人附睾蛋白(HE4)认知的前世今生
人附睾蛋白（HE4）认知的前世今生
人附睾蛋白4（HE4）是一种新型的卵巢肿瘤标志物。临床对HE4的认知历经了一段曲折的过程，今天小编就和大家分享HE4从发现到临床应用的这段精彩故事。
了解HE4的前世之身
HE4中文名叫人附睾蛋白4，最早在人附睾远端的上皮细胞中发现。由两个核心结构组成：约25KDa的天然N端糖基化蛋白和两个乳清酸性蛋白核心区域（WAP，由4个二硫键核心区域和8个半胱氨酸残基组成）。
HE4的编码基因有多个同源兄弟，同样编码WAP核心蛋白。SLPI和Elafin蛋白就是其中研究最好的两个蛋白。这两个蛋白都具有蛋白酶抑制作用和抗炎性，与宿主抵御细菌感染有关。基于“兄弟类似”基础，最开始人们认定它们的兄弟蛋白HE4具有抗炎抗菌效果，又因为在人附睾上皮细胞中发现，推测HE4可能是与生殖发育（精子生成）有关的一种蛋白抑制酶。随着后续研究的发现，HE4的真身开始显露。
研究拨开HE4的认知迷雾
基础研究
后续研究发现肿瘤细胞系中也有HE4表达，打开了临床认知的新窗口。HE4与卵巢癌的关系也逐渐被系列研究慢慢揭开：
1999年，Schummer和他的同事从21500份卵巢癌样本中探索异常表达的基因，首次发现HE4在卵巢癌患者中高表达。该研究结果在后续的几大基因表达谱研究中都得到了证实“该段落信息有误，并非21500份检测样本，而是从21500种cDNA中筛选发现HE4在卵巢癌中高表达。
2002年Cancer杂志及2003年Cell杂志刊登的研究发现HE4的升高程度与卵巢癌类型有关，在浆液型和子宫内膜癌这两种亚型之中升高程度最大。
2005年Drapkin等人发现93%的浆液型卵巢癌和100%的子宫内膜癌中HE4高表达，但在透明细胞癌中仅为50%，而黏蛋白型卵巢癌中不表达HE4。
2006年研究发现HE4在有些肺癌，乳腺癌，转移型子宫内膜细胞和胰腺癌中会有所升高，但在卵巢癌中HE4的表达是最高的。
临床研究
随着基础研究的深入，人们推断HE4可能成为卵巢癌下一个良好的血清学指标。HE4的认知研究也开始向临床应用倾斜：
2003年，Hellstrom和他的同事开始探索HE4的临床应用，他发现HE4在良性疾病患者中阳性率更低，且HE4对卵巢癌晚期患者的检测灵敏度为80%，特异
性高达95%。
2008年Havrilesky进一步研究发现HE4作为单一的肿瘤指标，对卵巢癌筛
查，尤其是卵巢癌I期和盆腔肿块的检测灵敏度更高（83%）。
2009年Moore等人对比分析HE4与CA125这两个卵巢癌指标，发现HE4灵敏度更高（72.9% VS 43.3%），特异性两者相差不大（95%）。与CA125不同的是，HE4检测不受绝经状态影响，更适合区分绝经前患者肿瘤是良性还是恶性。Moor 进一步研究发现与其他单一的肿瘤标志物（CA125、CA724、可溶性间皮素）相比，无论是对早期还是进展期子宫内膜癌，HE4的ROC曲线面积都是最好的。
同年Huhtinen等人研究发现HE4检测不仅能区分肿瘤的良恶性，还能区分卵巢癌与卵巢子宫内膜异位囊肿。研究发现HE4在卵巢癌和子宫内膜癌中都会上升，但在各种类型的子宫内膜异位中HE4浓度不会升高。
可以发现系列研究结果证实HE4这一新型的肿瘤标志物是卵巢癌早期诊断和监测的良好指标，可用于临床。目前HE4检测已经被FDA审核通过作为卵巢癌复发监测的指标。
临床应用之路还有坎坷
HE4作为近年来唯一证实的肿瘤标志物，对卵巢癌的诊疗过程意义重大，但它在临床应用之路还有坎坷不平之处：
1）任何临床检测指标都需要明确的Cut-off值，而这正是HE4临床应用中面临的最大问题。利用HE4评估恶性肿瘤患病风险、是否会复发、疾病进展情况，还需要更多、规模更大的的研究探索明确HE4的截断值（悄悄说一下，最近国内解放军总医院首次公布中国表观健康的女性HE4参考值为105.1pmol/L，该项研究涉及9家大型三甲医院，样本人群超过2300人）。
2）HE4也并非完美的指标，特异性同样无法达到100%。FDA明确指出HE4的检测需要和其他临床检测方法一起监测卵巢癌。
组合检验才是解决之道
HE4出现之前，CA125一度是临床卵巢癌诊断的“金标准”。这两个指标各有优劣之处，CA125对绝经前朋友帮助不大，而HE4刚好不受绝经状态影响，可很好的弥补CA125的不足。因此这两个指标的联合检测可能成为卵巢癌早期诊断的有效方法。
