细菌对抗菌药物的敏感试验
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白质合成受阻,从而引起细菌死亡。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 3、破坏胞浆膜的完整性
l 这类抗菌药主要是一些抗真菌的药物, 如两性霉素B(Amphotericin B),它们 主要能够与细菌细胞胞浆膜上的一些磷 脂成分结合,破坏胞浆膜的完整性,从 而导致细胞的裂解。
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而引起细胞壁的通透性改变,大量水分 进入细胞浆中而引起细胞的裂解。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 2、抑制蛋白质的转录或合成
l 由于真核生物和原核生物核糖体的差异, 真核生物的核糖体主要是80 S,由60 S和 40 S两个亚基组成,而原核生物的核糖体 是70 S,主要由30 S和50 S两个亚基组成。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l (2)氨基糖苷类钝化酶。细菌对氨基糖苷 类 (Aminoglycosides)抗生素产生耐药性的
最重要的原因就是产生了对这一类药物的
共价修饰酶。这些酶通过磷酸化、乙酰化
和腺苷酸化等途径对其进行修饰而使其灭
活。目前,这一类的共价修饰酶主要有磷 酸转移酶(O-phosphotransferases, APHs), 腺苷酸转移酶(O-adenyltransferases, ANTs)和N-乙酰转移酶(Nacetyltransferases,AACs)3类。现在已经 对这些酶的晶体结构有了清楚的研究。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l (3)氯霉素乙酰转移酶。此酶为一种胞内 酶,早在1987年,Lyon等就确定此酶由质 粒或染色体或转座子基因编码,主要作用 是使氯霉素类抗生素转化为无抗菌活性的 代谢物。
l (4)红霉素酯化酶。此酶是一种体质酶, 由质粒介导,主要作用是水解红霉素及大 环内酯类抗生素结构中的内酯而使之失去 抗菌活性。
l (1)、取一列洁净无菌的小试管,各管分别 加营养肉汤1ml;
l (2)、第一管加入含1280 U/ml的抗菌药物原 液1ml,后倍比稀释至次末管后吸出1ml 弃去;
l (3)、各管分别加入试验菌液0.1ml; l (4)、置37℃孵箱中培养18~24h,观察结果。
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3、血药浓度与MIC之间的关系
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 当MIC小于血药浓度中治疗浓度的下限时, 则称为“敏感”,用“S”(Sensitive)表 示。
l 当MIC大于治疗浓度的上限时,则为“耐 药”,用“R”(Resistant)表示。
一、药敏试验的意义和目的
l 意义: l 大剂量、长疗程——造成对机体的伤害; l 小剂量、短疗程——诱发耐药菌株的产生。
l 因此,在使用抗菌药物的过程中,必须加强细菌 对抗菌药物敏感性的实验室监测,为临床上合理 使用抗菌药物提供试验依据。而细菌对抗菌药物 的敏感试验,就是对抗菌药物进行实验室监测的 主要手段之一。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 从本质上讲:细菌对某种抗菌药物是敏 感还是耐药,常以该抗菌药物的治疗浓 度(抗菌药物通过常用途径和常用剂量 所能达到的血药浓度)与该抗菌药物对 细菌的最小抑菌浓度(MIC)的关系而 定:
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 若某抗菌药物对某菌株的最小抑菌浓度 ( MIC ) 小 于 该 抗 菌 药 物 的 治 疗 浓 度 , 则为“敏感”(S, Sensitive);若某抗菌 药 物 对 某 菌 株 的 最 小 抑 菌 浓 度 ( MIC )
l 当MIC介于治疗浓度的上下限之间时,则 为“中介度”,用“I”(Intermediate) 表示。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 但是药物在局部组织和组织液中的浓度, 往往只有血清浓度的1/2~1/10,故在治疗 局部组织感染时,仅仅以MIC小于血清治 疗浓度定为敏感往往会产生一定的误差, 应该以MIC小于血清治疗浓度的2~10倍, 才是敏感。因此,在治疗局部组织或组织
