药物分析第(7)章

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重酒石酸去甲肾上腺素
• 【检查】 酮体 取本品，加水溶解并 稀释制成每1ml中约含2.0mg的溶液，照紫 外-可见分光光度法(附录Ⅳ A)，在310nm 的波长处测定，吸光度不得过0.05。
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盐酸去氧肾上腺素
• 【检查】 酮体 取本品2.0g，置100ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀， 取10ml，置50ml量瓶中，用0.01mol/L盐 酸溶液稀释至刻度，摇匀。照紫外-可见分 光光度法(附录Ⅳ A)，在310nm的波长处 测定吸光度，不得大于0.20。
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硫酸沙丁胺醇
• 旋光度 取本品约0.25g，精密称定，置 25ml量瓶中，加水适量使溶解，用水稀释 至刻度，摇匀，依法测定(附录Ⅵ E)，旋 光度为－0.10°至＋0.10°。
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第三节
特殊杂质与检查
三、有关物质的检查
有关物质 1. 盐酸去氧肾上腺素 供试液：20mg/ml甲醇液 对照液：0.1mg/ml甲醇液 层析板：硅胶G板 点样：各点10μl 展开剂：异丙醇-氯仿-浓氨（80∶5∶15） 显色剂：重氮苯磺酸试液 规定：杂斑颜色与对照主斑比较不得更深
重酒石酸去甲肾上腺素：甲无色、乙红色
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肾上腺素
• 【鉴别】 (2) 取本品10mg，加盐酸溶 液(9→1000)2ml溶解后，加过氧化氢试液 10滴，煮沸，即显血红色。
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盐酸异丙肾上腺素
• 【鉴别】 (2) 取本品10mg，加水10ml溶 解后，取溶液2ml，加盐酸滴定液 (0.1mol/L)0.1ml，再加0.1mol/L碘溶液1ml， 放置5分钟，加0.1mol/L硫代硫酸钠溶液4ml， 即显淡红色。
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第二节 鉴别试验
三、 氧化还原反应
放置
肾上腺素
pH3.5
I２ pH6.5 I２
肾上腺素红
异丙肾上腺素红
棕色多聚体
淡红色
盐酸异丙肾
重酒石酸去甲肾
硫代硫酸钠
几乎不被氧化
三者皆氧化为红色
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第二节 鉴别试验
利用此反应区别：
甲：pH3.5邻苯二甲酸氢钾缓冲液 乙：pH6.5邻苯二甲酸氢钾缓冲液
肾上腺素：均为红色
• 丙酮必须不含甲醛成分
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重酒石酸间羟胺
• (2) 取本品约5mg，加水0.5ml使溶解， 加亚硝基铁氰化钠试液2滴、丙酮2滴与碳 酸氢钠0.2g，在60℃的水浴中加热1分钟， 即显红紫色。
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第二节 鉴别试验
六、紫外光谱 七、红外光谱
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盐酸异丙肾上腺素
• (3) 取本品，加水制成每1ml中含50μg的 溶液，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A) 测定，在280nm的波长处有最大吸收，吸 光度约为0.50。 • (4) 本品的红外光吸收图谱应与对照 的图谱(光谱集349图)一致。
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重酒石酸去甲肾上腺素
• 【鉴别】 (1) 取本品约10mg，加水1ml 溶解后，加三氯化铁试液1滴，振摇，即显 翠绿色；再缓缓加碳酸氢钠试液，即显蓝色， 最后变成红色。
9
盐酸去氧肾上腺素
• 【鉴别】 (2) 取本品约10mg，加水 1ml溶解后，加三氯化铁试液1滴，即显紫 色。
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盐酸多巴胺
-H -H
-CH(CH3)2
HO HO HO HO HO
HCl HCl HCl
重酒石酸 去甲肾上腺素 盐酸去氧肾上腺素 盐酸异丙肾上腺素 盐酸多巴胺
3
-H
第一节 结构与性质
• 性质 1. 弱碱性：烃氨基侧链，仲胺氮。 2. 酚羟基特性：邻苯二酚或酚羟基结构。 3. 旋光性：手性碳原子。 4. 紫外吸收特性：苯环，254nm为中心红移 或蓝移。
第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析
1
第一节 结构与性质
• 基本结构
R1 CH OH CH R3 NH R2
• 肾上腺素
CH HO OH OH
CH H
NH
CH3
2
第一节 结构与性质
R1
HO HO HO HO
R2 -CH3
R3
HX
名称 肾上腺素
-H
-H -H -H -H
CH(OH)COOH CH(OH)COOH
药物 肾上腺素 三氯化铁 0.1mol/L盐酸液中显翠绿色， 加氨试液显紫色，紫红色 甲醛－硫酸 红色 淡红色
重酒石酸去甲肾上腺素 翠绿色，加碳酸氢钠试液显蓝 色，红色
盐酸去氧肾上腺素
盐酸异丙肾上腺素 盐酸多巴胺
紫色
玫瑰红，橙红，深棕 红
深绿色，滴加新制5%碳酸氢钠 棕色，暗紫色 液，显蓝紫色，红色 墨绿色，滴加1%氨溶液，显紫 红色
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盐酸多巴胺
• (2) 取本品，加0.5％硫酸溶液制成每 1ml中约含30μg的溶液，照紫外-可见分光 光度法(附录Ⅳ A)测定，在280nm的波长 处有最大吸收。 • (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图 谱(光谱集345图)一致。
