蜡样芽孢杆菌显色培养基配方及使用方法
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蜡样芽孢杆菌显色培养基配方及使用方法蜡样芽孢杆菌显色培养基(Chromogenic Bacillus Cereus Agar )
用途:
用于食品样本中蜡样芽孢杆菌的快速分离和鉴定。
原理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;磷酸氢二钠和磷酸二氢钾为缓冲剂;琼脂是培养基的凝固剂;混合色素与蜡样芽孢杆菌酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上蜡样芽孢杆菌产生绿~蓝绿色的菌落。
配方(每升):
蛋白胨15g
酵母膏粉4g
磷酸氢二钠 2.52g
磷酸二氢钾0.28g
琼脂15g
混合色素 3.25 g
最终pH 7.2±0.2
使用方法:
1、取瓶内干粉40克,用1000ml蒸馏水或纯水溶解,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃15min高压灭菌,冷至50℃,每瓶添加剂(SR0210)中加入1ml无菌水,使之完全溶解,然后加入100毫升培养基中,混匀,倾注灭菌平皿。
2、用无菌生理盐水或磷酸盐缓冲液配制10-1~10-5的样本稀释液按GB/T 4789.2测定。
3、取各稀释液0.1ml接种至蜡样芽孢杆菌显色琼脂平板上涂布或划线。
4、37℃培养24小时,选取适当菌落数的平板进行计数。
5、通过验证试验进一步确认假定性蜡样芽孢杆菌,如氧化酶、革兰氏染色等。
6、报告每克(毫升)食品样本中蜡样芽孢杆菌的数目。