《基因工程》知识点默写
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专题1 基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外和
,赋予生物以新的,创造出更符合人们需要的新的和
。基因工程是在上进行设计和施工的,又叫做。
基因工程育种的原理:;优点:、
(一)基因工程的基本工具(工具酶:、)
1.“分子手术刀”——
(1)来源:主要是从中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种的核苷酸序列,并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开,因此具有性。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:末端和末端。(4)限制酶自身DNA,原因是原核生物中或识别序列已经被。
2.“分子缝合针”——
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:
①相同点:都缝合键。
②区别:E·coliDNA连接酶来源于,只能将双链DNA片段互补的之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合,但连接平末端的之间的效率较。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,
形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——
(1)载体具备的条件:①。
②。
③。
(2)最常用的载体是 ,它是一种裸露的、结构简单的、独立于之外,并具有的 DNA分子。
(3)其它载体:、 .
(二)基因工程的基本操作程序
第一步:
1.目的基因是指:。
2.获取目的基因的方法有、
和。
3.基因文库是指:将含有某种生物的许多DNA片段,导入
中储存,各个受体菌分别含有这种生物的,称为基因文库。包含了一种生物所有的基因,这种基因文库称为;包含了一种生物的一部分基因,这种基因文库称为,如。
获取目的基因的依据有哪些?如、、
、、。
4.PCR技术扩增目的基因
(1)原理:
(2)特点:
(3)条件:()、、()、()。
(4)仪器:。
5.人工合成目的基因的方法有:、。第二步: ----也是基因工程的
1.目的:。
2.组成:+++
(1)启动子含义及作用:
。
(2)终止子含义及作用:。
注意与终止密码子的区别
(3)标记基因的作用:。
常用的标记基因是、。
第三步:
1.转化的概念:是进入受体细胞内,并且在受体细胞内的过程。
2.常用的转化方法:
将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是,其次还有和
等。其中单子叶常有的方法是。
农杆菌转化的原理是将Ti质粒上的整合到。
将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是。此方法的受体细胞多是
。
将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是
,最常用的原核细胞是,其转化方法是:先用处理细胞,使其成为,再将溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。
3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是是否表达。第四步:
1.检测目的基因是否在受体细胞中稳定表达的关键是采用的方法是。
2.检测目的基因发挥功能作用的第一步采用的方法是。
3.从分子水平上检测目的基因是否表达的方法是。
4.最有效或者说最可靠的检测方法是。如。以上步骤中哪一步骤没有用到碱基互补配对原则:
原核生物作为受体细胞的优点:、、
。
转化的实质是目的基因整合到中。
[测一测]
某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a,通过基因工程将a转移到马铃薯植物中。经检测,Amy在成熟块茎细胞的细胞间隙中发现。请回答:
(1)在基因工程中,a叫____________,提取它的一个必要步骤是_____________________。它与基因运载工具________结合前还必须经过的处理步骤是__________________________。
(三)基因工程的应用
(1)例如我国转基因抗虫棉的培育,目的基因是
,从(微生物)中分离而来的抗虫基因。培育抗虫作物的优点是:、。
(2)乳腺生物反应器:科学家将基因与基因的等调控组件重组在一起,通过等方法,导入哺乳动物的中。这种药物生产的方式(受/不受)生物性别的限制,若从动物尿液中提取目的基因产物则(受/不受)性别限制,这种方式称为。
(3)基因工程的目的不同,可选用的受体细胞不同。若生产基因工程药品,受体细胞一般选用,也可称为。从而利用它们生产药物。
(4)基因检测和基因诊断,都是利用的,来检测基因从而达到鉴定性别或检查疾病的目的。
(四)蛋白质工程的概念
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过
,对进行改造,或制造一种,以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产的蛋白质)
蛋白质工程的基础:
蛋白质工程的手段:对蛋白质的结构进行设计改造,最终必须通过来完成。
从预期的出发→设计预期的→推测应有的→找到相对应的(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。