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硫酸特布他林
• (2) 取本品，用0.1mol/L盐酸溶液制成 每1ml中含0.1mg的溶液，照紫外-可见分 光光度法(附录Ⅳ A)测定，在276nm的波 长处有最大吸收。 • (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照 的图谱(光谱集668图)一致，如不一致时， 再取本品适量，加无醛甲醇使溶解，置水 浴蒸干后测定。
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盐酸异丙肾上腺素
• 有关物质 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验， 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸溶液 (取磷酸11.5g，用水溶解并稀释至1000ml)-甲醇 (95:5)为流动相；检测波长为280nm。取系统适用 性试验溶液20μl，注入液相色谱仪，间羟异丙肾 上腺素峰与盐酸异丙肾上腺素峰之间的分离度应 大于3.0，盐酸异丙肾上腺素峰的信噪比应大于3。 记录色谱图至主成分峰保留时间的7倍。供试品溶 液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得 大于对照溶液的主峰面积(0.5％)，各杂质峰面积 的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(1.0％)。
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重酒石酸去甲肾上腺素
• 有关物质 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验。用十八烷基 硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05％庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调节 pH值至2.2)为流动相A；乙腈-0.05％庚烷磺酸钠溶液(1:1)(用 磷酸调节pH值至2.4)为流动相B，照下表进行梯度洗脱；检测 波长为280nm；流速为每分钟1.5ml。主成分峰的保留时间约 为11分钟，主成分峰后应出现一个未知降解产物峰与去甲肾上 腺酮峰，去甲肾上腺酮峰的相对保留时间约为1.3，理论板数 按去甲肾上腺素峰计算不低于5000，主成分峰与相邻杂质峰之 间的分离度应符合要求。供试品溶液的色谱图中如有与去甲肾 上腺酮峰保留时间一致的色谱峰，其峰面积乘以0.3后不得大 于对照溶液主峰面积的1/3(0.1％)，其他单个杂质峰面积不得 大于对照溶液主峰面积的1/3(0.1％)；杂质总量不得过0.3％。 供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积1/6倍的峰可 忽略不计。
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第三节
一、酮体杂质检查
特殊杂质与检查
氢化不完全，引入酮体
酮体：310nm有最大吸收
药物：此波长下无吸收
方法：2.0mg/ml样品液→310nm处测定
规定A≯0.05
（
EFra Baidu bibliotek
1% 1cm
=453，限量）
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肾上腺素
• 【检查】 酮体 取本品，加盐酸溶液 (9→2000)制成每1ml中含2.0mg的溶液， 照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A)，在 310nm的波长处测定，吸光度不得过0.05。
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重酒石酸去甲肾上腺素
• 比旋度 取本品，精密称定，加水溶解 并定量稀释制成每1ml中约含50mg的溶液， 依法测定(附录Ⅵ E)，比旋度为-10.0°至 -12.0°。
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盐酸去氧肾上腺素
• 比旋度 取本品，精密称定，加水溶解 并定量稀释制成每1ml中约含20mg的溶液， 依法测定(附录Ⅵ E)，比旋度为-42°至47°。
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盐酸去氧肾上腺素
• 有关物质 避光操作。取本品，加甲醇溶解 并定量稀释制成每1ml中约含20mg的溶液， 作为供试品溶液；精密量取适量，加甲醇稀 释成每1ml中含约0.10mg的溶液，作为对照 溶液。照薄层色谱法(附录Ⅴ B)试验，吸取 上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以异丙醇-三氯甲烷-浓氨溶液 (80:5:15)为展开剂，展开，晾干，喷以重氮 苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑 点，与对照溶液的主斑点比较，颜色不得更 深(0.5％)。
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盐酸克仑特罗
• (2) 取本品，加0.1mol/L盐酸溶液制成 每1ml中含30μg的溶液，照紫外-可见分光光 度法(附录Ⅳ A)测定，在243nm与296nm的 波长处有最大吸收。 • (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照的 图谱(光谱集351图)一致。
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硫酸沙丁胺醇
• (3) 取本品，加水溶解并稀释制成每 1ml中约含80μg的溶液，照紫外-可见分光 光度法(附录Ⅳ A)测定，在276nm的波长 处有最大吸收。 • (4) 本品的红外光吸收图谱应与对照 的图谱(光谱集486图)一致。
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肾上腺素
