实验12 从红辣椒中分离红色素
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从 红 辣 椒 中 分 离 红 色 素
在线答疑: 在线答疑: S54y@zhku.edu.cn ustc_chenqian@hotmail.com
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从 红 辣 椒 中 分 离 红 色 素
12.5 问题讨论
(1)硅胶G薄板失活对结果有什么影响? 硅胶G薄板失活对结果有什么影响? (2)点样时应该注意什么?点样毛细管太粗会有什么后 点样时应该注意什么? 果? (3)如果样品不带色,如何确定斑点的位置? 如果样品不带色,如何确定斑点的位置?
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(2)点样时应该注意什么?点样毛细管太粗会有什么 点样时应该注意什么? 后果? 后果? 答:点样时,毛细管垂直轻轻地点在原点标记上, 点样时,毛细管垂直轻轻地点在原点标记上, 毛细管在板上接触的时间不宜过长。 毛细管在板上接触的时间不宜过长。一般样点直径在 2~3mm。如果毛细管太粗,则样点直径过大,影响色 wk.baidu.commm。如果毛细管太粗,则样点直径过大, 谱分离效果。 谱分离效果。
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12.2 实验原理
红辣椒中含有多种色素,它们在CH2Cl2中的溶解度 红辣椒中含有多种色素, 它们在CH 较高, 用其萃取剂, 可得到色素的混合物。 较高 , 用其萃取剂 , 可得到色素的混合物 。 再通过柱 层析分离, 可得到较高纯度的红色素, 层析分离 , 可得到较高纯度的红色素 , 并可通过薄层 层析检验。 层析检验。
12.4
注意事项
(1)红辣椒要干且研细。 红辣椒要干且研细。 (2)硅胶G薄板要铺得均匀,不要太厚。 硅胶G薄板要铺得均匀,不要太厚。 (3)薄板涂好后静置和活化时间要够,否则板易裂,且 薄板涂好后静置和活化时间要够,否则板易裂, 斑点无法分开。 斑点无法分开。
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12.3
操作流程
(1)萃取色素
加沸石, 加沸石, CH2Cl2 红辣椒 回流 冷却 抽滤 蒸馏 混 合 色 素
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(3)如果样品不带色,如何确定斑点的位置? 如果样品不带色,如何确定斑点的位置? 答:如果样品本身无色,可把层析板放在紫外灯下 如果样品本身无色, 观察有无荧光斑点,也可用合适的显色剂如I 观察有无荧光斑点,也可用合适的显色剂如I2或KMnO4 显色。 显色。
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(2)薄层分析
混合 色素 溶解 点样 层析 计算R 计算 f
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(3)柱层析
波谱分析 混合 色素 溶解 加样 洗脱 收集
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(4)划起始线时,要轻,不要刺破薄层。 划起始线时,要轻,不要刺破薄层。 (5)薄层板浸入展开剂不能超过点样线,否则样品不在 薄层板浸入展开剂不能超过点样线, 薄板上分离而直接溶入展开剂。 薄板上分离而直接溶入展开剂。 (6)色谱柱要装充均匀,不能有断层。 色谱柱要装充均匀,不能有断层。 (7)注意废物处理。 注意废物处理。
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12.6 12.6 参考答案
(1)硅胶G薄板失活对结果有什么影响? 硅胶G薄板失活对结果有什么影响? 答:硅胶G薄板失活,不同色素在吸附剂上的吸 硅胶G薄板失活, 附、解吸附的性能差异小,达不到分离目的。 解吸附的性能差异小,达不到分离目的。
实验12 实验12 从红辣椒中分离红色素
12.1实验目的 12.1实验目的
(1)学习从红辣椒中分离红色素的原理和操作方法。 学习从红辣椒中分离红色素的原理和操作方法。 (2)熟悉薄层分析和柱层析两种分离、鉴定技术。 熟悉薄层分析和柱层析两种分离、鉴定技术。
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