急性毒性

最大染毒尚不足以充分了解其急性毒性作用的特性，
从而在24h内多次染毒。
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2.中毒效应出现的时间/特征
急性毒性效应一般是指机体接触化学 物后，在较短时间内观察到的毒性症状。 迟发性神经毒性 观察时间：一般为14天，如有必要可 延长至14天以上。
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2、试验目的
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A 经口（胃肠道）染毒
新化学物毒性评价的必经之路，一般以经口
途径的LD50值来比较不同化学物急性毒性大小。
分为灌胃、喂饲、吞咽胶囊等方式。
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•经口灌胃染毒：
是实际工作中急性毒性试验中 最主要、最常用的染毒途径。
优点：剂量准确；
缺点：工作量大，有误入气管
和损害食管的可能。
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烙印法：
将铸铁号码加热后，在动物体表部位烧烙，以 破坏毛囊，留下印记。适用于大动物。 挂牌法： 用金属或塑料制成号牌，固定在动物的耳部或 系于其颈部。适用于较大动物。
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实验动物分组
目的：减少个体差异对实验结果的影响；原则：
按统计学原则随机分组，使非处理因素最大限度
地保持一致，提高每组实验动物间的均衡性。
以头部为1号，顺时针方向依次从右耳、右前肢、右
后肢、颈部、背中、尾根、左耳、左前肢、左后肢 染色，分别为2～10号。
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染色法
优点：
简单方便，不痛苦，无损伤。 缺点： 时间较长时，染色剂易褪色； 标记容易模糊不清。
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耳缘孔口法： 在耳缘先用针穿孔和用剪刀剪口，再用酒精墨 汁涂抹，使黑色渗入孔口，伤口愈合后不易脱 落，这种标号亦可标号１～９９。 适用于大、小鼠。
（3）动物数量
（4）标记和分组
（5）禁食
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（3） 动物数量

动物数量：小动物4～6组，每组至少10只；犬 等大动物每组6只。

性别：雌雄各半，也有例外，如，致畸试验的 剂量准备，只作雌性动物LD50。

年龄：刚成年，未曾受孕、交配
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（4）实验动物的标记与分组
染色法
耳缘孔口法
烙印法 挂牌法
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20只小鼠按随机区组设计分组表
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随机分配到各组的动物
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二、急性毒性试验设计 （一）经典急性毒性试验(LD50测定法) 的试验设计 1、实验动物的选择
2、实验动物的喂养环境
3、实验动物的染毒途径 4、剂量选择及分组 5、试验期限及观察指标 6、LD50的计算
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二、急性毒性试验设计
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喂饲：
将受试物掺入动物饲料或水中供 实验动物自行摄入。 优点：符合人类接触许多化学物
的实际情况，染毒方便；
缺点：剂量误差大、
适口性差、
影响动物摄食和生长发育
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吞咽胶囊：
将一定量的受试物装入胶囊中，放至舌 后部，迫使其咽下。 适用于有异味、易挥发、易水解的物质。 多用于犬、猴的给药

阐明化学毒物对机体的急性毒性大小和强度。 (半数致死量，LD50/LC50)

了解外源化学物毒作用的性质、特征及可能的靶器官，初 步评价其危险性。

探求毒物的剂量-反应(效应)关系，为进一步试验时设计染 毒剂量和选择观察指标提供参考。

初步了解动物致死原因，为研究毒作用的机制提供线索和
制定中毒急救治疗措施提供依据。
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第一节 急性毒性试验
基本概念与试验目的
一． 二． 三．
急性毒性试验设计
急性毒性试验评价
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二、急性毒性试验设计 （一）经典急性毒性试验(LD50测定法) 的试验设计 1、实验动物的选择 2、实验动物的喂养环境 3、受试物的处理与染毒途径 4、剂量选择及分组
5、试验期限及观察指标
6、LD50的计算
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染色法
用不同颜色的染料涂擦于动物不同部位来 表示不同号码，适用于大鼠、小鼠和豚鼠。 常用染料： 3％～5％苦味酸酒精饱和液，呈黄色； 甲基紫酒精饱和液，呈紫色； 0.5％中性红或品红溶液，呈红色等。
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实验动物的标记
方法一：
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按右前肢、右肋、右后肢、颈部、背中、尾根、左
前肢、左肋、左后肢，顺序编号为1～9号，不染色 为10号。在动物相同部位涂染另一种颜色染料表示 十位，两种颜色可编1～99号。 方法二：
BALB/c-nu裸小鼠
兔
SD大鼠
金黄仓鼠
豚鼠
非啮齿类动物：
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犬
猴
猪
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首选哺乳动物
哺乳动物中首选大鼠、小鼠
若规定用两种物种：啮齿类：大鼠、小鼠 非啮齿类：犬或猴 根据不同接触途径，选择不同的物种
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（2）个体选择
健康、性别、年龄
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（1）物种和品系选择
（2）个体选择
优点：设备简单、操作方便、受试物消耗量少。
缺点：氧分压下降，柜内受试物浓度逐渐下降，
可能经皮吸收；
不适合较大动物和挥发性不强的受试物。
100 L染毒柜可供大鼠1~2 只，小鼠12~15 只，呼吸2 h
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b. 动式吸入染毒
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b.动式吸入染毒
由染毒柜、机械通风、配气系统三大部分组成 分类： 1.动式吸入染毒：
-----微生物学等级和饲养环境
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二、急性毒性试验设计
（一）经典急性毒性试验(LD50测定法) 的试验设计
1、实验动物的选择 2、实验动物的喂养环境 3、受试物处理与染毒途径 4、剂量选择及分组 5、试验期限及观察指标 6、LD50的计算
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3. 受试物处理及染毒途径
试验前应对受试物的化学结构、纯度、杂质 成分、理化性质特别是挥发性、溶解性等进行全 面了解。
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随机区组设计
将动物称重，按体重顺序依次排列编号，分成若干个区组， 每一区组的动物体重相近，每一区组的动物数即为组数。
再从随机数字表上任意抄下随机数字，依次标在每个动物
的编号下，如欲将动物分为４组，则将每一区组动物编号 下的随机数字，按顺序分别用４、３、２、１除之，根据 余数大小将动物分入各组。

较少采用此法。
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C. 经皮肤染毒
常用于评价农药、化妆品、外用药物、工业 毒物、环境污染物等。 理论上应采用小型猪、家兔或豚鼠，但出于 经济原因，一般使用大鼠。
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1） 经皮肤吸收研究

动物选择：
皮肤解剖、生理特征与人相近的豚鼠、家兔或小型猪。

① 定性试验
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第六章 毒物的一般毒性作用及其评价

第一节 急性毒性试验


第二节 蓄积毒性试验
第三节 亚慢性和慢性毒性试验
2
第一节 急性毒性试验
一．
基本概念与试验目的
二．
三．
急性毒性试验设计
急性毒性试验评价
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一、概念与目的 1、基本概念
急性毒性(acute toxicity)：指人或动物一次或于
24h之内多次接触外源化学物后，在短期内所发
（一）经典急性毒性试验(LD50测定法) 的试验设计
2、实验动物的喂养环境
温度：大小鼠22±3℃，家兔20±3℃，
相对湿度：30%~70%。 饲养密度：10只小鼠1.0~1.5 m3，10只大鼠2~3m3 每只兔至少1m3 光 照：人工昼夜（12h白昼，12 h黑夜）
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----实验动物的选择
浸尾试验：一般大鼠尾部浸两小时 兔耳法：观察双侧兔耳变化

② 定量试验
在试验动物脱毛部位定量涂布受试化合物，以求出经
皮接触的剂量-反应关系。
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脱毛方法：

化学法：脱毛剂

硫化钡＋滑石粉 １:４ 硫化钠＋淀粉 １:４

机械法：剪剃去毛

脱毛部位：

兔、豚鼠 大鼠
背部中线两侧 尾部、背部中央或腹部
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工业化学物：经皮肤和呼吸道
农用化学物：经口、经皮肤和呼吸道