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细菌对抗菌药物Βιβλιοθήκη Baidu敏感试验
l 三、细菌耐药性产生的机理
l 细菌的耐药性机理主要有生化机理和基因 机理两个方面:
l (一)、生化机理:
l 1、细菌产生破坏药物结构的酶
l 这一类的耐药细菌常常可以产生一种或多 种水解酶或钝化酶来水解或修饰进入细菌 细胞内的药物,使之失去生物活性。这是 引起细菌耐药性的最重要的机制,目前发 现和分离的钝化酶主要有以下4种:
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 目的:
l 1、为临床上治疗某个病人选择最佳抗菌 药物,指导临床用药,避免由于用药不 当,导致耐药菌株产生或造成人体伤害;
l 2、进行流行病学调查,了解致病菌的耐 药变迁情况,为医疗行政主管部门的决 策提供依据;
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 3、用于某些细菌的鉴别和鉴定:如 Optochin敏感试验、杆菌肽敏感试验和新 生霉素敏感试验,分别用于鉴定不同的 细菌;
局部组织或体液中的药物浓度
l IQ =
MIC
l 抑菌商数越大,抑菌效果越明显;反之, 抑菌商数越小,抑菌效果越差。
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三、细菌耐药性检测的常用方式
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细菌对抗菌药物的敏感试验
标准结果判读表
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细菌对抗菌药物的敏感试验
分界点的计算方法
l 选取一大群同种不同株的细菌做药敏试 验(至少选取100株,包括敏感菌株和耐 药菌株),求出该群细菌中每一菌株对 某抗菌药物的MIC及其相应的抑菌环直 径。因抗菌药物对细菌的MIC与其相应 的抑菌环直径呈负相关关系,据此可绘 制回归直线图。方法如下:
细菌对抗菌药物的敏感 试验
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2020/11/17
细菌对抗菌药物的敏感试验
第一节 细菌的耐药性监测
l 细菌的耐药性监测——药敏试验 l 概念:细菌对抗菌药物的敏感试验(简
称药敏试验)是测定某一菌株对某种抗 菌药物是敏感还是耐药的一种体外监测 试验。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l (1)β-内酰胺酶(β-Lactamase)。它是细 菌对β-内酰胺类抗菌药耐药的主要原因, 由于β-内酰胺酶的产生,使其β-内酰胺
环的酰胺键断裂而失去抗菌活性。该类
酶可以为染色体介导,也可为质粒介导。 Bush 根据底物及酶抑制剂的作用类型将 β-内酰胺酶分为4种,即A组β-内酰胺酶 (主要水解青霉素类),B组金属酶(其活 性部分是结合锌离子的硫醇),C组β-内 酰胺酶(主要水解头孢菌素类),D-组β-内 酰胺酶(苯唑西林水解酶)。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 2 、靶位的改变
l 由于抗菌药作用的靶位(如核糖体和核蛋 白)发生突变或被细菌产生的某种酶修饰 而使抗菌药物无法发挥作用,以及抗菌药 的作用靶位(如青霉素结合蛋白和DNA回 旋酶)结构发生改变而使之与抗生素的亲 和力下降,这种耐药机制在细菌耐药中普 遍存在。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l (1)、用试管稀释法分别检测某抗菌药 物对试验菌各菌株的MIC;
l (2)、用含一定量该抗菌药物的药敏纸 片,以扩散法分别测出(1)项中各菌株 相应的抑菌环直径;
l (3)、以MIC的对数(为计算方便,可 采取以2为底的对数)为纵坐标;以抑菌 环直径为横坐标,在坐标纸上绘制lgMIC 与抑菌环直径的散点图;
液感染选用抗菌药物时,一般治疗剂量, 至 少 应 该 是 抗 菌 药 物 对 病 原 菌 的 MIC 的 3~5倍。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 目前,临床上选择抗菌药物,常根据抑菌 商数来选择。