Moore的研究对9个生物标志物的组合效果进行评估，发现HE4和CA125 组合检测的灵敏度最高（0.91 CI：0.87-0.96），且比这两个指标单独检测时的灵敏度也高出很多。后续针对65个生物标志物的研究中发现，HE4与CA125组合检测非常适合卵巢癌诊断和筛查，检测的灵敏度与卵巢癌进展有关，早期灵敏度为74.2%，晚期为91.7%，检测的特异性为85%。
为了证实HE4与CA125联合检测可评估卵巢癌风险，Moore展开前瞻性多中心双盲试验研究。研究人群为129位卵巢癌患者，22位潜在恶性肿瘤患者及352名良性疾病人群，检测结果通过一定的算法（ROMA）进行计算，统计分析结果。研究发现ROMA模型的灵敏度对绝经后女性为92%，绝经前为76%，综合为89%。这就说明对于评估卵巢癌的风险高低，HE4和CA125联合检测才是最有效的方法。
有趣的是研究发现对于盆腔肿瘤患者的风险评估，单独的HE4检测效果比联合检测更好。
临床对HE4的认知研究已经实现从最开始的模糊认识向临床应用探索的完美转换，尽管它在临床中的应用才刚刚起步，但作为一个特异性更好的卵巢癌指标，我们相信HE4在未来的临床中必将绽放光芒，成为守护女性卵巢健康的又一生力军。
参考文献
1、Montagnana M, Danese E, Giudici S, et al. HE4 in ovarian cancer: from discovery to clinical application[J]. Advances in clinical chemistry, 2011, 55: 2.
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3、D.R. Schwartz, S.L. Kardia, K.A. Shedden, et al., Gene expression in ovarian cancer reflects both morphology and biological behavior, distinguishing clear cell from other poor-prognosis ovarian carcinomas, Cancer Res. 62 (2002) 4722–4729
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5、R.G. Moore, A.K. Brown, M.C. Miller, et al., The use of multiple novel tumor biomarkers for the detection of ovarian carcinoma in patients with a pelvic mass, Gynecol. Oncol. 108 (2008) 402–408.
6、K. Huhtinen, P. Suvitie, J. Hiissa, et al., Serum HE4 concentration differentiates malignant ovarian tumours from ovarian endometriotic cysts, Br. J. Cancer 100 (2009) 1315–1319
Genomic组织和染色体的小鼠附睾视黄酸结合蛋白基因
Genomic组织和染色体的小鼠附睾视黄酸结合蛋白基因 （ME-RABP）定位。 Abstract 文摘 The murine epididymal retinoic acid-binding protein (mE-RABP) is specifically synthesized in the mouse mid/distal caput epididymidis and secreted in the lumen. 鼠类附睾的视黄酸结合蛋白(mE-RABP)是专门合成在老鼠中/远端头epididymidis和中分泌腔。 In this report, we have demonstrated by Southern blot analysis of genomic DNA that mE-RABP is encoded by a single-copy gene. 在这篇报告中,我们已经演示了由南方污点,mE-RABP基因组DNA的分析是由基因进行编码的单份。 A mouse 129/SvJ genomic bacterial artificial chromosome (BAC) library was screened using a cDNA encoding the minor form of mE-RABP. 一只老鼠129 / SvJ基因组的细菌人工染色体(BAC)库是使用一个cDNA筛选编码小mE-RABP 形式。 One positive BAC clone was characterized and sequenced to determine the nucleotide sequence of the entire mE-RABP gene. 一个积极的BAC克隆特点和测序来确定整个mE-RABP核苷酸序列的基因。 The molecular cloning of the mE-RABP gene completes the characterization of the 20.5-kDa-predicted preprotein leading to the minor and major forms of mE-RABP. 分子克隆的mE-RABP基因完成描述20.5负责预测preprotein导致轻微和主要形式的mE-RABP。 Comparison of the DNA sequence of the promoter and coding regions with that of the rat epididymal secretory protein I (ESP I) gene showed that the mE-RABP gene is the orthologue of the ESP I gene that encodes a rat epididymal retinoic acid-binding protein.比较DNA序列的发起人和编码区域与鼠附睾的分泌蛋白我(ESP我)基因表明,mE-RABP基因是orthologue的ESP我的编码基因鼠附睾的视黄酸结合蛋白。 Several regulatory elements, including a putative androgen receptor binding site, "CACCC-boxes," NF-1, Oct-1, and SP-1 recognition sites, are conserved in the proximal promoter. 一些监管元素,包括一个假定的雄激素受体结合位点,“CACCC-boxes,“nf 1,10月1日,sp 1识别网站,是守恒的近端启动子。 Analysis of the nucleotide sequence of the mE-RABP gene revealed the presence of seven exons and showed that the genomic organization is highly related to other genes encoding
第十二章 生殖题库
第十二章生殖 [A1题] D 1.体内精子储存在 A.睾丸 B.前列腺 C.精囊腺 D.附睾和输精管 E.尿道球腺 B 2.睾酮的主要产生部位是 A.睾丸生精细胞 B.睾丸间质细胞 C.睾丸支持细胞 D.曲细精管上皮细胞 E.肾上腺皮质网状带细胞 C 3.下列哪项不属于睾酮的生理作用 A.维持生精作用 B.刺激生殖系统器官生长发育 C.促进乳腺发育 D.促进蛋白质合成 E.促进男性副性征出现 A 4.下列哪项组织合成雌激素 A.卵巢 B.黄体 C.胎盘 D.子宫 E.肾上腺皮质 B 5.下列哪项不属于雌激素的生理作用 A.使卵泡发育成熟、排卵 B.使子宫内膜发生分泌期变化 C.使输卵管运动增强 D.刺激阴道上皮细胞增生、角化 E.促进乳腺发育 D 6.出现月经是由于血液中什么激素的浓度急剧下降所致 A.生长素 B.雌激素 C.孕激素 D.雌激素和孕激素 E.雌激素和生长素C 7.血液中哪种激素出现高峰可以作为排卵的标志 A.雌激素 B.孕激素 C.黄体生成素 D.卵泡刺激素 E.卵泡刺激素释放激素E 8.关于孕酮生理作用的叙述，下列哪项是错误的 A.使子宫内膜呈分泌期变化 B.使子宫肌活动减弱 C.抑制母体免疫排斥反应 D.促进乳腺腺泡发育 E.使排卵后基础体温降低 B 9.在月经周期中，形成雌激素分泌第二个高峰的直接原因是 A.卵泡刺激素分泌增加 B.黄体生成素分泌增加 C.雌激素的正反馈作用 D.雌激素的负反馈作用减弱 E.孕激素的正反馈作用E 10.妊娠时维持黄体功能的主要激素是 A.雌激素 B.孕激素 C.卵泡刺激素 D.黄体生成素 E.绒毛膜促性腺激素D 11.分泌黄体酮的卵巢细胞是 A.颗粒细胞 B.内膜细胞 C.子宫内膜细胞 D.黄体细胞 E.阴道上皮细胞
人附睾蛋白4
人附睾蛋白4 人附睾蛋白4(HE4） 人附睾蛋白4（H Ｅ4）首先在附睾远端上皮中发现，生理情况下在呼吸道、生殖系统和卵巢组织中有非常低水平的表达，但在卵巢癌组织和患者血清中均高度表达。HE4是卵巢癌检测敏感性较高的肿瘤标志物,特别是早期无症状的Ｉ期卵巢癌。HE4升高，CA125正常提示卵巢癌或其他类型的肿瘤，如子宫内膜癌。此外H Ｅ４与C Ａ125联合检测计算出的ROM Ａ指数具有重要临床意义(绝经前女性ROMA 指数≥11.4%,绝经后女性ＲOM Ａ指数≥２9。9%，定义为上皮性卵巢癌的高风险组）,不但能为临床诊断卵巢癌提供更准确的检测结果，还能对女性盆腔肿块的上皮性卵巢癌进行风险分级，能帮助医生监测治疗效果并及早发现疾病复发和转移，改善卵巢癌的管理． 人附睾蛋白4（HE4）是一种新的肿瘤标志物.疾病早期ＨＥ4诊断的敏感度是82。7%，而CA12５仅有45.9%。与CA1２5仅２0％的特异性相比，ＨE ４的特异性高达99％。HE4与CA1２5是相互补充的标志物，两者联合应用,敏感性可增加到92％，能将假阴性结果减少30%，大大增加了卵巢癌诊断的准确性。...文档交流 仅供参考... 专业技术人员与临床医生交流记录 部门：检验科 主 题 关于检验科新开展人附睾蛋白4 （ＨE4）检测的意见 时 间 2014-4－10 地点 肿瘤内科 负责人 孔丽萍 参加人员 临床医生： 专业人员：
交流情况： 我科室为满足临床需求，新开展人附睾蛋白4(HE4）检测。人附睾蛋白4（HＥ4）是一种新的肿瘤标志物。疾病早期HE４诊断的敏感度是82。７%,而CA125仅有45。9%。与CＡ1２5仅20%的特异性相比,HE4的特异性高达9９％。ＨE4与CA125是相互补充的标志物，两者联合应用,敏感性可增加到９２%，能将假阴性结果减少3０%,大大增加了卵巢癌诊断的准确性。 人附睾蛋白４（HＥ４）首先在附睾远端上皮中发现，生理情况下在呼吸道、生殖系统和卵巢组织中有非常低水平的表达,但在卵巢癌组织和患者血清中均高度表达。HE ４是卵巢癌检测敏感性较高的肿瘤标志物,特别是早期无症状的Ｉ期卵巢癌.HE4升高,CA1２5正常提示卵巢癌或其他类型的肿瘤,如子宫内膜癌。此外ＨＥ4与CA125联合检测计算出的ＲOMA指数具有重要临床意义（绝经前女性RO ＭA指数≥11.4%，绝经后女性ROMＡ指数≥2９．9％，定义为上皮性卵巢癌的高风险组),不但能为临床诊断卵巢癌提供更准确的检测结果,还能对女性盆腔肿块的上皮性卵巢癌进行风险分级,能帮助医生监测治疗效果并及早发现疾病复发和转移,改善卵巢癌的管理。 临床建议：
男人生殖保健知识
男人生殖保健知识 谁都渴望有一个和谐、幸福的家庭，谁都期待有一个聪明、健康的孩子。尊敬的先生，您的生殖健康，关系着人类的繁衍，关系着家庭的幸福和社会的稳定。宣传男性生殖保健知识，唤起人们对它的重视。 一、男性的生殖系统 1、男性繁衍后代的生物学结构。 包括生殖腺——睾丸，输送生殖细胞——精子的管道附睾、输精管等，附性腺组成的男性内生殖器——精囊腺、前列腺、尿道球腺等，以及外生殖器的阴茎和阴囊。外生殖器是婴儿出生后即可认知的特征，但与其他系统不同的是，直到青春期性成熟后才具有生殖功能和性功能。 阴茎男性性交行为及尿液、精液排出的外生殖器官。内含勃起组织及射精和排尿的共有通路——尿道。成年人阴茎大小不一，一般认为松驰状态较小的阴茎，其勃起后增长比率较大，而较大的阴茎勃起后增长比率较小，因而松驰状态下的阴茎大小似差别较大，而勃起后的差别并不大。 阴囊位于阴茎根部下方容纳和保护睾丸和附睾的多层结构囊袋，为男性外生殖器官。从比较解剖学来看，雄性鱼、禽类的性腺都在体腔内，没有阴囊，只有高级哺乳纲雄性动物的睾丸在躯干体腔外有阴囊。这是适应睾丸比体温低才可有利精子发生的一种进化。阴囊壁即是腹壁的延续，表层为皮肤，没有皮下脂肪。阴囊皮肤薄而多皱壁呈暗褐色，阴毛稀疏弯曲。阴囊皮肤含有丰富的皮脂腺与大汗腺，其分泌物与外阴的细菌作用后可产生特殊气味。
皱壁丰富的阴囊壁有较大的舒缩性，环境寒冷时收缩，温暖时松驰伸展，汗腺分泌增加，从而调节阴囊内温度有利睾丸生成精子。阴囊皮肤为男性性感区之一，性兴奋时阴囊收缩、增厚并提升。 睾丸产生精子及性腺激素的男性性腺。是男性主要性器官，如果在青春期后将丧失性功能和生育能力。睾丸内具有3种特殊功能的细胞，包括由细精管壁的生精细胞和支持细胞的及睾丸间质中的间质细胞。以生精细胞对机体内外环境条件的改变最为敏感，适应环境因素的弹性度狭小，如药物、电磁波、微量元素等理化生物因素，都会不同程度的干扰精子发生和生成。成人的睾丸重量为10.5——14.0克，每克睾丸组织每天约释放出1000万个精子。 附睾连接睾丸和输精管的高度卷曲的管道，根据动物实验的结果，附睾的功能不仅仅是一根单纯的精子通道，因为取自附睾头部的精子受精能力大大低于取自附睾尾部的精子。 精子雄性生殖细胞。人类的精子发生在睾丸的曲细精管内，精子在曲细精管内成熟约为64-72天，一般不能运动。至附睾内还要停留19-25天进一步成熟，才有前向运动。因此，精子在曲精管中成熟，约需90天时间。精子贮存在附睾尾部。常有人误认为精子的储精保精有利受孕。实验证明，贮存过久的精子会衰老，这些衰老精子的运动能力和受精能力均下降。衰老的精子受精以后，即使能受孕也易发生流产及胎儿死亡。精子发育成熟后，经睾丸、附睾进入输精管，射精时排入尿道。如没有有射精的机会，精子最终将在输精管膨大部分死亡，并被溶解、吸收。射精后的精子一定要在女性生殖道内停留一段时间，之后才具有受精能力，称获能。在阴道内2-6小时后约有90%死亡，36小时后液化吸收;精子在性交后15分钟左右进入女方子宫颈粘液内，1小时后进入子宫，性交后6小时，子宫内的精子100%存活着，12小时后80%存活，36小时后25%存活，72小时后全部死亡。在输卵管内，25天后仍有存活精子，平均存活14天。 2、生育的基本条件 受孕是复杂而又协调的生殖生理过程，需要具备3个条件：①双方具有健康的生殖细胞--精子和卵子;②精子与卵子能结合成受精卵;③受精卵能顺利进入子宫着床与发育。如果男女任何一方的生殖器官内存在器质性病变或性功能障碍，甚至性知识缺乏等原因，均可导致上述3个条件中的某一个环节失常而造成不育。据世界卫生组织调查1万对不育夫妇，男性不育占33%，女性不育占25%，双方共同所致占20%，双方找不到原因者占15%。也就是说，不育原因的男方因素占55%以上。 二、日常生活中影响精子质量和性功能的几个因素
组织胚胎学名词解释
组织胚胎学名词解释 1、Gap Junction：又称通讯连接，呈斑点状。此处相邻细胞间隙仅约为3nm，相邻细胞膜上有连接小体，由6个杆状的连接素分子围成，中央有直径约为2nm的管腔。相邻细胞膜上相对应的小管腔相互连通，小物质分子可以通过此管，从一个细胞进入另一个细胞。缝隙连接除具有细胞间的连接作用外，更主要的是细胞间传递化学信息和电信息。 2、Tight Junction：又称闭锁小带，单层柱状上皮中的紧密连接。位于相邻细胞间隙的顶端，呈箍状环绕细胞顶端，该处相邻细胞膜呈间断融合，融合处细胞间隙消失，未融合处有极窄的间隙存在，紧密连接除有连接作用外，尚有屏障作用，可防物质穿过细胞间隙。 3、Molecular Sieve：结缔组织基质中的蛋白多糖以透明质酸为中心形成一种稳定的蛋白多糖聚合体，蛋白多糖聚合体曲折盘绕，形成多微孔的筛状结构。 4、Mesenchyme：胚胎时期一种散在的中胚层组织，由间充质细胞和无定形基质组成。间充质细胞呈星形，细胞核较大，核仁明显，胞质弱嗜碱性，细胞间以突起相互连接成网。间充质细胞分化程度很低，但增殖分化能力强。 5、Isogenous Group：骨发生中最早形成骨组织的部位。 6、Osteon（Haversian System）：又称哈弗斯系统，位于长骨骨干的内外环骨板之间。骨单位呈圆筒状，与骨干长轴平行，其中轴为纵行的中央管，周围为4~20层同心圆排列的骨板，称为哈弗斯板。 7、Marrow-Blood barrier，MBB：造血组织内不断成熟的血细胞通过血窦壁进入血液循环，血窦壁成为造血组织和血循环之间和特殊屏障结构，称骨髓血屏障。 8、Reticulocyte：是从骨髓进入血液的未完全成熟的红细胞。内有残留核糖体，故仍有合成血红蛋白的功能。网织红细胞进入外周血一天后，核糖体完全消失。成人外周血网织红细胞占红细胞总数的0.5~1%，新生儿高达3~6%。 9、Hemogram：是研究血细胞的形态、数量、比例以及血红蛋白数量的变化。通常采用Wright 或Giemsa染色血液涂片。 10、Triad：每条横小管与其两侧的终池共同构成骨骼肌三联体。三联体可以将肌膜的兴奋传至肌浆网，使肌浆网释放钙离子，引起肌纤维收缩。 11、Terminal Cisternae：肌浆网在靠近横小管两侧横向扩大并相互连通形成的扁囊。 12、Nissl Body：尼氏体是神经元胞质内的嗜碱性小块或颗粒，电镜下，它由横行排列的粗面内质网和游离核糖体组成，尼氏体是神经元合成蛋白质的场所。尼氏体分布在胞质和树突内，轴突内不存在尼氏体。 13、Synapse：突触是神经元与神经元之间的一种特化的细胞连接，由突触前份，突触间隙和突触后份构成。突触前份通常是神经元的轴突终末，内含许多突触小泡，突触小泡内含神经递质或神经调质。
繁殖复习
家畜繁殖学复习重点 ——归去来 一：名词解释 1.初情期(puberty):指雄性个体第一次释放有受精能力的精子，并表现出完整性行为序列的时期。 2.隐睾（cryptorchidism):动物出生或成年后，一侧或双侧睾丸未能进入阴囊，仍留于腹腔或腹股沟内的现象。 3.适配年龄：又称配种适龄，指适宜配种的年龄。 4.发情周期：卵泡期和黄体期的交替过程。 5.卵泡发生波：指雌性动物在一个发情周期中，卵巢上有群体卵泡发育到三级卵泡及少数卵泡发育到成熟卵泡大小时，发生闭锁退化或排卵的现象。 6.精子获能：哺乳动物射出的精子在雌性生殖道或人工配制的介质中完成最后成熟，并完全具备与卵子受精能力的过程。精子进入雌性生殖道后就开始获能，但主要在子宫和输卵管中完成。 7.顶体反应：获能精子与卵子相遇后，在Ca2+的作用下，精子赤道板前部的质膜与顶体外膜融合形成泡状结构，并释放顶体内容物的过程。 8.卵丘：卵母细胞被卵泡腔挤向一边，被包裹在一团卵泡细胞中，所形成突出于卵泡腔的半岛结构。 9.同期发情：采用外源生殖激素等方法使一群母畜在同一时期发情并排卵的技术 10.静立反射：在发情鉴定中，如果用手压母畜背部试情，如母畜静立不动，即为静立反射，表示该母畜已发情。 11.试情法：应用公畜对母畜进行试情，根据母畜在性欲上对公畜的反应情况来判断其发情程度的一种发情鉴定方法。 12.透明带反应：透明带在皮质酶作用下，糖蛋白分子结构发生变化，导致精子无法识别和穿过透明带的现象。 13.皮质反应：卵子激活后胞质内皮质颗粒向卵质膜下移动，并且皮质颗粒膜与卵质膜融合，释放内容物的过程。 14.卵黄膜反应或卵黄封闭作用：精子进入卵黄膜时，精子质膜与卵黄膜融合，卵黄膜立即发生变化，表现为卵黄紧缩，卵黄膜增厚，并排出部分液体进入卵黄周隙。这个反应也阻止后面的精子再进入。 皮质反应、透明带反应和卵黄膜反应，共同构成多精子入卵阻拒作用 15.配子配合：雌雄原核由彼此接触到两套染色单体相互配对的过程。 16.胚胎附植：胚胎在子宫中定位后结束游离状态，开始同母体建立紧密的联系，这个过程称为胚胎附植。子宫只在某个特定时期允许胚胎附植，这一时期称为附植窗。 17.精子活率：直线前进精子占总精子数的百分比。 18.妊娠识别：在妊娠初期，孕体发出信号（类固醇激素或蛋白质）传递给母体作用于母体，母体随即产生识别，以识别孕体的存在。由此，母体和孕体建立密切联系，促进孕体进一步发育，这一生理过程叫妊娠识别。 19.受胎率：评定母畜受胎能力或公畜的受精能力的综合指标。总受胎率为配种后最终妊娠母畜数占总配种母畜数的百分比。 20.繁殖率：本年度内出生仔畜数占上年度终存栏适繁母畜数的百分率。 21.成活率：一般指断奶成活率，即断奶时成活仔畜数占出生时活仔畜总数的百
人附睾蛋白4HE4试剂盒使用方法
人附睾蛋白4（HE4）试剂盒使用方法 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围：96T 2 pmol/L -55pmol/L 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中附睾蛋白4（HE4）含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人附睾蛋白4（HE4）水平。用纯化的人附睾蛋 白4（HE4）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入附睾蛋白4（HE4），再与HRP 标记的附睾蛋白4（HE4）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最 终的黄色。颜色的深浅和样品中的附睾蛋白4（HE4）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人附睾蛋白4（HE4）浓度。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶 2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（96 pmol/L） 0.5ml×1 瓶 3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶 4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份 5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张 6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 48 pmol/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液 24 pmol/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液 12 pmol/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液 6 pmol/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液 3 pmol/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。
人附睾蛋白(HE4)认知的前世今生
人附睾蛋白（HE4）认知的前世今生 人附睾蛋白4（HE4）是一种新型的卵巢肿瘤标志物。临床对HE4的认知历经了一段曲折的过程，今天小编就和大家分享HE4从发现到临床应用的这段精彩故事。 了解HE4的前世之身 HE4中文名叫人附睾蛋白4，最早在人附睾远端的上皮细胞中发现。由两个核心结构组成：约25KDa的天然N端糖基化蛋白和两个乳清酸性蛋白核心区域（WAP，由4个二硫键核心区域和8个半胱氨酸残基组成）。 HE4的编码基因有多个同源兄弟，同样编码WAP核心蛋白。SLPI和Elafin蛋白就是其中研究最好的两个蛋白。这两个蛋白都具有蛋白酶抑制作用和抗炎性，与宿主抵御细菌感染有关。基于“兄弟类似”基础，最开始人们认定它们的兄弟蛋白HE4具有抗炎抗菌效果，又因为在人附睾上皮细胞中发现，推测HE4可能是与生殖发育（精子生成）有关的一种蛋白抑制酶。随着后续研究的发现，HE4的真身开始显露。 研究拨开HE4的认知迷雾 基础研究 后续研究发现肿瘤细胞系中也有HE4表达，打开了临床认知的新窗口。HE4与卵巢癌的关系也逐渐被系列研究慢慢揭开： 1999年，Schummer和他的同事从21500份卵巢癌样本中探索异常表达的基因，首次发现HE4在卵巢癌患者中高表达。该研究结果在后续的几大基因表达谱研究中都得到了证实“该段落信息有误，并非21500份检测样本，而是从21500种cDNA中筛选发现HE4在卵巢癌中高表达。 2002年Cancer杂志及2003年Cell杂志刊登的研究发现HE4的升高程度与卵巢癌类型有关，在浆液型和子宫内膜癌这两种亚型之中升高程度最大。
2005年Drapkin等人发现93%的浆液型卵巢癌和100%的子宫内膜癌中HE4高表达，但在透明细胞癌中仅为50%，而黏蛋白型卵巢癌中不表达HE4。 2006年研究发现HE4在有些肺癌，乳腺癌，转移型子宫内膜细胞和胰腺癌中会有所升高，但在卵巢癌中HE4的表达是最高的。 临床研究 随着基础研究的深入，人们推断HE4可能成为卵巢癌下一个良好的血清学指标。HE4的认知研究也开始向临床应用倾斜： 2003年，Hellstrom和他的同事开始探索HE4的临床应用，他发现HE4在良性疾病患者中阳性率更低，且HE4对卵巢癌晚期患者的检测灵敏度为80%，特异 性高达95%。 2008年Havrilesky进一步研究发现HE4作为单一的肿瘤指标，对卵巢癌筛 查，尤其是卵巢癌I期和盆腔肿块的检测灵敏度更高（83%）。 2009年Moore等人对比分析HE4与CA125这两个卵巢癌指标，发现HE4灵敏度更高（72.9% VS 43.3%），特异性两者相差不大（95%）。与CA125不同的是，HE4检测不受绝经状态影响，更适合区分绝经前患者肿瘤是良性还是恶性。Moor 进一步研究发现与其他单一的肿瘤标志物（CA125、CA724、可溶性间皮素）相比，无论是对早期还是进展期子宫内膜癌，HE4的ROC曲线面积都是最好的。 同年Huhtinen等人研究发现HE4检测不仅能区分肿瘤的良恶性，还能区分卵巢癌与卵巢子宫内膜异位囊肿。研究发现HE4在卵巢癌和子宫内膜癌中都会上升，但在各种类型的子宫内膜异位中HE4浓度不会升高。 可以发现系列研究结果证实HE4这一新型的肿瘤标志物是卵巢癌早期诊断和监测的良好指标，可用于临床。目前HE4检测已经被FDA审核通过作为卵巢癌复发监测的指标。
图题
一5.概述男性生殖系统的结构和功能（完成右图） 结构 功能 结构 功能 输精管 输送精子 附睾 贮存和输送精子 尿道 排出精液和尿液 睾丸（是男性主要的性器官） 产生精子，分泌雄性激素 二.概述女性生殖系统的结构和功能 结构 功能 卵巢（是女性主要的性器官） 产生卵细胞，分泌雌性激素 输卵管 输送卵细胞,受精作用的场所 子宫 胚胎和胎儿发育的场所 阴道 精子进入和胎儿产出的通道 三、下图是女性生殖系统示意图，请据图回答问题： （1）女性的主要性器官是[ ] ________，原因是 ___________________； （2）.精子和卵细胞结合的场所是 。 （3）.胚胎发育的场所是 。 （4）胚胎发育成胎儿后，最后通过 ________________从母体中获得所需的营养物质和氧。 （5）看图描述受精的大致过程 （6）胎儿发育 天发育成熟，成熟的胎儿和胎盘从母体 排出体外的过程叫 （7）从受精到分娩的大致过程及部位：受精卵在 内→胚泡在 内→胚胎在 内→胎儿在 内→婴儿。 四、下图为女性生殖系统的一部分。据图回答： (1)精子与卵细胞结合形成受精卵是在图中数字__________所示的结构内。 (2)受精卵不断地进行分裂，形成__________并 且埋人图中数字__________所示的结构内。
(3)胎儿成熟后从图中数字__________所示的结构排出体外的过程叫__________。 五、进入青春期，男女同学的身高、生理和心理等方面都发生着显著的变化，你感受到这些变化了吗?请分析图3并回答问题。 (1)从图3--A的曲线可知，进入青春期，男孩的身高生长速度。 (2)从图3一B的曲线可知，进入青春期后，男性的和女性的卵巢迅速发育。 (3)从两幅曲线图中可知女性进入青春期的平均年龄比男性来 得。 六、下面两图是城市男女身高和体重的平均值曲线，据图回答： ⑴从图中可以看出，人体发育最迅速的时期大约是从岁到，这一段正是一个人的期。 ⑵人在发育最迅速的时期内，和都迅速增长，其原因是由分泌的激素增多。 ⑶这一时期新陈代谢旺盛，因此要经常参加，并且注意在饮食上保证。
卵巢癌常用的肿瘤标志物
卵巢癌常用的肿瘤标志物 卵巢癌的肿瘤标志物根据其组织病理类型可分为多种亚型，其中上皮来源性肿瘤是最为常见的类型，现有肿瘤标志物大多也与卵巢上皮性癌密切相关，如CA125和人类附睾蛋白4（HE4）等。 CA125 1981年由Bast等从上皮性卵巢癌中检测出，是可与单克隆抗体OC125结合的一种糖蛋白，分子量为200Kd，含24%的碳水化合物。健康人群血清CA125含量很低，健康成人血清CA125浓度上限为35kU/L。 CA125是重要的卵巢癌相关抗原，不宜用于筛查，但联合经阴道盆腔超声或其他标志物可以提高早期筛查特异性；CA125可用于鉴别良恶性卵巢包块，绝经后女性CA125>95 kU/L，阳性预测值达95%；此外，CA125是观察疗效、判断有无复发的良好指标，第一个化疗周期后，CA125水平如能降至原来水平的1/10，表明病情转归良好；首次治疗过程中CA125水平持续升高表明预后不佳，建议每2~4个月检测一次，持续2年，之后可逐渐减少检测的频率。 HE4 HE4是1991年由Kirchhoff等发现于附睾上皮组织的一种分泌型糖蛋白，属于蛋白酶抑制剂WFDC基因家族，含有由8个半胱氨酸组成的4个二硫键核心区域。HE4在良性肿瘤及正常组织中含量较低，其高表达多见于卵巢癌和子宫内膜癌，健康成人血清HE4浓度<150 pmol/L。HE4在卵巢癌早期诊断具有一定的优势，单项检测的敏感性和特异性分别为72.9%、95%；其用于卵巢良恶性肿瘤鉴别诊断的价值优于CA125，并已用于部分地区卵巢癌患者的治疗监测。 人绒毛膜促性腺激素（HCG）
HCG是绒毛膜癌、恶性葡萄胎的肿瘤标志物，也可见于某些生殖细胞肿瘤。约84%的卵巢癌患者可见HCG升高，可用于卵巢癌预后判断。血清HCG正常的卵巢癌患者5年生存率可高达80%, 而血清HCG升高的患者5年生存率仅22%。 激肽释放酶家族蛋白 激肽释放酶家族蛋白是丝氨酸蛋白酶家族的亚群之一，在肿瘤的转移和预后中起着重要作用。激肽释放酶4、5、6、7、8、9、10、11、13、14和15在卵巢癌诊断、预后判断、预防和监测中具有一定的价值。例如激肽释放酶4,它主要在浆液性肿瘤中表达，不存在于正常的卵巢上皮细胞中。其表达与较高的临床分期和肿瘤分级相关，一项单变量生存分析指出激肽释放酶4表达导致卵巢癌复发和死亡的风险升高。