自身免疫病及免疫检验

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检出 百分 率
100 80 60 40 20
SLE 非活动期
SLE 活动期
RA滑 膜液中
抗 抗 DNP DNP
抗 DNP 抗不溶性DNP抗体
抗 DNP 抗可溶性DNP抗体
人民卫生出版社
(2)抗核小体抗体
抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody,AnuA) 核小体是细胞核染色质的基本组成单位; 细胞凋亡致核小体大量蓄积,并诱导B细胞产生AnuA AnuA是SLE特异的标志性抗体。
胃壁细胞、内因子
结肠黏膜细胞 乙酰胆碱受体 眼晶状体蛋白 胰岛β细胞 胰岛素受体 小胆管上皮细胞
人民卫生出版社
器官非特异性
病 SLE RA SS 混合性结缔组织病 自身免疫性溶血性贫血 特发性血小板减少性紫癜 特发性白细胞减少症 硬皮病 多发性肌炎 名 自 身 抗 原 细胞核成分、细胞浆成分 变性IgG、类风湿相关的核抗原 涎腺上皮细胞 细胞核(RNP) 红细胞 血小板 白细胞 细胞核蛋白、细胞核染色体着丝点 细胞核蛋白
检 出 百 分 率
药物诱导 性狼疮只 能检出此
SLE
100 90 70
50
AHA AHA
AHA
抗 dsDNA
人民卫生出版社
抗ENA抗体
可提取性核抗原 (extractable nuclear antigen, ENA) 是盐水可提取性核抗原的总称,是非组蛋白的核蛋 白,属酸性核蛋白抗原,由许多小分子量的RNA和多 肽组成。
人民卫生出版社
四、生理因素
1.自身免疫病的发病率随年龄增长呈上升趋势;
2.自身免疫病的发病也具有明显的性别差异,女
性发病率较高
五、环境因素
自身免疫病的发生与日晒、潮湿、寒冷等环境因 素可能有关。
人民卫生出版社
六、自身免疫病的病理损伤机制
1.自身抗体介导细胞破坏 病理机制:II型超敏反应 常见疾病:新生儿溶贫、重症肌无力、 Graves病
人民卫生出版社
3.自身免疫病(autoimmune disease,AID) 自身免疫应答过强或持续时间过久,表现为质 和量的异常,所产生的自身抗体和(或)自身致敏 淋巴细胞对表达自身靶抗原的细胞和组织发动攻击, 导致损伤或功能障碍,并出现相应临床症状。
人民卫生出版社
二、自身免疫病的分类
1.按病程分为急性和慢性两种 2.按病因清楚与否分为原发性与继发性两种 3.按受累的解剖系统分为结缔组织病、神经肌肉
人民卫生出版社
(3) 免疫印迹法
SDS-PAGE
分离 形成分子大小不同区带
电转移 PVDF膜或NC膜 加待检血清
抗ENA与相应抗原特异结合
抗人IgG· HRP
ENA—抗ENA—抗人IgG· HRP 显色并判读结果
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(二)类风湿因子测定

类风湿因子(rheumatoid factor,RF): 抗变性IgG的自身抗体,可为19S的IgM,也可为7S
抗ENA 抗核仁抗体 抗着丝点
SLE、慢活肝炎 SLE、RA、PSS、慢性 肝病
MCTD、SLE、PSS、SS 、PM PSS、雷诺现象、SLE PSS、CREST综合征
人民卫生出版社
抗核抗体核型
均质型
核仁型
斑点型
着丝点型 人民卫生出版社
(2)ELISA法 用间接ELISA检测抗dsDNA抗 体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。
人民卫生出版社

ANA主要是IgG,也有IgM、IgA、IgD和IgE; ANA无器官特异性和种属特异性; ANA主要存在于血清中; 将检出ANA作为AID存在的依据。
人民卫生出版社
1.ANA的类型和临床意义
抗DNA抗体:抗dsDNA/抗nDNA、抗ssDNA/抗dDNA等 抗组蛋白抗体(AHA):抗H1、抗H2A、抗H2B、 抗H3、抗H4抗体等 抗非组蛋白抗体:抗nRNP/抗U1RNP、抗Scl-70、 抗SSA、抗Sm、抗SSB、抗Jo-1、抗Rib抗体、 AnuA、抗DNP、抗DM53抗体 抗RANA抗体、抗着丝点、抗Ku抗体等
变性IgG诊断试剂,即用透射比浊或速率散射比
浊仪,检测血清中的RF。此法快速、敏感性 高、精密度高、稳定性好、可定量分析,但仍 只能检测IgM类RF。
人民卫生出版社
3. ELISA法 IgM、IgG和IgA类RF可用ELISA检测,临 床上多采用双抗原夹心法或间接ELISA进行测
定。
人民卫生出版社
的IgG和IgA。 可与人变性IgG结合,但不与正常IgG发生凝集。 RF可在RA患者检出,约70%~90%的血清、约60% 的滑膜液可检出IgG类的RF;
人民卫生出版社