l 所谓“抑菌商数”(Inhibitory Quotient, 简称IQ),是指某抗菌药物在局部组织或 体液中的浓度除以该药物对感染菌的最小 抑菌浓度所得的商数。即:
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第二节 抗菌药物压力
一、抗菌药物压力 是细菌产生耐药的主要源动力。 1985年,著名学者McGowan指出了与医院 内细菌耐药性的出现相关的7个方面: (1)引起医院感染的微生物的耐药性比引 起社会感染的微生物的耐药性更多见; (2)医院中耐药菌株感染者使用的抗菌药 物比敏感株感染或定植者使用的抗菌药 物多;
l 4、影响细菌的代谢途径 l 这类抗菌药的代表就是磺胺类(Sulfonamides)。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 5、抑制核酸的合成
l 这类药物主要包括一些核苷酸的类似物,它们 可以插入到DNA或RNA链中,导致DNA或 RNA复制过程中的错配,而干扰其正常的功能。 另外一些药物,如喹诺酮(Quinolones)、氟 喹诺酮(Fluoroquinolones)可以特异性地抑制 DNA旋转酶的活性,抑制细菌DNA复制时的解 螺旋,导致DNA复制的受阻。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l (3)抗菌药物使用情况的变化会引起细菌耐药 情况的变化,如投入或停用某种抗菌药物常与其 耐药性的消长有关;
l (4)抗菌药物使用愈多的区域耐药菌分布愈多; l (5)抗菌药物应用时间越长耐药菌定植的可能
性越大;
l (6)抗菌药物剂量越大耐药菌定植或感染的机 会更多;
l 4、评价新抗菌药物的抗菌谱及抗菌活性 等药效学特性。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
二、 敏感和耐药的概念
l 一般认为,某菌株能被某种抗菌药物抑 制或杀灭,则该菌株对该抗菌药物敏感; 反之,则为耐药。
l 上述概念虽然考虑到了细菌对抗菌药物 的敏感性,但却忽略了药物的剂量、浓 度和机体的耐受性。
l (7)抗菌药物对自身菌群有影响并有利于耐药 菌生长。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
二、抗菌药物作用的基本机理
抗菌药的作用机理主要有以下5种
1、抑制细胞壁的合成
这些药物主要选择性作用于某些有细胞壁 的真菌、细菌,而对宿主本身没有毒性 作用。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
这些药物包括青霉素(Penicillins)、头孢 菌素(Cephalosporins)、万古霉素 (Vancomycin)、杆菌肽(Bacitracin)、 异烟肼(Isoniazid)、乙胺丁醇 (Ethambutol)等。它们主要通过抑制细 胞壁的主要成分——肽聚糖的合成,从
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 结果观察:含最小药物量仍呈明显不混 浊的一管所含的药物浓度即为该抗菌药 物 对 试 验 菌 株 的 最 小 抑 菌 浓 度 ( MIC ) 。
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2、血药浓度(血清中抗菌药 物的浓度)
l 在使用各类抗菌药物时,常常会遇到 的一个重要问题,就是血药浓度。例如: 口服抗菌药物总是经肠道逐渐吸收入血 的。因此,血液中的药物浓度是从无到 有随时间的延长逐渐增高的。即使静脉 注射抗菌药物,因存在着首过效应(第 一关卡效应)和肾脏的排泄作用,血药 浓度也是随着注射的次数而逐渐增高的。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 属于这一种作用机制的主要抗菌药包括 氨基糖苷类(Aminoglycosides),如链 霉素(Streptomycin)、阿米卡星 (Amikacin)、托普霉素(Tobramycin)、 庆大霉素(Gentamicin)等,它们主要作 用于核糖体的30 S亚基,改变它的形状, 导致mRNA不能被正常地翻译而引起蛋
大于该抗菌药物的治疗浓度,则为“耐 药”(R, Resistant);若MIC介于治疗 浓度的上下限之间,则为“中介度”(I, Intermediate)。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
