的细菌培养及鉴定方法,步骤繁琐,检验周期 长,远不能满足应对突发公共卫生事件上,及时诊断、结果准确、敏感性和特异性 高的要求。
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起,以志贺氏菌引起的较重,宋内氏菌引起的较轻。经治疗,预后良好。如治疗不彻 底,可转为慢性。急性非典型菌痢症状不典型,易诊断错误延误治疗,常导致带菌或 慢性发展。急性中毒性菌痢小儿多见,各型菌都可发生。中毒性菌痢一系列的病理生 理变化,主要是内毒素造成机体微循环障碍的结果。导致内脏淤血、周围循环衰竭(休 克),主要功能器官灌注不足,发生心力衰竭、脑水肿,急性肾功能衰竭。严重微循 环障碍,再加上内毒素损伤血管内皮细胞、激活凝血因子等,而发生弥漫性血管内凝 血(DIC)。
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