细菌、霉菌与酵母菌计数方法,大肠杆菌检测

1、 称取供试品10g ，置0.9%无菌氯化钠溶液100ml 中，用超声仪器使其充分混匀，作为供

试液。

2、 取均匀供试液，进一步稀释成1：10、1：102、1：103等适宜的稀释级。分别取供试液

和连续三级稀释的供试液各1ml ，置平皿中。每稀释级和阴性对照各作3个平皿，

3、 灭菌后的培养基45~50℃水浴加热，待其融化后，倾倒约15ml 于已加入供试液的平皿

中，混匀，待凝固后，倒置培养。

4、 倒置培养箱中培养48小时，分别再24小时及48小时点计菌落数，一般以48小时菌落

数为准。

菌数报告规则 细菌选取平均菌落数再30~300之间的稀释级，霉菌选取平均菌落数在30~100之间的稀释级作为报告均属计算的依据。如有一个稀释级别在30~300（30~100）之间时，将该稀释级的菌落数乘以稀释倍数报告；如果同时有2各稀释级在30~300（30~100）之间时，按下式计算两级比值。

比值=稀释倍数

低稀释级的平均菌落数稀释倍数高稀释级的平均菌落数⨯⨯ 当比值≤2时，以两稀释级的均值报告，当比值＞2时，以低稀释级的平均菌落数乘以稀释倍数报告；如同时有3各稀释级的平均菌落数均在30~300之间时，以后2各稀释级计算级间比值报告；如各稀释级的平均菌落数乘以稀释倍数报告；如各稀释级平均菌落数均在300（100）以上，按最高稀释级平均菌落数乘以稀释倍数报告；如各

细菌数 每1g 不得过1000cfu 。每1ml 不得过100cfu 。

霉菌和酵母菌数 每1g 或1ml 不得过100cfu 。

大肠埃希菌 每1g 或1ml 不得检出。

0.9%无菌氯化钠溶液 取氯化钠9.0g ，加水溶解使成1000ml ，过滤，分装、灭菌。

1、取胆盐乳糖培养基3份，每份100ml ，2份分别加入规定量的供试液，其中1份加入对照 菌50~100个作阳性对照，第三份加入与供试液等量的稀释液作阴性对照。培养18~24小时.阴性对照应无菌生长。

2、取上述3份的培养物各0.2ml ，分别接种至5mlMUG 培养基管内培养，分别于5小时与24小时时，取未接种的MUG 培养基管作本底对照，将各管置365nm-紫外光下观察。阳性对照管呈现荧光，MUG 阳性。供试液的MUG 呈现荧光，MUG 阳性；无荧光，MUG 阴性。

3、然后加数滴靛基质试液与MUG 管内，页面呈玫瑰红色为阳性，呈试剂本色为阴性。