1、MIC(Minimum inhibitory concentration)
l 所谓MIC,就是某抗菌药物对某菌株的最小抑 菌浓度。其测定方法是:
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l 3、破坏胞浆膜的完整性
l 这类抗菌药主要是一些抗真菌的药物, 如两性霉素B(Amphotericin B),它们 主要能够与细菌细胞胞浆膜上的一些磷 脂成分结合,破坏胞浆膜的完整性,从 而导致细胞的裂解。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
而引起细胞壁的通透性改变,大量水分 进入细胞浆中而引起细胞的裂解。
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l 2、抑制蛋白质的转录或合成
l 由于真核生物和原核生物核糖体的差异, 真核生物的核糖体主要是80 S,由60 S和 40 S两个亚基组成,而原核生物的核糖体 是70 S,主要由30 S和50 S两个亚基组成。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l (2)氨基糖苷类钝化酶。细菌对氨基糖苷 类 (Aminoglycosides)抗生素产生耐药性的
最重要的原因就是产生了对这一类药物的
共价修饰酶。这些酶通过磷酸化、乙酰化
和腺苷酸化等途径对其进行修饰而使其灭
活。目前,这一类的共价修饰酶主要有磷 酸转移酶(O-phosphotransferases, APHs), 腺苷酸转移酶(O-adenyltransferases, ANTs)和N-乙酰转移酶(Nacetyltransferases,AACs)3类。现在已经 对这些酶的晶体结构有了清楚的研究。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l (3)氯霉素乙酰转移酶。此酶为一种胞内 酶,早在1987年,Lyon等就确定此酶由质 粒或染色体或转座子基因编码,主要作用 是使氯霉素类抗生素转化为无抗菌活性的 代谢物。
l (4)红霉素酯化酶。此酶是一种体质酶, 由质粒介导,主要作用是水解红霉素及大 环内酯类抗生素结构中的内酯而使之失去 抗菌活性。
l (1)、取一列洁净无菌的小试管,各管分别 加营养肉汤1ml;
l (2)、第一管加入含1280 U/ml的抗菌药物原 液1ml,后倍比稀释至次末管后吸出1ml 弃去;
l (3)、各管分别加入试验菌液0.1ml; l (4)、置37℃孵箱中培养18~24h,观察结果。
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3、血药浓度与MIC之间的关系
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 当MIC小于血药浓度中治疗浓度的下限时, 则称为“敏感”,用“S”(Sensitive)表 示。
l 当MIC大于治疗浓度的上限时,则为“耐 药”,用“R”(Resistant)表示。
一、药敏试验的意义和目的
l 意义: l 大剂量、长疗程——造成对机体的伤害; l 小剂量、短疗程——诱发耐药菌株的产生。
l 因此,在使用抗菌药物的过程中,必须加强细菌 对抗菌药物敏感性的实验室监测,为临床上合理 使用抗菌药物提供试验依据。而细菌对抗菌药物 的敏感试验,就是对抗菌药物进行实验室监测的 主要手段之一。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 从本质上讲:细菌对某种抗菌药物是敏 感还是耐药,常以该抗菌药物的治疗浓 度(抗菌药物通过常用途径和常用剂量 所能达到的血药浓度)与该抗菌药物对 细菌的最小抑菌浓度(MIC)的关系而 定:
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 若某抗菌药物对某菌株的最小抑菌浓度 ( MIC ) 小 于 该 抗 菌 药 物 的 治 疗 浓 度 , 则为“敏感”(S, Sensitive);若某抗菌 药 物 对 某 菌 株 的 最 小 抑 菌 浓 度 ( MIC )
l 当MIC介于治疗浓度的上下限之间时,则 为“中介度”,用“I”(Intermediate) 表示。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 但是药物在局部组织和组织液中的浓度, 往往只有血清浓度的1/2~1/10,故在治疗 局部组织感染时,仅仅以MIC小于血清治 疗浓度定为敏感往往会产生一定的误差, 应该以MIC小于血清治疗浓度的2~10倍, 才是敏感。因此,在治疗局部组织或组织
