培养基练习灌装方案

******药业有限公司验证方案

****生产线培养基灌装

小组主要成员及职责

根据《确认与验证管理规程》规定，组织成立***培养基灌装验证小组，验证小组成员及职责如下表：

一、概述5

1.验证原因5

2.验证原理5

二、验证目的5

三、参考文件6

1.参考标准6

2.公司规程6

四、风险评估6

五、验证范围13

六、验证计划13

七、方案培训13

八、验证可接受标准13

九、验证内容14

1.配制14

2.冷藏、除菌过滤15

3.洗瓶15

4.灌封错误！未定义书签。

5.环境及人员卫生监测（动态）17

6.培养18

7.培养基灌装后清洁确认错误！未定义书签。

十、漏项与偏差处理20

十一、再验证周期20

十二、确立文件20

十三、附件21

附件1：错误！未定义书签。

一、概述

1.验证原因

公司****按照2010版GMP附录1《无菌药品》的要求进行设计，洁净区级别分为A级、B级、C、级、D级，该线用于小容量注射剂非最终灭菌产品（****）生产使用。

现按2010版GMP附录1要求对**生产线进行产品培养基灌装验证，以考察该线的无菌保证水平。本次为第四次培养基模拟灌装（上次验证报告编号R.4-001/2015），故只进行一个批次的验证活动。

验证关键生产工艺流程图如下：

将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。

3.验证的先决条件

参与培养基验证的人员经过培训。

涉及培养基灌装实验使用的配液系统、冷藏系统、除菌过滤系统、灌封系统、洗瓶机、杀菌干燥机、空调系统、水系统、压缩空气系统、纯蒸汽系统、脉动真空灭菌器均确认合格。

用于培养基灌装实验使用培养基具备合格报告。

涉及培养基灌装实验使用的配液系统、冷藏系统、除菌过滤系统、灌封系统、洗瓶机、容器具清洁验证均合格。

用于培养基灌装实验使用设备、系统清洁检查工程的检验方法验证合格，取样方法验证合格。

各关键设备、系统及方法验证报告见附件1.

二、验证目的

1.通过该工艺验证活动证明小容量注射剂生产线（三）采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求；

2.通过该工艺验证活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险；

3.通过该工艺验证活动确保生产符合现行GMP法规要求。

三、参考文件

1.参考标准

2.公司规程

运用失效模式风险管理工具，对培养基模拟灌装进行风险评估，确认本次验证活动主要工程及验证重点。

1.风险评估标准

经风险评估，共计风险项15项，低风险项2项，中风险项4项，高风险项9项，极高风险项0项。按风险评估结果进行本次培养基灌装验证活动，并确认所采取的风险控制措施有效。

根据风险评估确认的验证工程涉及的验证条件如下：

3.1培养基选择

首先培养基支持微生物生长的菌谱范围应宽，能促进革兰氏阳性、革兰氏阴性、酵母菌和霉菌的生长；其次培养基应澄明，便于观察由于污染导致的混浊和沉淀现象。

我公司已确定该生产线只用于参附注射液、生脉注射液的生产，该两个品种均不充氮，故培养基选取需氧培养基（大豆胰蛋白胨肉汤培养基）。

在培养结束后进行微生物促生长挑战实验。根据我公司历年对环境监控和无菌检查中发现的菌均为普通菌，因此培养微生物促生长挑战实验选取药典规定菌种。促菌生长实验的接种量应不超过 100CFU。如促生长实验失败，应进行调查并重复培养基灌装实验。

3.2运行实验次数及频率

根据《药品GMP指南》（无菌药品）要求，生产线初始验证时，培养基灌装应进行至少3批次，以确保结果的一致性和有效性。初次验证后，为了评估无菌工艺的受控情况，每条生产线的培养基灌装每半年应进行一次，因本次为再验证故只进行一批次验证。

3.3规格选择

***生产线可进行10ml、20ml规格的生产，初次验证时进行两次最大规格容器（20ml）和一次最小规格容器（10ml）的灌装挑战。在以后的周期性半年度灌装可以轮换，每次挑战一种规格，本次验证10ml 规格。

3.4运行持续时间

根据《药品GMP指南》（无菌药品）要求，培养基灌装操作的持续时间是方案设计时必须考虑的重要问题。尽管最准确方法是模拟全批量及全批量的操作时间，因为它最能反映实际生产运行，但也可有其它合理并适当的模式。持续时间并不一定与一个完整批的实际生产操作时间相同。

根据我公司情况一批次灌封生产的最长时间为不超过****小时，综合考虑生产操作、各种干扰模式、实际无菌操作情况，决定本次培养基灌装操作的持续时间为**小时/批。

3.5干扰设计/最差条件设计

培养基灌装必须模拟所有正常生产中的活动，体现最差条件的原则,如下表：

根据经验每只容器的灌装体积不少于总容积的1/3，同样，灌装体积也不宜过大既要考虑到瓶倒转或旋转时，培养基能充分接触到容器和密封件的内表面，又要保证容器内有足够的氧气支持微生物生长。本次培养基每支灌装体积按10.5ml灌装。

3.7运行速度

小容量生产线（三）可进行10ml、20ml规格的生产，各规格灌封速度为20ml规格＜10ml规格。各规格灌封速度均固定，故本次培养基灌装速度，按规格对应速度执行。

3.8.1我公司参附注射液批量