药品：经口和注射
食品：经口

环境污染物：经口、皮肤和呼吸道
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吸收速率：
静脉注射>吸入>肌内注射>腹腔注射>经口
>皮下注射>经皮
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最常用的染毒途径：
经口、经呼吸道、经皮肤。 特殊情况下，经注射途径。
数据来源：
（1）生产厂家
（2）检索与受试物化学结构和理化性质相似的
化学物的毒性资料
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受试物的成分、配方应稳定不变： 一般为新鲜配臵（除非是很稳定的）： 水溶性：蒸馏水或去离子水 注射用：生理盐水
脂溶性：色拉油、玉米油、0.5％羧甲基纤维素钠
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染毒途径
染毒途径的选择原则： 模拟人在生活和生产环境中实际接触该受 试物的途径和方式； 有利于不同化学物急性毒性大小的比较； 受试物的性质和用途； 各种受试物毒性评价程序的要求等。
生的毒性效应，包括致死效应。 急性毒性试验(acute toxicity test)：用于评价受 试物急性毒性的试验。
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（二）需注意的几个问题：
1.急性接触
一次：在经口、经注射途径染毒时，是指瞬间给
予实验动物染毒；
对于经皮、经呼吸道染毒，则是指在一段规定时
间内使实验动物持续接触毒物；
多次（24h内）：当外源化学物毒性很低时，一次
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B 经呼吸道染毒
常用于研究生产条件下以气体、蒸汽、粉 尘、烟、雾等形式存在的工业毒物，环境空气污 染物，以吸入为给药途径的药物。 染毒方式分为吸入染毒和气管内注入；
吸入又分为静式和动式吸入染毒。
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ห้องสมุดไป่ตู้
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a. 静式吸入染毒
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a. 静式吸入染毒
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1.实验动物的选择
实验动物的选择
种属和品系
性别、年龄、体重
微生物学等级
动物数目
饲养环境
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实验前处理
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----实验动物的选择 ----种属和品系
啮齿类动物：是哺乳动物 中种类最多分布范围最广 的一个类群上下颌只有一 对门齿，门齿无根，能终 生生长
BALB/c小鼠
C57BL/6小鼠
将动物整体臵于染毒柜中
2.面罩吸入染毒：
仅将动物的口鼻部分与含有受试物的空气接触
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动式吸入染毒
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动式吸入染毒
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动式吸入染毒

优点：
实验过程中受试物浓度和氧分压较稳定；
缺点：
对设备要求高，受试物消耗量大，操作比 较复杂，费时费工。
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完全随机分配后各组所属动物号
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20只动物完全随机分配的结果
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20只动物的完全随机分配
动物编号 随即数字 除4后余数 所属组别 1 54 2 2 83 3 3 80 0 4 53 1 5 90 2 6 75 3 7 53 1 8 78 2 9 93 1 10 47 3 11 72 0 12 09 1 13 54 2 14 66 2 15 95 3 16 44 0 17 68 0 18 67 3 19 67 3 20 86 2
二
三
四
一
二
三
一
二
一
三
四
一
二
二
三
四
四
三
三
二
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完全随机分配后各组所属动物号
组别 动物编号
一
二
4
1
7
5
9
8
12
13 20 14
三
四
2
3
6
11
10
16
15
17
18
19
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20只动物完全随机分配的结果
组别 动物编号
一
二 三 四
4
1 2 3
7
5 6 11
9
8 10 16
12
13 15 17
19
14 18 20
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原则是余数即为所属组别，余数0属最后一组。当同一区 组中有相同余数时，非0余数按顺序分配至未分配动物的 首位组，而0余数则按顺序分配至未分配动物的末尾组。 如下表第一区组中，第一个余数是0，将1号大鼠分到第4 组；第2个余数为1，2号大鼠分到第1组；第3个余数仍为 1，未分配动物的第2组居首位，故将3号大鼠分到第2组； 余下4号大鼠则分到第3组。 优点：各组的动物数目相等，动物平均体重相近，可以 减少实验误差；动物数目较多时比完全随机法快。
常用方法：完全随机和随机区组
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完全随机设计
将实验动物编号，从随机数字表上任意横行或纵行的任 意数字开始，顺序取下数字，标于每个动物号下，然后 用计划组数去除随机数字，所得余数即为所属组别。如 将２０只动物分为４组，从随机数字表的第１１行开始，
顺序取２０个数字，用４除的余数即为组别。
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20只动物的完全随机分配
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脱毛面积：
体表面积的10-15%
体表面积=10.4W0.667
(W指体重)

脱毛后必须观察24小时，确认无皮肤损伤后才能进行实验。

实验方法：
可用玻璃钟罩法，接触受试物2-6小时，接触剂量以
第六章 毒物的一般毒性作用及其评价

一般毒性（general toxicity ）：指外源化学物在
一定剂量、一定接触时间和一定接触方式下，对实验
动物机体产生总体毒效应的能力。

特殊毒性(special toxicity) ：指外源化学物在一
定剂量、一定接触时间和一定接触方式下，对动物机
体的某一组织器官或某种机能产生毒效应的能力。