HPLC法测定注射用头孢呋辛钠含量

HPLC法测定注射用头孢呋辛钠含量

摘要：建立反相高效液相色谱法测定注射用头孢呋辛钠中头孢呋辛钠的含量。方法：采用安捷伦C18色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm），醋酸盐缓冲液（取醋酸钠0.68g，冰醋酸6.01g，加水稀释成1000ml，用冰醋酸调节pH值至3.4）-乙睛（85∶15），检测波长为254nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。头孢呋辛钠在0.4～2.0mg?mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.99997）。头孢呋辛钠平均回收率分别为99.5%。结论：本法简便、准确，可用于注射用头孢呋辛钠中头孢呋辛钠的含量测定。

关键词：注射用头孢呋辛钠；含量；测定

注射用头孢呋辛钠为第二代头孢菌素类抗生素。注射用头孢呋辛钠可广泛作用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。注射用头孢呋辛钠适用于敏感细菌造成的感染的治疗，如下呼吸道感染（如急性支气管炎及慢性支气管炎急性发作），生殖泌尿道感染（如肾盂肾炎，膀胱炎和尿道炎），上呼吸道感染（如中耳炎、鼻窦炎、扁桃体炎及咽炎），皮肤及软组织感染（如疖病，脓皮病和脓疱病）等疾病[1-6]。本实验采用高效液相色谱法对注射用头孢呋辛钠中的头孢呋辛钠的

进行了含量测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器：LC3100高效液相色谱仪（安徽皖仪科技股份有限公司）；pHS-2C型精密酸度计（上海精科雷磁厂）；XSYF-D 实验室废水处理设备（北京湘顺源科技有限公司）；ABS 220-4分析天平（德祥科技有限公司）；HX-03超声波清洗器（武汉恒信世纪科技有限公司）；XYF-H 帕恩特超低有机物型超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；EasyGuard保护柱（岛津技迩上海商贸有限公司）；HH-4A数显电子恒温搅拌水浴锅（江苏省金坛市宏华仪器厂）；TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。

1.2 色谱柱：安捷伦C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm）。

1.3 对照品：头孢呋辛钠购自中国药品生物制品检定所。

1.4 试剂：甲醇（沧州正源化工有限公司）、醋酸钠（济南新世纪石化有限公司）、磷酸（嵊州市城溪化工有限公司）、乙腈（龙岩市邦德石油化工贸易公司）、磷酸二氢钠（东光县东瑞化工厂）、冰醋酸（沧州正源化工有限公司）。

1.5 试药：注射用头孢呋辛钠。

2 测定方法确定

2.1 色谱条件

依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[7-11]。流动相：醋酸盐缓冲液（取醋酸钠0.68g，冰醋酸6.01g，加

水稀释成1000ml，用冰醋酸调节pH值至3.4）-乙睛（85∶15），检测波长：254nm，流速：1.0m?min-1。柱温：30℃。理论板数按头孢呋辛钠峰计算应不得低于2000。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取头孢呋辛钠对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

取注射用头孢呋辛钠适量加10ml流动相，密塞，精密称定重量，超声波振荡分别提取10分钟，放冷，精密称定，用流动相补足重量，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。

2.4 专属性试验

分别精密吸取头孢呋辛钠对照品溶液、供试品样品溶液、和高温、光照、酸碱和氧化的强制降解样品溶液各10

μL注入液相色谱仪，按“2.1色谱条件”下方法进行分析，记录色谱图。结果在该色谱条件下所有强制的条件下降解产物与头孢呋辛钠的峰相同保留时间处不存在吸收峰，说明此方法具有较强的专属性。

2.5 精密度试验

精密称取头孢呋辛钠对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为1.0mg?mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.55%，

表明本方法精密度良好。

2.6 对照品的线性考察

精密称取头孢呋辛钠对照品100mg，置50ml容量瓶中，加入流动相溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、10mL，置于10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归。结果表明，头孢呋辛钠在0.4～2.0mg?mL-1范围内呈良好的线性关系。

2.7 重现性试验

称取同一批的注射用头孢呋辛钠样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD 值，结果RSD为0.88%，结果表明此方法的重现性良好。

2.8 准确度试验

精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的头孢呋辛钠对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.5%，RSD=0.72%。结果表明此方法的回收率良好。

2.9 样品稳定性试验

取同一批注射用头孢呋辛钠样品，按2.3项下的供试品制备方法制备供试品，将供试品置室温下放置，分别于第0、2、4、6、8、10小时，精密吸取供试品溶液10？滋l注入液

相色谱仪中，记录色谱图。测定注射用头孢呋辛钠中头孢呋辛钠的RSD=0.65%。结果表明供试品10小时内稳定。

2.10 样品含量测定

依照上述含量测定方法，测定注射用头孢呋辛钠三批样品中头孢呋辛钠的含量，结果三批样品的含量分别为表示量的100.6%、100.1%、99.8%。

3 讨论

分别考察乙腈-水-磷酸溶液（10∶90：0.1），甲醇-水-冰醋酸（40∶60∶0.1），0.01mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调pH至3.5）-甲醇-乙腈（80：10：10），醋酸盐缓冲液（取醋酸钠0.68g，冰醋酸6.01g，加水稀释成1000ml，用冰醋酸调节pH值至3.4）-乙睛（85∶15）不同比例的流动相，结果以醋酸盐缓冲液（取醋酸钠0.68g，冰醋酸6.01g，加水稀释成1000ml，用冰醋酸调节pH值至3.4）-乙睛（85∶15）为流动相为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用醋酸盐缓冲液（取醋酸钠0.68g，冰醋酸6.01g，加水稀释成1000ml，用冰醋酸调节pH值至3.4）-乙睛（85∶15）为流动相为流动相。本实验表明此方法可用于注射用头孢呋辛钠中头孢呋辛钠的含量测定。

参考文献

[1]白林，王晓蕾，王璐，高翠萍.头孢呋辛钠与5种常用输液的配伍稳定性研究[J].中国药师，2008（03）.