• 【鉴别】 (1) 取本品约2mg，加盐酸溶 液(9→1000)2～3滴溶解后，加水2ml与三 氯化铁试液1滴，即显翠绿色；再加氨试液 1滴，即变紫色，最后变成紫红色。
7
盐酸异丙肾上腺素
• 【鉴别】 (1) 取本品20mg，加水2ml溶解 后，加三氯化铁试液2滴，即显深绿色；滴加 新制的5％碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变 成红色。
• 【鉴别】 (1) 取本品10mg，加水 1ml溶解后，加三氯化铁试液1滴，溶液显 墨绿色；滴加1％氨溶液，即转变成紫红色。
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盐酸甲氧明
• 【鉴别】 (1) 取本品约1mg，加甲醛硫 酸试液3滴，即显紫色，渐变为棕色，最后 成绿色。
12
硫酸沙丁胺醇
• 【鉴别】 (1) 取本品约20mg，加水 2ml溶解后，加三氯化铁试液1滴，振摇， 溶液显紫色；加碳酸氢钠试液即生成橙黄 色浑浊。
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重酒石酸去甲肾上腺素
• 【鉴别】 (2) 取本品约1mg，加酒石 酸氢钾的饱和溶液10ml溶解，加碘试液1ml， 放置5分钟后，加硫代硫酸钠试液2ml，溶 液为无色或仅显微红色或淡紫色(与肾上腺 素或异丙肾上腺素的区别)。
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第二节 鉴别试验
四、 双缩脲反应
是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄
碱、盐酸去氧肾上腺素鉴别：
D ＋ CuSO4 + NaOH
显蓝紫色
＋乙醚，醚层(紫红色)水层(蓝色) 盐酸麻黄碱 ＋乙醚，醚层(不显色) 盐酸去氧肾上腺素
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盐酸去氧肾上腺素
• 【鉴别】 (1) 取本品约10mg，加水 1ml溶解后，加硫酸铜试液1滴与氢氧化钠 试液1ml，摇匀，即显紫色；加乙醚1ml振 摇，乙醚层应不显色。
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重酒石酸间羟胺
• (3) 取本品，加水制成每1ml中约含 0.1mg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附 录Ⅳ A)测定，在272nm的波长处有最大 吸收。 • (4) 本品的红外光吸收图谱应与对照 的图谱(光谱集294图)一致。
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盐酸甲氧明
• 吸收系数 取本品，精密称定，加水 溶解并定量稀释制成每1ml中约含30μg的 溶液，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅳ A)， 在290nm的波长处测定吸光度，吸收系数 (E1％ 1cm)为133～141。 • (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图 谱(光谱集329图)一致。
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第三节 特殊杂质与检查
2. 肾上腺素
供试液：1mg/ml 液
对照液：0.002ml/ml液 固定相：十八烷基硅烷键合硅胶 流动相：硫酸氢四甲基铵溶液 波长：205nm
理论塔板数按去甲肾上腺素峰计算不低于3000
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肾上腺素
• 有关物质 照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)试验，用 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以硫酸氢四甲基 铵溶液(取硫酸氢四甲基铵4.0g，庚烷磺酸钠1.1g， 0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液2ml，用水溶解并 稀释至950ml)-甲醇(95:5)(用1mol/L氢氧化钠溶液 调节pH值至3.5)为流动相；流速为每分钟2ml，检 测波长为205nm。供试品溶液色谱图中如有杂质峰， 单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(0.2 ％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积 的2.5倍(0.5％)。
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盐酸甲氧明
• 【检查】 酮胺 取本品，加水制成每 1ml中含1.5mg的溶液，照紫外-可见分光 光度法(附录Ⅳ A)，在347nm的波长处测 定，吸光度不得过0.06。
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第三节
二、光学纯度检查
特殊杂质与检查
• 检查对映体控制药品质量
如肾上腺素在盐酸溶液中，样品浓度 20mg/ml,比旋度为-50.0°~ - 53.5° 对映体分离采用色谱法和电泳法。
4
第二节 鉴别试验
一、 三氯化铁反应 绿色，加入碱液显紫红色。 二、甲醛－硫酸反应 酚羟基的本类药物，与甲醛在硫酸中反应，形 成具有醌式结构的有色物。 肾上腺素 红色 盐酸异丙肾上腺素 棕色至暗紫色 重酒石酸去甲肾上腺素 淡红色 盐酸去氧肾上腺素 玫瑰红→橙红→深棕红
5
第二节 鉴别试验
• 与三氯化铁反应、与甲醛－硫酸反应
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盐酸麻黄碱
• 【鉴别】 (1) 取本品约10mg，加水1ml 溶解后，加硫酸铜试液2滴与20％氢氧化钠 溶液1ml，即显蓝紫色；加乙醚1ml，振摇 后，放置，乙醚层即显紫红色，水层变成 蓝色。
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第二节 鉴别试验
五、 Rimini试验 • 脂肪族伯胺的专属反应（间羟胺） • 供试品加水溶解，加亚硝基铁氰化钠试液、 丙酮、碳酸氢钠，加热，显红紫色。