(医学课件)肾脏病理
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Glomerulus Loop of
Henley PCT, DCT, CT
Cortex, Medulla, 5
6
肾活检病理的研究方法
光学显微镜检查 半薄切片和多种特殊染色方法
免疫病理学方法 免疫荧光、免疫组织化学
电子显微镜检查 透射电镜、扫描电镜、免疫电镜
7
光镜
要求:切片薄(3μm), 有特殊染色。 肾小球数一般≧10个/切片。
作为指示物的荧光素被激发放出鲜艳的荧光
17
免疫荧光
要求:抗体和补体齐全,标本抗原性保存良好 特点:快而敏感,但不易保存 观察: (1)何种抗体沉积:
球蛋白类:IgG、IgA、IgM:以确定参与免疫反应的球蛋白种类 补体类:C3、C1q 或C4 :以证实免疫反应过程中补体被激活的途
径,即经典(C1q)或旁路途径(C3) 血浆蛋白类:FRA(纤维蛋白原) 特异性抗原:如HBsAg、HBcAg、k、入 等
22
23
电镜
必要性: 1、在光镜病理改变轻微的肾脏疾病,EM检查
非常必要 2、在伴特殊有形结构的肾脏疾病诊断中,EM具
有非常重要的价值
优点:定位准确
缺点:视野较小,观察局限、片面
24
电镜
观察: 1、足突是否融合-广泛性、部分、节段性 2、基底膜的变化 3、电子致密物的沉积部位与形状、密度 4、肾小球固有细胞与系膜基质变化 5、特殊有形结构物质的沉积部位与形态
18
免疫荧光
(2)沉积部位:Mes、GCW、TBM、A、BBM (3)形态:线状、颗粒状、团块状 (4)强度( ± ~ ++++)
± + ++ +++ ++++
高倍镜下隐约可见 低倍镜隐约可见,高倍镜下可见 低倍镜可见,高倍镜下清晰 低倍镜清晰,高倍镜下耀眼 低倍镜耀眼,高倍镜下刺眼
19
20
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观察:
HE(苏木素伊红染色):观察细胞核,分辨细胞种类,提示GBM厚度。 PAS(过碘酸雪夫氏染色):观察GBM、TBM及细胞外基质(ECM), 但系膜基质(MM)染得比实际宽,且GBM很少用该染色。 PASM(六胺银):GBM为主,MM也很清楚(胶原Ⅳ, LN,FN 呈黑 色)。 Masson:观察嗜复红蛋白(多提示免疫复合物),间质纤 维化(胶原纤维均呈绿色,GBM、TBM、MM也为绿色,细胞核、免疫复 合物、血栓、血浆成分均呈红色)。 PASM+Masson:
肾脏病理诊断在肾脏病学中的重要性
构成完整的肾脏疾病诊断 显示病变的活动指标 协助临床制定治疗方案 协助临床判断治疗效果 协助临床判断预后
1
目的
1. 了解肾脏病理知识 2. 根据临床资料推断病理改变
2
基础篇—阅片
3
4
Anatomy ofwk.baidu.comKidney
Note the positions of
8
PAS
Masson
HE
PASM
9
10
11
12
13
14
15
16
免疫荧光
原理:
一种抗体只能与相应的一种抗原特异性结合 将荧光素标记在已知抗体上,用标有荧光素的已
知抗体与待检肾组织反应 若肾组织中有与已知抗体相应的抗原存在,则两
者结合为抗原-已知抗体-荧光素免疫复合物 该复合物在具有紫外光源的荧光显微镜下观察,
25
26
27
正常肾小球
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Henley PCT, DCT, CT
Cortex, Medulla, 5
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肾活检病理的研究方法
光学显微镜检查 半薄切片和多种特殊染色方法
免疫病理学方法 免疫荧光、免疫组织化学
电子显微镜检查 透射电镜、扫描电镜、免疫电镜
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光镜
要求:切片薄(3μm), 有特殊染色。 肾小球数一般≧10个/切片。
作为指示物的荧光素被激发放出鲜艳的荧光
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免疫荧光
要求:抗体和补体齐全,标本抗原性保存良好 特点:快而敏感,但不易保存 观察: (1)何种抗体沉积:
球蛋白类:IgG、IgA、IgM:以确定参与免疫反应的球蛋白种类 补体类:C3、C1q 或C4 :以证实免疫反应过程中补体被激活的途
径,即经典(C1q)或旁路途径(C3) 血浆蛋白类:FRA(纤维蛋白原) 特异性抗原:如HBsAg、HBcAg、k、入 等
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电镜
必要性: 1、在光镜病理改变轻微的肾脏疾病,EM检查
非常必要 2、在伴特殊有形结构的肾脏疾病诊断中,EM具
有非常重要的价值
优点:定位准确
缺点:视野较小,观察局限、片面
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电镜
观察: 1、足突是否融合-广泛性、部分、节段性 2、基底膜的变化 3、电子致密物的沉积部位与形状、密度 4、肾小球固有细胞与系膜基质变化 5、特殊有形结构物质的沉积部位与形态
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免疫荧光
(2)沉积部位:Mes、GCW、TBM、A、BBM (3)形态:线状、颗粒状、团块状 (4)强度( ± ~ ++++)
± + ++ +++ ++++
高倍镜下隐约可见 低倍镜隐约可见,高倍镜下可见 低倍镜可见,高倍镜下清晰 低倍镜清晰,高倍镜下耀眼 低倍镜耀眼,高倍镜下刺眼
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观察:
HE(苏木素伊红染色):观察细胞核,分辨细胞种类,提示GBM厚度。 PAS(过碘酸雪夫氏染色):观察GBM、TBM及细胞外基质(ECM), 但系膜基质(MM)染得比实际宽,且GBM很少用该染色。 PASM(六胺银):GBM为主,MM也很清楚(胶原Ⅳ, LN,FN 呈黑 色)。 Masson:观察嗜复红蛋白(多提示免疫复合物),间质纤 维化(胶原纤维均呈绿色,GBM、TBM、MM也为绿色,细胞核、免疫复 合物、血栓、血浆成分均呈红色)。 PASM+Masson:
肾脏病理诊断在肾脏病学中的重要性
构成完整的肾脏疾病诊断 显示病变的活动指标 协助临床制定治疗方案 协助临床判断治疗效果 协助临床判断预后
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目的
1. 了解肾脏病理知识 2. 根据临床资料推断病理改变
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基础篇—阅片
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Anatomy ofwk.baidu.comKidney
Note the positions of
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PAS
Masson
HE
PASM
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免疫荧光
原理:
一种抗体只能与相应的一种抗原特异性结合 将荧光素标记在已知抗体上,用标有荧光素的已
知抗体与待检肾组织反应 若肾组织中有与已知抗体相应的抗原存在,则两
者结合为抗原-已知抗体-荧光素免疫复合物 该复合物在具有紫外光源的荧光显微镜下观察,
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正常肾小球
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