抗菌药物敏感性试验和细菌耐药性检查精品PPT课件
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力降低，则产生耐药，如金黄色葡萄球菌中PBP转变 为PBP2a。大肠埃希菌中PBP3改变，引起对头孢氨苄 和其他头孢抗生素耐药 。 6.肠球菌van基因编码产生肽聚糖上一种前体蛋白，阻 碍万古霉素和肽链间相互作用而导致耐药。
21
细菌耐药性的生物化学机制
22
细菌耐药性检测方法
• 一、 细菌耐药表型检测 • 二、β-内酰胺酶检测
3
Clinical and Laboratory Standards
Institute (CLSI) （National Committee for Clinical Laboratory Standards，NCCLS）
• 经常更新和发布临床微生物实验室常规药敏试 验的药物选择和报告指南，
• 可供我们参考。该指南将抗菌药物分成A、B、 C、U四组（表8-11、12）：
diffusion method) • 3、E试验（Epsilometer test） • 4、最低杀菌浓度测定（minimal bactericidal
concentration，MBC） • 5、联合药敏试验（test of antibiotic combination）
9
左起第四管为药物最低浓度而肉眼无细菌生长，即待测菌的 MIC 为 16mg/L
• （1）A组：为常规药敏试验的首选药物，其 结果也应常规报告。
4
• （2）B组：包含一些临床上重要的特别 针对医院感染的药物，亦可作为首选药 物，但只是选择性地报告给临床，当细 菌对A组同类药物耐药、特定的标本来 源、多种细菌感染、多部位感染等情况 也应报告B组药物的敏感结果。对A组药 过敏、耐受或无效的病例和以流行病学 调查为目的向感染控制部门报告。
– 碘淀粉测定法（iodometric test） – 头孢色原菌素纸片法（nitrocefin test）
细菌的外膜上特殊的药物泵出系统 使菌 体内的药物浓度不足导致耐药 。铜绿假单胞菌外 膜上有一种蛋白OprK，泵出多种抗生素 ，是产 生耐药的重要机制 。
19
细菌耐药性的生物化学机制
• 药物作用靶位的改变 通过靶位的改变使抗 生素不易结合，是耐药发生的重要机制。
1.核糖体靶位酶亲和力的改变导致对四环素、 红霉素、喹诺酮、氨基糖苷类、甲氧嘧啶、磺 胺类抗生素耐药 。
17
细菌耐药性的生物化学机制
• 灭活酶和钝化酶的产生 1.β-内酰胺酶 水解药物β-内酰胺环使酰胺
键断裂而失去抗菌活性 。 2.氨基糖苷类钝化酶 有3类：乙酰转移酶
(AAC)、磷酸转移酶(APH)、核苷转移酶 (AAD)，分别通过乙酰化作用、磷酸化作用、 核苷化作用灭活此类抗生素。 3.氯霉素乙酰转移酶 4.红霉素酯酶和其他灭活酶
5
• （3）C组：为一些替代性或补充性的抗菌药 物，可在以下情况选择并进行试验：医院内 潜在有对数种基本药物耐药（特别是耐同一 类药物，如β-内酰胺类或氨基苷类）的菌株 的局部流行或广泛流行；治疗对基本药物过 敏的患者；治疗特定致病菌的感染（如选择 氯霉素用于肠道外分离的沙门菌属的感染和 耐万古霉素的肠球菌的感染）和以流行病学 调查为目的向感染控制部门报告。
第七节抗菌药物敏感性试验 和细菌耐药性检查
1
• 抗微生物药物敏感性试验 （antimicrobial susceptibility tet， AST） 是对敏感性不能预测的临床分离菌 株进行药敏试验，以指导临床选择治疗 药物和了解区域或医院内常见病原菌耐 药性变迁，有助于临床经验性治疗选药。
2
药敏试验用药的选择
• 药敏试验用药需综合考虑下列因素：①根据本 地致病菌的流行病学和耐药性调查结果，分析 感染常见菌以及它们的耐药模式，选取对当地 流行株敏感的抗菌药物；②不选择细菌所具固 有耐药的抗菌药物如革兰阴性杆菌对万古霉素 固有耐药，革兰阳性球菌对氨曲南固有耐药； ③优先选用高效低毒的抗菌药物；④选用价格 便宜、供应充足的抗菌药物。
• 2、血清抗菌活性测定（serum antimicrobial avtivity）
16
产生细菌耐药性的主要原因
抗菌药物的滥用，导致对细菌产生巨大的 选择压力（selective pressure），使那 些原来只占极小比例的耐药菌（10-6~109，自发突变频率），迅速繁殖。
动物很可能是一个蓄积耐药细菌，并向 人体传递耐药细菌的储蓄库。
6
• （4）U组：仅用于治疗泌尿道感染的抗 菌药物（如呋喃妥因和某些喹诺酮类药 物）和针对一些特定的泌尿道致病菌 （如铜绿假单胞菌）的抗菌药物。
7
抗菌素抑菌杀菌作用
8
常用敏感性试验的方法
• 预测治疗效果的试验：
