辅助生殖ppt讲义
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三.人工授精 (artificial insemination)
w 概念:应用非性交的方法,将精子置入
女性生殖道内,让精子与卵子自然结合, 以达到妊娠的目的而实施的检测治疗措 施。 w (1)自体人工授精(AIH)。 w (2)异体人工授精(AID)。
人工授精适应证
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常用的精子优选技术
w 上游法 w Percoll密度梯度离心法
w 玻璃纤维过滤法
w 血清白蛋白过滤法
二.X和Y精子的分离
w 概述:目前已知约400多种遗传病是伴随
X染色体的遗传病,通过X和Y精子分离 技术及IVF—ET,可获得健康后代。
例如:X连锁显性遗传病
w w
常见病种:抗维生素D佝偻病、遗传性肾炎、先天性眼 球震颤、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症等。 指导原则: (1)病残儿一、二级亲属无病时,可能是基因突变所 致,再发风险低,可考虑再生育。 (2)病残儿母亲患病时,每胎子女各有50%机会患病, 再发风险高,不宜生育。 (3)病残儿的父亲患病时,每胎女性均患病,男性则 全部正常。经产前诊断可考虑生育男性胎 儿。 ——《病残儿鉴定指南》
Sephadex G50法
w 原理:X精子头部长,宽径大于Y精子;
采用Sephadex G50滤过,分子筛作用可 将其分离。
密度梯度离心法
w 原理:X、Y精子在分离介质中的沉降速
度不等。
流式细胞仪分选法
w 原理:单个细胞悬液,经特异的活体细
胞染色后放入样品管中,流经流动室时, 仪器可对符合分选特性的细胞充电,再 经高压静电场时发生偏转,进入指定的 收集器。
AIH适应证: 男性 (1)正常性交时精子不能进入女性生殖道的病症 (2)精液质量异常 (3)某些免疫性不育 (4)生殖保险 女性 (1)生殖道解剖结构异常 (2)生殖道生理功能异常 (3)免疫因素
w AID适应证 w (1)无精子症
w (2)严重的少、弱精子症
w (3)男方患有某些不便生育的遗传性疾
生物的两大特性
w生存
w种系繁衍
辅助生殖技术的主要内容:
w 人类精子优选技术 w X和Y精子的分离技术
w 人工受精技术
w 体外受精—胚胎移植技术 w 显微授精技术 w 胚胎冷冻复苏技术
一.人类精子优选技术
w 目的:在体外通过人工方法对精液进行
处理,去除精浆及所含的有害物质,选 择形态正常、活动力强的精子,病使精 子在体外获能。 w 精液的收集及检验
w X和Y精子的差异:精子膜表面电荷,核
及形态学差异,PH敏感性, Y精子的乳 酸脱氢酶,H-Y抗原,精子密度,泳动速 度,运动性,DNA含量差异,奎丫因荧 光染色,流式细胞仪,PCR,荧光原位 杂交。
常用方法
w 上游法 w 白蛋白柱分离法
w 电泳法
w Sephadex
G50法 w 密度梯度离心法 w 流式细胞仪分选法
改良上游法
w 原理:Y精子在培养液(Ham,s
F-10)中
比X精子泳动快,密度低。
白蛋白柱分离法
w
原理:X和Y精子在白蛋白中泳动速度不 等,Y精子速度快,穿透粘稠的白蛋白溶 液能力强,在较高浓度的白蛋白溶液层 中可获得更多的Y精子。
电泳法
w 原理:精子膜表面因含大量的唾液酸而
使精子带负电荷,X和Y精子表面负电荷 量不等,在电场中可将其分离。
病 w (4)免疫因素
人工授精时间选择
w w
源自文库
时间:女方围产卵期(排卵前日,当日,后日) 常用检测指标: 1.基础体温(basal body temperature BBT); 2.宫颈黏液检测,(1)宫颈黏液拉丝实验。(2)宫颈 黏液结晶实验。 3.激素测定,(1)雌激素E2(2)孕酮(3)FSH、LH 4.超声检查
辅助生殖技术
Assisted reproductive technology
w 成都市计划生育技术指所男性科
高坪
常用专业术语
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Assisted reproductive technology ,ART azoospermia basal body temperature ,BBT biological freezer blastocyst capacitation computer-assisted sperm analysis,CASA cryoprotectant glass wool filtration human embryo cryopreservation
辅助生殖技术 无精子症 基础体温 生物冷冻仪 囊胚 获能 计算机辅助精子分析 冷冻保护剂 玻璃纤维过滤 人类胚胎冷冻
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Human sperm bank 人类精子库 human spermatozoa selection technology 人类精子优选技术 intracytoplasmic sperm injection,ICSI 精子卵浆内注射 in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET 体外受精胚胎移植 male infertility syndrome 男性不育综合征 oocyte-corona-cumulus complexes,OCCCs 卵-冠-丘复合体 partial zona dissection,PZD 部分透明带切割法 post-coital test,PCT 性交后试验 swim-up 上游法 zona drilling 透明带钻孔法 zygote 受精卵 zygotene 偶线期
人工授精的实施
w w
设备和器才 人工授精技术: (1)经阴道授精(intravaginal insemination ,IVI) (2)经宫颈授精(intracervical insemination,ICI) (3)经子宫授精(intrauterine insemination,IUI) (4)经输卵管授精(intratubal insemination,ITI) (5)经腹腔授精(intraperitoneal insemination,IPI) (6)直接卵泡内授精(direct intrafollicular insemination,DIFI)