铈量法等测定维生素C片含量的比较

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维生素C存在于多种食物中，属于水溶性维生素的一种，又叫L-抗坏血酸[1]。

维生素C片属于临床上非处方药的一种，具有多种作用。

例如提高人体免疫力，保护牙龈牙齿等。

还可用于预防心脏病、坏血病以及癌症等。

据相关调查研究提示，每日坚持应用维C可使皮肤逐渐白皙，对降低和色素沉着和雀斑具有显著作用[2]。

西方发达国家学者认为，成人每日应保持200～300 mg的维C摄入量。

而我国营养学会则建议每日摄入维生素C至少100 mg。

因此，对维生素C进行质量控制十分必要，为了进一步了解分析高效液相色谱法、分光光度法以及铈量法在维生素C片含量检测中的应用价值，本研究随机选取公司内生产6批不同批号的维生素C片进行实验研究。

1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取公司内生产6批不同批号的维生素C片进行试验研究，分别采取分铈量法、光光度法和高效液相色谱法测定维生素C片含量。

1.2 试剂与仪器
试剂：硫酸铈铵0.1 mol/L，1 mol/L硫酸，铁盐指示剂，醋酸溶液：由稀醋酸和冷却后沸水1∶10比例混匀制成，稀醋酸：由1 000 ml纯水和60 ml冰醋酸混合取得，分析纯：无水乙醇。

仪器：25 ml酸式滴定管，UV-1750 紫外可见分光光度计，Agilent 1260，JY12002系列普通电子精密天平。

1.3 方法
1.3.1铈量法
原理：铈量法即采用四价铈盐溶液作滴定剂的容量分析方法。

在酸性溶液中， Ce4＋与还原剂作用，被还原为Ce3＋。

将其和指示剂进行混合，形成络合物后，滴定溶液呈现微蓝色。

络合物消耗体积和维生素C浓度呈正比。

过程：维生素C溶液：取本品20片，研细，精密称取适量（约相当于0.15 g维生素C），置100 ml锥形瓶中，加水与1 mol/L的硫酸（30∶20）的混合液50 ml振捣使维生素C溶解，摇匀，加0.1 ml铁溶液（制备方法：取0.7 g硫酸亚铁和1.76 g盐酸菲啰啉，用70 ml水使溶解，并用水稀释至100 ml，摇匀即得）作为指示剂，运用硫酸铈铵滴定液（0.1 mol/L）滴定至溶液棕红色消失变为微蓝色，持续30 s，每1 ml硫酸铈铵滴定液（0.1 mol/L）相当于8.806 mg的维生素C。

1.3.2高效液相色谱法
原理：该检测方法的主要原理是将具有一定比例差异的混合溶液在固定相的色谱柱中进行分离分析。

过程：将Agilent ZOR BAX SB-Aq柱设定为进样量10 μl和柱温30℃[5]。

将不同批号维生素C片加入醋酸溶液进行溶解稀释，直至试剂含量约为10 μg/ml。

采取厚度为0. 45 μm进行过滤，过滤后对滤液进行分析。

1.3.3分光光度法
原理：该测量方式的主要原理为在190～800 nm波长范围内对维生素C混合后滤液吸光度进行测定，该方式可对鉴别物质中的定量和杂质进行测定。

当被检测溶液被光穿过时，对物质吸收程度会发生改变[3]。

进而对被检测溶液在不同波长处吸光度进行记录进行标准曲线绘制，得到吸收光谱。

过程：运用UV-1750紫外可见分光光度计对生成物的吸光度进行测定，并进行
铈量法等测定维生素C片含量的比较
刘炳坤1，罗丽珠2
[1 雅柏药业（中国）有限公司，广东中山 528437；2 安士制药（中山）有限公司，广东中山 528437]
【摘要】目的 探讨分析铈量法与分光光度法、高效液相色谱法测定维生素C片含量的应用价值。

方法 选择公司内生产不同批号的维生素C片样品共6批次，分别采取铈量法、分光光度法以及高效液相色谱法进行检测，对于上述三种检测方法回收率、精密度以及检测结果和标示量进行对比。

结果 三种实验方法进行维生素C片含量测定在实验结果、回收率以及精密度方面，差异无统计学意义（P＞0.05）。

结论 测定维生素C片含量三种检测方法具有较高回收率和精密度，并且能够实现自动化检测、操作简便，对于维生素C片含量检测具有较大的临床应用价值。

【关键词】铈量法；分光光度法；高效液相色谱法；维生素C片
29 Journal of China Prescription Drug Vol.17 No.7·实验研究·
比较，将最大吸收处位置作为检测波长，本次研究将244 nm为最大吸收[4]。

制备标准曲线：吸收不同剂量的标准液。

均置于试管中后用水加补为2.0 ml。

混合1.5 ml乙酰丙酮后在100℃条件下摇匀。

冷却至室温后，混合PDABA溶液进行吸光值的测定。

根据公式y＝40.37×10-3x＋0.026 4，r＝0.999 7，进行计算。

1.4 统计学分析
采用统计学软件SPSS 22.0进行数据处理分析，计数资料采用百分率（%）表示，两组计数资料比较采用χ2检验，两组组计数资料比较采用秩和检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果
2.1 三种检测方法精密度比较
参与此次试验的6组样本运用不同检测方式进行6次平行测验，将结果进行比较，差异无统计学意义（P＞0.05），详情见表1。

2.2 三种检测方式回收率对比
参与此次试验的6组样本运用不同检测方式进行6次平行测验对回收率进行检测，将结果进行比较发现差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表3：三种检测方式结果对比（%）
实验方法123456
铈量法100.299.8100.498.798.695.6
分光度法100.1100.298.895.997.898.2
高效液相色谱法100.299.8100.199.196.295.1
P 值＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05
2.3 三种检测方式结果对比
参与此次试验的6组样本运用不同检测方式结果比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

3 讨论
3.1 铈量法
铈量法又可称之硫酸铈滴定法。

其主要方式是运用准确浓度溶液和被测物质反应，直至出现定量反映为止，进而根据试剂用量对被测物质的含量进行研究。

其中准确浓度溶液即为标准溶液。

但通常情况下，在实验过程中出现定量反映时无显著特征出现，需要依据试剂颜色变化进行确定。

但在这过程中需要加入指示剂，将指示剂颜色出现改变的转变点为滴定终点。

此种方式的优势在于实验过程简单便捷，同时准确度较高，可用于元素的测定，在实验过程中具有极其重要的实用价值。

但在实验过程中，为保证实验结果的准确性，需要满足以下几个条件。

首先，受检物质和滴定剂需要按照一定剂量进行反应。

其次，在实验过程中化学反应要保证完全。

最后，针对较慢的实验反应需要运用其他方式（例如加热、催化等）方式加速反应速度。

3.2 分光度法
当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后，由于一部分光被体系吸收，因此透射光的强度降至I，则溶液的透光率T为：根据朗伯（Lambert）-比尔（Beer）定律：A＝abc式中A为吸光度，b为溶液层厚度（cm），c为溶液的浓度（g/dm3），a 为吸光系数。

其中吸光系数与溶液的本性、温度以及波长等因素有关。

溶液中其他组分（如溶剂等）对光的吸收可用空白液扣除。

由上式可知，当固定溶液层厚度和吸光系数时，吸光度A 与溶液的浓度成线性关系。

在定量分析时，首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况（吸收光谱），从中确定最大吸收波长，然后以此波长的光为光源，测定一系列已知浓度c溶液的吸光度A，作出A～c工作曲线。

在分析未知溶液时，根据测量的吸光度A，查工作曲线即可确定出相应的浓度。

这便是分光光度法测量浓度的基本原理。

3.3高效液相色谱法
该检测方法主要运用高压输液系统，将具有一定比例差异的混合溶液在固定相的色谱柱中进行分离，之后运用仪器检测实现被检测物质含量的分析，属于分离分析技术的一种，主要用于医学、商业等科学领域的分析。

本次研究结果提示，三种实验方法进行维生素C片含量测定在实验结果、回收率以及精密度方面无显著差异，差异无统计学意义（P＞0.05）。

表明测定维生素C片含量三种检测方法具有较高回收率和精密度，并且能够实现自动化检测、操作简便，对于维生素C片含量检测有较大临床应用价值。

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表1：不同分析方式精密度检测比较（%）
检测方式
测验次数
x s 123456
铈量法92.993.794.193.592.495.693.80.4分光度法93.193.594.294.192.696.194.0 1.1高效液相色谱法92.994.193.994.193.096.294.10.9 P 值＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05
表2：三种检测方式回收率对比（%）
实验次数
本底值（g）加入量（g）测定量（g）回收率（%）
铈量法分光度法高效液相色谱法铈量法分光度法高效液相色谱法铈量法分光度法高效液相色谱法铈量法分光度法高效液相色谱法
10.7120.1470.3140.1780.1170.1210.8950.3570.54798.397.198.0 20.6810.2040.2570.1810.1240.1470.8820.4250.51499.298.999.1 30.4420.1780.3140.4120.2170.2170.8510.4170.64597.098.098.9 40.3170.1970.3210.4570.2570.2490.9170.5980.63298.597.997.5 50.3040.1740.5240.6870.4210.4780.9270.6120.71599.298.999.0 60.3120.1720.5170.6570.4170.5100.9240.6570.72899.198.199.3 P 值＞0.05＞0.05＞0.05＞0.05。