血小板计数法

4、位于格线上的酵母菌一般只计此格的上方线及 左方线的菌体。 5、计数方法： 样品中菌数/ml =每小格平均菌数x4000，000x稀释倍数
本实验采用25x16规格，要求数80个小格。 设：每个中格的菌数为A，则 每个小格平均菌（A1+A2+A3+A4+A5)/80
样品中菌数/ml = （A1+A2+A3+A4+A5)/80 x4000,000x稀释倍数
微生物血球计数板直接计数法
基本原理：
此法是利用血球计数板在显微镜下直接 进行测定。 它观察在一定的容积中的微生物的个体 数目，然后推算出含菌数，包括死、活细胞 均被计算在内，还有微小杂物也被计算在内。 这样得出的结果往往偏高。 这种方法常用于个体较大的菌体或孢子。
血球计数板基本构造：
血球计数板是一块特制 的厚型载玻片，载玻片上 有四个槽构成三个平台。 中间的平台较宽，其中间 又被一短横槽分割成两半， 每个半边上各刻有一小方 格网，每个方格网共分九 个大格，中央的一大格作 为计数用，称为计数室。
结果记录
微生物名称 总菌数 个/ml
第一个 第二个 第三个 第四个 第五个 中格 中格 中格 中格 中格
第一次 测定
第二次 测定 平均
测定注意事项
1、测定时，酵母菌液要摇匀，防止酵母凝 聚沉淀。 2、位于格线上的酵母菌一般只计此格的上 方线和左方线上的菌体。 3、活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞 大小的一半时，即可作为两个菌体计数， 若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。
血球计数板的分区与分格
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例一 1大格=16中格 =16X25小格 =400小格 数25x4=100小格
例二 1大格=25中格 =25X16小格 =400小格 数16x5=80小格
材料与仪器
1、待测样品：酵母菌悬液 2、仪器：显微镜，血球计数板，接种环， 盖玻片等
方法与步骤
1、取洁净的血球计数板，在计数室上面盖 上盖玻片。 2、取稀释到一定程度（5-10个酵母/小格） 酵母菌液，从盖玻片边缘滴一小滴，使菌 液自行渗入，计数室内不能有气泡。先在 低倍镜下找到小方格网后，再转换高倍镜 观察并计数。 3、每个样品重复计数2-3次，计数时应不 时调节焦距，才能观察到不同深度的菌体。
计数室刻度有2种： 16中格x25小格 25中格x16小格 它们都是由400各小格组成。 每个大方格边长为1mm,则每个大方格面积为 1mm2 。盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的 高度为0.1mm，所以每个计数室的体积为 0.1x1x1=0.1mm3 ， 每个大格有400个小格，所以每个小格的体积为 0.1/400=1/4000mm3 =1/4000,000ml