实验五新生儿溶血病PPT课件

释放试验结果判断
ABO-HDN放散试验结果判断
酶处理Ac 酶处理Bc 酶处理Oc 意
义
+
-
- 释放出IgG抗A抗体
-
+
- 释放出IgG抗B抗体
+
+
- 释放出IgG抗A、抗B
抗体或抗A，B抗体
+/-
+/-
+ 释放出ABO血型系统
以外抗体（加做谱细胞）
-
-
-
未释放出抗体
• 只有当放散液中检出相应抗体，同时新生儿RBC上又存在对应抗原时才认 为释放试验是阳性。
酶A管 50μl 酶B管 酶O管
•
酶处理BC 50μl
酶处理OC 50μl
放散液
25μl 25μl 25μl
酶处理 1 2 3
Rh-HDN放散试验 1号细胞 2号细胞 50μl
50μl
3号细胞 50μl
放散液
25μl 25μl 25μl
37℃孵育15min，以1030rpm离心10min。观察结果。
实验五 新生儿溶血病
（Hemolytic disease of the newborn， HDN ）
新生儿溶血病的定义
• HDN是指因母、婴血型不合而引起的胎儿 或新生儿同种免疫性溶血，出现黄疸、贫 血、水肿、肝脾肿大，甚至死胎、新生儿 死亡等溶血病的症状和合并症。
HDN的分类
• ABO-HDN • Rh-HDN • 其他血型系统-HDN
Rh血型同母亲
AB型血浆 ABO血型同婴儿型或O型血
新生儿溶血病检测的方法及原理
• 新生儿ABO及Rh血型鉴定
• “三项试验” ：
•
直抗试验
游离试验
释放试验
实验方法
• 1、准备：离心分离血清和RBC，生理盐水洗 涤RBC3次，取少量RBC配成3~5％的RBC 悬液。血清和洗好的压积RBC备用。
• 2、新生儿ABO及Rh血型鉴定:试管法。
生理盐水 1份
56℃水浴 轻摇7分钟 立即离心
上清液即 为
放散液
• 2.乙醚放散：
1份RBC 1份盐水 2份乙醚
振摇1min（排气） 离心3min
上层乙醚 中层RBC基质 下层放散液
吸管吸出放散液，置37℃水浴中 30min，除尽乙醚，然后鉴定抗体。
放散液中抗体的检测（卡法）
• ABO-HDN放散试验 酶处理AC
• 3、直接抗球蛋白试验:
3~5%RBC 1滴 抗球蛋白试剂2滴
3000rpm 离心15s
凝集：阳性
无凝集
加阳性对 照细胞
凝集：阴性
无凝集：抗 球蛋白试剂 失效
游离试验
■原理 检测新生儿血清中是否存在针对 新生儿RBC血型抗原的IgG血型抗体。
检测出
A型－－－抗A B型－－－抗B AB型－－－抗A、抗B或抗A、B Rh阳性－－－抗D。
ABO-HDN游离试验结果判断
Ac Bc Oc
意义
+- -
存在游离的抗A抗体
- +-
存在游离的ห้องสมุดไป่ตู้B抗体
++-
存在游离的抗A、抗B抗体或抗A、B抗体
+/- +/- +
存在游离的ABO血型系统以外抗体
-- -
没有游离抗体
• 只有当血清中检出相应抗体，同时新生儿RBC上又存在对应抗原时才认为游离 试验是阳性。
游离试验（抗球蛋白卡法）
ABO-HDN游离试验
A型RBC B型RBC O型RBC
Ac管 50μl
Bc管
50μl
Oc管
50μl
婴儿血清 25μl 25μl 25μl
Rh-HDN游离试验
1号细胞 2号细胞 3号细胞 婴儿血清
1
50μl
25μl
2
50μl
25μl
3
50μl
25μl
37℃孵育15min，以1030rpm离心10min。观察结果。
ABO-HDN和Rh-HDN的区别
ABO-HDN
Rh-HDN
病因
ABO血型不和
Rh血型不和
母亲血型 O型多见
Rh阴性
婴儿血型 A、B、AB型
Rh阳性
发病率
3-5%
较低
免疫刺激 不需
孕产史、输血史
首发胎数 第一胎
第二胎（外祖母学说除外）
直抗
-～1+
1+以上
放散液制备 冷冻、热放散
乙醚放散
换血治疗 O型RBC
• Rh-HDN游离试验结果判断：任何一管出现凝集则 血清中存在不规则抗体（抗－D?进一步做抗体鉴 定)。3管均不出现凝集则血清中不存在不规则抗体。
放散试验
• 原理 利用特殊的方法将致敏在新生儿 红细胞上的抗体放散下来，然后再检 测放散液中的抗体。
放散液制备
• 1.热放散
取洗涤压积RBC
1份（1ml左右） +
• Rh-HDN放散试验结果判断：任何一孔出现凝集则放散出不规 则抗体（抗－D？抗体鉴定)。3孔均不出现凝集则没有放散出 不规则抗体 。
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
谢谢你的到来
学习并没有结束，希望大家继续努力
Learning Is Not Over. I Hope You Will Continue To Work Hard
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日