结核分枝杆菌培养及初始耐药监测

结核分枝杆菌培养及初始耐药监测

作者：侯史文方宏安宋秀兰丁曙光

【关键词】杆菌

近年来，结核病流行又呈持续上升趋势，结核菌耐药性的增加和天然耐药株的产生是主要原因之一。结核菌初始耐药趋势可以反映某一地区结核病防治工作实施效果的重要指标。为了掌握嘉兴市肺结核病初始耐药情况，作者对181例新发现痰涂片抗酸杆菌阳性肺结核患者，进行结核菌培养及药敏监测，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2005年1月2006年1月，本院门诊登记送检的新发现痰涂片抗酸杆菌阳性肺结核病患者181例，男101例，女80例；年龄16～60岁。并且未经过任何抗结核药物治疗，对上述患者进行痰结核菌培养及初始耐药监测。

1.2 方法 (1)痰涂片检查：对临床可疑肺结核病患者在治疗

前分3次收集痰液标本共3份，每份痰标本3～5ml。即时取样制作痰涂片，抗酸染色后直接镜检，涂片抗酸染色阳性标本做结核菌培养。 (2)痰结核菌培养：①培养基：酸性罗氏（L-J）培养基（省疾病控制中心）。

②抗结核药：链霉素（SM）、异烟肼（INH）、利福平（RFP）、乙胺丁酸（EMB）。③药物浓度：按《结核病诊断细菌学检验规程》［１］绝对浓度间接法。药物浓度为SM ：10 μg/ml、100 μg/ml； INH：1 μg/ml、10 μg/ml；RFP：50 μg/ml、250 μg/ml； EMB： 5 μg/ml、50 μg/ml。

1.3 培养及药敏方法（1）送检标本用4%氢氧化钠处理后，接种于酸性罗氏（L-J）培养基2支，37℃培养，于接种3～7d后观察。以后每周观察菌落生长情况，有菌落生长者，经抗酸染色确认并做药敏试验。（2）从L-J培养基上刮取新鲜菌菌落研磨制成浓度0.1mg/ml 菌液，分别吸取0.1ml接种于4种高、低浓度含抗结核药物培养基中(表1)，再接种1支无药对照培养基，置37℃培养，每周观察1次，4周报告结果。

1.4 耐药判定与评价标准 WHO推荐药敏比例法［２］：含药培养基菌落数/对照不含药培养基菌落数≥1为耐药，＜１为敏感，SM、INH、RFP、EMB采用同一标准。耐药患者中，同时对主要抗结核药物INH、RFP两种或含INH、RFP两种以上药物的耐药为多药耐药。

2 结果

2.1 培养阳性率 181例新发现痰涂片抗酸杆菌阳性肺病结核患者痰结核菌培养阳性172例，培养阳性率95.03%。

2.2 初始耐药情况 172例培养结核菌株在常用4种抗结核药（S、H、R、E）中，高、低浓度均不生长（全敏感）109例，占6

3.37%；耐1种以上63例，初始耐药率36.63%。 2.3 耐药频率 172例培养结核菌株对4种抗结核药（SM、INH、RFP、EMB）的耐药频率见表1。

2.4 单一或多药耐药率 172例培养结核菌株中耐一种药35株，耐2种以上28株，见表2。

表1 172例培养阳性菌株初始耐药频率（略）

表2 172例培养阳性菌株耐药情况分析（略）

3 讨论

实验室进行结核菌培养及初始耐药监测，对及时掌握结核病疫情和耐药情况，具有非常重要的意义。作者对嘉兴市近2年新发现痰涂片阳性的181例肺结核患者进行痰结核菌培养，172例培养阳性，