IgG类抗体与相应抗原结合后发生变性; 炎症过程亦可发生IgG变性,构成自身抗原,刺
激机体产生各种抗IgG抗体;

滑膜液中的IgG类RF与变性IgG结合可形成中等
稀释患者血清可做定量检测,1:80稀释仍呈阳性对诊断 SLE有较大参考价值。

人民卫生出版社
抗核抗体核型与相关疾病
核型 荧光图形 抗体 相关疾病
周边型 均质型
斑点型 核仁型 着丝点型
核周环状荧光 核呈均质荧光
核内颗粒状荧光 核仁有荧光 核浆细小相同颗 粒荧光
抗dsDNA 抗DNA、AHA 、 AnuA
70%~90%SLE 活动期增高 ②抗变性DNA (denatured DNA,dDNA) 抗体,又称抗单链 DNA (single stranded DNA,ssDNA)抗体。 人民卫生出版社
抗组蛋白抗体
抗组蛋白抗体(anti-histonic antibody,AHA): 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位,各自都 有特异性抗体;
第二节 自身免疫病的发病机制
一、自身抗原形成
1.隐蔽抗原的释放 2.自身抗原改变
交感性眼炎 人民卫生出版社
3.分子模拟
4.表位扩展
人民卫生出版社
二、免疫细胞和免疫调节功能的异常 1.T、B细胞的异常活化
2.B细胞的多克隆激活 3.调节性T细胞的功能异常
4. MHC-II类分子异常表达
人民卫生出版社
三、遗传因素
HLA 基因与自身免疫病相关性举例
自身免疫病 强直性脊柱炎 全身性红斑狼疮 1型糖尿病 类风湿性关节炎 Graves病 桥本氏甲状腺炎 多发性硬化 重症肌无力 HLA 基因 B27 DR2/DR3 DR3/DR4 DR4 DR3 DR5 DR2 DR3 相关系数 87.4 5. 8 10 4.2 3 3 4.1 2.5
免疫学检验
人民卫生出版社
第二十五章 自身免疫病及免疫检验
人民卫生出版社


1
概述 自身免疫病的发病机制 自身免疫病检验 自身抗体检测实验选择的原则
2
3
4
人民卫生出版社
wk.baidu.com一节
一、基本知识
概述
1.自身耐受(self-tolerance) 正常情况下,免疫系统对宿主自身的组织和细 胞不产生免疫应答。 2.自身免疫 (autoimmunity) 当某种原因使自身耐受性破坏时,免疫系统 就会对自身组织成分、细胞成分及其产物发生免 疫应答。
(三)其他自身抗体测定
其他自身抗体的检测方法与临床意义
自身抗体的类型 抗甲状腺球蛋白抗体(A-TG) 抗甲状腺过氧化物酶抗体 抗乙酰胆碱受体抗体(AchRAb) 抗平滑肌抗体(SMA) 抗线粒体抗体(AMA) 抗胃壁细胞抗体 抗胰岛素抗体(IAA) 抗精子抗体(AsAb) 抗红细胞抗体 抗血小板抗体 抗心磷脂抗体(ACA) 抗肾小球基底膜抗体(GBMAb) 检测方法 荧光免疫法、ELISA、RIA ELISA ELISA、RIA 荧光免疫法、ELISA、RIA 荧光免疫法、ELISA、RIA 荧光免疫法 ELISA ELISA、荧光免疫法 直接凝集试验、Coombs试验 ELISA法、ABC-ELISA法 RIA、ELISA 荧光免疫法 临床意义 桥本甲状腺炎 Graves 病,桥本甲状腺炎 重症肌无力 自身免疫性肝炎,慢性活动性肝炎, 原发性胆汁性肝硬化 RA,SS,SLE,原发性胆汁性肝硬化, 慢性活动性肝炎,持续性肝阻塞 恶性贫血 胰岛素依赖性糖尿病 不育症,不孕症 新生儿溶血,自身免疫性溶血性贫血 原发性血小板减少性紫癜、输血史 SLE,血栓,自发性流产,血小板减少 Goodpasture综合征,狼疮肾炎
疾病、消化系统病和内分泌疾病等
4.按自身抗原的分布范围分为器官特异性和非器 官特异性两类
人民卫生出版社
按发病部位的解剖系统分类
分类 结缔组织 内分泌系统 消化系统 疾病 系统性红斑狼疮、干燥综合征、类风湿性关节炎、混合 性结缔组织病 桥本甲状腺炎、Graves病、Addison病、胰岛素依赖性 糖尿病 萎缩性胃炎、溃疡性胃炎、原发性胆汁性肝硬化
血液系统
心血管系统
恶性贫血、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少 性紫癜
风湿性心肌炎
泌尿系统
呼吸系统 神经系统
肾小球肾炎
特发性肺纤维化 重症肌无力、多发性神经炎
皮肤
荨麻疹
人民卫生出版社
按自身抗原的分布范围分类
器官特异性自身免疫病 器官非特异性自身免疫病
患者的病变常局限于
某一特定的器官,由 对器官的特异性抗原 的免疫应答引起
抗dsDNA和抗Sm阴性的SLE阳性 率为60%~80%,特异性>97%。
人民卫生出版社
常见AID的ANA阳性检出率
疾病
SLE MCTD PSS
ANA(%)
≥95 ≥95 85~95
疾病
SS PM/DM RA
ANA(%)
70~80 30 20~30
人民卫生出版社
2.ANA的检测方法
(1)间接荧光免疫法
ANA谱
抗核仁抗体:抗PM-Scl抗体、抗Th/To抗体、
抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗体等 人民卫生出版社
抗DNA抗体
①抗天然DNA (native DNA,nDNA) 抗体,又称抗双 链DNA (double stranded DNA,dsDNA) 抗体。 对SLE有高特异性 ;SLE诊断标准之一 缓解期降低 药物疗效
全身性或系统性自身 免疫性疾病;患者的 病变可见于多种器官
及结缔组织(结缔组
织病或胶原病) 人民卫生出版社
器官特异性
病 名 自 身 抗 原 甲状腺球蛋白和甲状腺微粒体 TSH受体 肾上腺皮质细胞 桥本甲状腺炎 甲状腺功能亢进(Graves病) Addison病
自身免疫性萎缩性胃炎
溃疡性结肠炎 重症肌无力 交感性眼炎 胰岛素依赖型糖尿病 胰岛素抵抗型糖尿病 原发性胆汁性肝硬化
大小的免疫复合物,相比血清中的IgM类RF更易 致病。
人民卫生出版社
RF检测方法
1.间接胶乳凝集试验
最常采用的检测方法。
以吸附在聚苯乙烯胶乳颗粒上的IgG作诊
断试剂,与待检血清中的RF结合后,出现胶
乳凝集颗粒。此法的灵敏度和特异性不高,且
只能检出血清中的IgM类的RF。
人民卫生出版社
2.免疫比浊法 稀释待检血清至一定浓度后,加入定量的
人民卫生出版社
自身免疫性溶血性贫血 人民卫生出版社
重症肌无力
人民卫生出版社
Graves病 人民卫生出版社
2.循环免疫复合物介导组织损伤
病理机制:III型超敏反应
3.自身反应性T细胞引发炎症性损伤
病理机制:IV型超敏反应
人民卫生出版社
第三节 自身免疫病检验
一、自身抗体的检测
(一)抗核抗体检测 抗核抗体(antinuclear antibody,ANA) 是以真核细胞的核成分为靶抗原的自身抗体的 总称;在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质, 激发机体产生许多抗不同核成分的抗体。
人民卫生出版社
对类风湿有特异诊断价值的ENA: 抗nRNP(nuclear RNP,nRNP)抗体; 抗Sm抗体; 抗SSA抗体; 抗SSB抗体; 抗Scl-70抗体; 抗Jo-1抗体; 抗核糖体抗体 。
人民卫生出版社
(1)抗DNP抗体
核蛋白(DNP) 由DNA和蛋白质组成。DNP抗原有不 溶性及可溶性两种,分别产生相应的抗体。
人民卫生出版社
二、细胞检查
(一)淋巴细胞检测
1.特异性致敏淋巴细胞
如淋巴细胞转化试验或吞噬细胞移动抑制试验
2.淋巴细胞数量和比例 检测淋巴细胞的总数、T、B细胞分类与计数、 CD4/CD8亚群比例等进行
人民卫生出版社
三、自身免疫病的共同特点
1. 血清中有自身抗体或自身反应性致敏T淋巴细胞。 自身抗体和(或)自身反应性T细胞作用于靶抗原所 在的组织细胞,导致组织损伤和功能障碍。 2.可复制出与AID相似的动物模型,并可通过血清或 致敏的淋巴细胞使疾病被动转移。 3.有一定的遗传倾向。病情转归与自身免疫反应的 强度密切相关。 4.部分自身免疫病好发于女性,且发病率随年龄增 长而上升。 5.免疫抑制剂治疗有效但不能根治。 人民卫生出版社
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