血凝和血凝抑制试验的注意事项及操作方法
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禽流感及新城疫血凝、血凝抑制试验中红细胞洗涤注意事项(原创)
血凝、血凝抑制试验中红细胞作为反应体系中重要成份,其洗涤处理过程直接影响试验结果的准确性,所以在试验时一定要规范操作最大限度地减少误差。
1、待洗涤的红细胞应来自3只以上的SPF鸡或无新城疫、无禽流感抗体的健康公鸡,采后不宜保存过久;
2、用于红细胞洗涤的PBS应严格按操作规程的配方准确称量,并于灭菌后准确测定并校正PH值至7.2,不同PH值下测定的HA和HI价结果会有所不同;
3、洗涤红细胞时切记吹吸红细胞及注入PBS液时应尽量轻柔,切忌用力,否则红细胞会破裂造成溶血,影响试验结果;
4、红细胞在三次洗涤过程中均应严格按规定转数离心,不同转数离心红细胞,红细胞的压积是不同的,会直接影响配制的红细胞浓度;
5、在洗涤红细胞过程中,每次离心后均应将白细胞层等吸除干净,否则会影响最后配制的红细胞的浓度,造成结果不准确。
6、洗涤好的红细胞称量体积时一定要准确,严格按操作规程规定的1%浓度进行配制。
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