• 1、稀释法（minimal inhibitory concentration，MIC） • 2、K-B纸片琼脂扩散法(Kirby-Barer disc agar
18
细菌耐药性的生物化学机制
• 抗菌药物渗透障碍
对革兰阴性菌而言，外膜的通透性对药物进 出菌体至关重要。亲水性的药物通道蛋白为 OmpF 、OmpC 和PhoE。抗生素可以直接扩散进 入膜内并到达菌体内相应作用部位 。疏水性越强 的抗生素 、带负电荷越多的抗生素分子 、较大 的药物分子也不易通过 。外膜蛋白的缺失可导致 细菌耐药性的发生 。
2.核糖体位点的改变引起对大环内酯类和林可 霉素类抗生素耐药 。
3. DNA螺旋酶的改变是对喹喏酮类抗生素耐药 的重要机制 。
20
细菌耐药性的生物化学机制
• 药物作用靶位的改变 4.核酸合成途径中序列靶位酶的改变 对磺胺-甲氧嘧啶
耐药，二氢叶酸还原酶改变致甲氧嘧啶耐药。 5. PBP发生改变 , β-内酰胺类抗生素不能结合或亲和
10
11
• K-B法试验程序
挑取菌落 转种肉汤
比浊
涂布平板上 放置药敏纸片 量取抑菌圈大1小2
1、常见菌 2、苛氧菌 3、厌氧菌 4、酵母菌 5、真菌
• E试验法
13
• 联合药物敏感试验意义 • 联合Байду номын сангаас菌试验 • 最低杀菌浓度测定
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15
常用敏感性试验的方法
• 监控治疗效果试验：
• 1、血清抗菌药物浓度测定（serum antimicrobial level）
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细菌耐药性的生物化学机制
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细菌耐药性检测方法
• 一、 细菌耐药表型检测 • 二、β-内酰胺酶检测
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Clinical and Laboratory Standards
Institute (CLSI) （National Committee for Clinical Laboratory Standards，NCCLS）
• 经常更新和发布临床微生物实验室常规药敏试 验的药物选择和报告指南，
• 可供我们参考。该指南将抗菌药物分成A、B、 C、U四组（表8-11、12）：
diffusion method) • 3、E试验（Epsilometer test） • 4、最低杀菌浓度测定（minimal bactericidal
concentration，MBC） • 5、联合药敏试验（test of antibiotic combination）
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左起第四管为药物最低浓度而肉眼无细菌生长，即待测菌的 MIC 为 16mg/L
• （1）A组：为常规药敏试验的首选药物，其 结果也应常规报告。
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• （2）B组：包含一些临床上重要的特别 针对医院感染的药物，亦可作为首选药 物，但只是选择性地报告给临床，当细 菌对A组同类药物耐药、特定的标本来 源、多种细菌感染、多部位感染等情况 也应报告B组药物的敏感结果。对A组药 过敏、耐受或无效的病例和以流行病学 调查为目的向感染控制部门报告。
– 碘淀粉测定法（iodometric test） – 头孢色原菌素纸片法（nitrocefin test）
细菌的外膜上特殊的药物泵出系统 使菌 体内的药物浓度不足导致耐药 。铜绿假单胞菌外 膜上有一种蛋白OprK，泵出多种抗生素 ，是产 生耐药的重要机制 。
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细菌耐药性的生物化学机制
• 药物作用靶位的改变 通过靶位的改变使抗 生素不易结合，是耐药发生的重要机制。
1.核糖体靶位酶亲和力的改变导致对四环素、 红霉素、喹诺酮、氨基糖苷类、甲氧嘧啶、磺 胺类抗生素耐药 。
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细菌耐药性的生物化学机制
• 灭活酶和钝化酶的产生 1.β-内酰胺酶 水解药物β-内酰胺环使酰胺
键断裂而失去抗菌活性 。 2.氨基糖苷类钝化酶 有3类：乙酰转移酶
(AAC)、磷酸转移酶(APH)、核苷转移酶 (AAD)，分别通过乙酰化作用、磷酸化作用、 核苷化作用灭活此类抗生素。 3.氯霉素乙酰转移酶 4.红霉素酯酶和其他灭活酶
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• （3）C组：为一些替代性或补充性的抗菌药 物，可在以下情况选择并进行试验：医院内 潜在有对数种基本药物耐药（特别是耐同一 类药物，如β-内酰胺类或氨基苷类）的菌株 的局部流行或广泛流行；治疗对基本药物过 敏的患者；治疗特定致病菌的感染（如选择 氯霉素用于肠道外分离的沙门菌属的感染和 耐万古霉素的肠球菌的感染）和以流行病学 调查为目的向感染控制部门报告。
第七节抗菌药物敏感性试验 和细菌耐药性检查
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• 抗微生物药物敏感性试验 （antimicrobial susceptibility tet， AST） 是对敏感性不能预测的临床分离菌 株进行药敏试验，以指导临床选择治疗 药物和了解区域或医院内常见病原菌耐 药性变迁，有助于临床经验性治疗选药。
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药敏试验用药的选择
• 药敏试验用药需综合考虑下列因素：①根据本 地致病菌的流行病学和耐药性调查结果，分析 感染常见菌以及它们的耐药模式，选取对当地 流行株敏感的抗菌药物；②不选择细菌所具固 有耐药的抗菌药物如革兰阴性杆菌对万古霉素 固有耐药，革兰阳性球菌对氨曲南固有耐药； ③优先选用高效低毒的抗菌药物；④选用价格 便宜、供应充足的抗菌药物。
• 2、血清抗菌活性测定（serum antimicrobial avtivity）
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产生细菌耐药性的主要原因
抗菌药物的滥用，导致对细菌产生巨大的 选择压力（selective pressure），使那 些原来只占极小比例的耐药菌（10-6~109，自发突变频率），迅速繁殖。
动物很可能是一个蓄积耐药细菌，并向 人体传递耐药细菌的储蓄库。
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• （4）U组：仅用于治疗泌尿道感染的抗 菌药物（如呋喃妥因和某些喹诺酮类药 物）和针对一些特定的泌尿道致病菌 （如铜绿假单胞菌）的抗菌药物。
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抗菌素抑菌杀菌作用
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常用敏感性试验的方法
• 预测治疗效果的试验：
• 1、稀释法（minimal inhibitory concentration，MIC） • 2、K-B纸片琼脂扩散法(Kirby-Barer disc agar
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细菌耐药性的生物化学机制
• 抗菌药物渗透障碍
对革兰阴性菌而言，外膜的通透性对药物进 出菌体至关重要。亲水性的药物通道蛋白为 OmpF 、OmpC 和PhoE。抗生素可以直接扩散进 入膜内并到达菌体内相应作用部位 。疏水性越强 的抗生素 、带负电荷越多的抗生素分子 、较大 的药物分子也不易通过 。外膜蛋白的缺失可导致 细菌耐药性的发生 。
2.核糖体位点的改变引起对大环内酯类和林可 霉素类抗生素耐药 。
3. DNA螺旋酶的改变是对喹喏酮类抗生素耐药 的重要机制 。
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细菌耐药性的生物化学机制
• 药物作用靶位的改变 4.核酸合成途径中序列靶位酶的改变 对磺胺-甲氧嘧啶
耐药，二氢叶酸还原酶改变致甲氧嘧啶耐药。 5. PBP发生改变 , β-内酰胺类抗生素不能结合或亲和
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• K-B法试验程序
挑取菌落 转种肉汤
比浊
涂布平板上 放置药敏纸片 量取抑菌圈大1小2
1、常见菌 2、苛氧菌 3、厌氧菌 4、酵母菌 5、真菌
• E试验法
13
• 联合药物敏感试验意义 • 联合Байду номын сангаас菌试验 • 最低杀菌浓度测定
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常用敏感性试验的方法
• 监控治疗效果试验：
• 1、血清抗菌药物浓度测定（serum antimicrobial level）