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l 三、细菌耐药性产生的机理
l 细菌的耐药性机理主要有生化机理和基因 机理两个方面:
l (一)、生化机理:
l 1、细菌产生破坏药物结构的酶
l 这一类的耐药细菌常常可以产生一种或多 种水解酶或钝化酶来水解或修饰进入细菌 细胞内的药物,使之失去生物活性。这是 引起细菌耐药性的最重要的机制,目前发 现和分离的钝化酶主要有以下4种:
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 目的:
l 1、为临床上治疗某个病人选择最佳抗菌 药物,指导临床用药,避免由于用药不 当,导致耐药菌株产生或造成人体伤害;
l 2、进行流行病学调查,了解致病菌的耐 药变迁情况,为医疗行政主管部门的决 策提供依据;
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 3、用于某些细菌的鉴别和鉴定:如 Optochin敏感试验、杆菌肽敏感试验和新 生霉素敏感试验,分别用于鉴定不同的 细菌;
局部组织或体液中的药物浓度
l IQ =
MIC
l 抑菌商数越大,抑菌效果越明显;反之, 抑菌商数越小,抑菌效果越差。
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三、细菌耐药性检测的常用方式
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标准结果判读表
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细菌对抗菌药物的敏感试验
分界点的计算方法
l 选取一大群同种不同株的细菌做药敏试 验(至少选取100株,包括敏感菌株和耐 药菌株),求出该群细菌中每一菌株对 某抗菌药物的MIC及其相应的抑菌环直 径。因抗菌药物对细菌的MIC与其相应 的抑菌环直径呈负相关关系,据此可绘 制回归直线图。方法如下:
细菌对抗菌药物的敏感 试验
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细菌对抗菌药物的敏感试验
第一节 细菌的耐药性监测
l 细菌的耐药性监测——药敏试验 l 概念:细菌对抗菌药物的敏感试验(简
称药敏试验)是测定某一菌株对某种抗 菌药物是敏感还是耐药的一种体外监测 试验。
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l (1)β-内酰胺酶(β-Lactamase)。它是细 菌对β-内酰胺类抗菌药耐药的主要原因, 由于β-内酰胺酶的产生,使其β-内酰胺
环的酰胺键断裂而失去抗菌活性。该类
酶可以为染色体介导,也可为质粒介导。 Bush 根据底物及酶抑制剂的作用类型将 β-内酰胺酶分为4种,即A组β-内酰胺酶 (主要水解青霉素类),B组金属酶(其活 性部分是结合锌离子的硫醇),C组β-内 酰胺酶(主要水解头孢菌素类),D-组β-内 酰胺酶(苯唑西林水解酶)。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 2 、靶位的改变
l 由于抗菌药作用的靶位(如核糖体和核蛋 白)发生突变或被细菌产生的某种酶修饰 而使抗菌药物无法发挥作用,以及抗菌药 的作用靶位(如青霉素结合蛋白和DNA回 旋酶)结构发生改变而使之与抗生素的亲 和力下降,这种耐药机制在细菌耐药中普 遍存在。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l (1)、用试管稀释法分别检测某抗菌药 物对试验菌各菌株的MIC;
l (2)、用含一定量该抗菌药物的药敏纸 片,以扩散法分别测出(1)项中各菌株 相应的抑菌环直径;
l (3)、以MIC的对数(为计算方便,可 采取以2为底的对数)为纵坐标;以抑菌 环直径为横坐标,在坐标纸上绘制lgMIC 与抑菌环直径的散点图;
液感染选用抗菌药物时,一般治疗剂量, 至 少 应 该 是 抗 菌 药 物 对 病 原 菌 的 MIC 的 3~5倍。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 目前,临床上选择抗菌药物,常根据抑菌 商数来选择。
l 所谓“抑菌商数”(Inhibitory Quotient, 简称IQ),是指某抗菌药物在局部组织或 体液中的浓度除以该药物对感染菌的最小 抑菌浓度所得的商数。即:
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第二节 抗菌药物压力
一、抗菌药物压力 是细菌产生耐药的主要源动力。 1985年,著名学者McGowan指出了与医院 内细菌耐药性的出现相关的7个方面: (1)引起医院感染的微生物的耐药性比引 起社会感染的微生物的耐药性更多见; (2)医院中耐药菌株感染者使用的抗菌药 物比敏感株感染或定植者使用的抗菌药 物多;
l 4、影响细菌的代谢途径 l 这类抗菌药的代表就是磺胺类(Sulfonamides)。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 5、抑制核酸的合成
l 这类药物主要包括一些核苷酸的类似物,它们 可以插入到DNA或RNA链中,导致DNA或 RNA复制过程中的错配,而干扰其正常的功能。 另外一些药物,如喹诺酮(Quinolones)、氟 喹诺酮(Fluoroquinolones)可以特异性地抑制 DNA旋转酶的活性,抑制细菌DNA复制时的解 螺旋,导致DNA复制的受阻。
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l (3)抗菌药物使用情况的变化会引起细菌耐药 情况的变化,如投入或停用某种抗菌药物常与其 耐药性的消长有关;
l (4)抗菌药物使用愈多的区域耐药菌分布愈多; l (5)抗菌药物应用时间越长耐药菌定植的可能
性越大;
l (6)抗菌药物剂量越大耐药菌定植或感染的机 会更多;
l 4、评价新抗菌药物的抗菌谱及抗菌活性 等药效学特性。
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二、 敏感和耐药的概念
l 一般认为,某菌株能被某种抗菌药物抑 制或杀灭,则该菌株对该抗菌药物敏感; 反之,则为耐药。
l 上述概念虽然考虑到了细菌对抗菌药物 的敏感性,但却忽略了药物的剂量、浓 度和机体的耐受性。
l (7)抗菌药物对自身菌群有影响并有利于耐药 菌生长。
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二、抗菌药物作用的基本机理
抗菌药的作用机理主要有以下5种
1、抑制细胞壁的合成
这些药物主要选择性作用于某些有细胞壁 的真菌、细菌,而对宿主本身没有毒性 作用。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
这些药物包括青霉素(Penicillins)、头孢 菌素(Cephalosporins)、万古霉素 (Vancomycin)、杆菌肽(Bacitracin)、 异烟肼(Isoniazid)、乙胺丁醇 (Ethambutol)等。它们主要通过抑制细 胞壁的主要成分——肽聚糖的合成,从
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 结果观察:含最小药物量仍呈明显不混 浊的一管所含的药物浓度即为该抗菌药 物 对 试 验 菌 株 的 最 小 抑 菌 浓 度 ( MIC ) 。
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2、血药浓度(血清中抗菌药 物的浓度)
l 在使用各类抗菌药物时,常常会遇到 的一个重要问题,就是血药浓度。例如: 口服抗菌药物总是经肠道逐渐吸收入血 的。因此,血液中的药物浓度是从无到 有随时间的延长逐渐增高的。即使静脉 注射抗菌药物,因存在着首过效应(第 一关卡效应)和肾脏的排泄作用,血药 浓度也是随着注射的次数而逐渐增高的。
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细菌对抗菌药物的敏感试验
l 属于这一种作用机制的主要抗菌药包括 氨基糖苷类(Aminoglycosides),如链 霉素(Streptomycin)、阿米卡星 (Amikacin)、托普霉素(Tobramycin)、 庆大霉素(Gentamicin)等,它们主要作 用于核糖体的30 S亚基,改变它的形状, 导致mRNA不能被正常地翻译而引起蛋
大于该抗菌药物的治疗浓度,则为“耐 药”(R, Resistant);若MIC介于治疗 浓度的上下限之间,则为“中介度”(I, Intermediate)。
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1、MIC(Minimum inhibitory concentration)
l 所谓MIC,就是某抗菌药物对某菌株的最小抑 菌浓度。其测定方法是: