酶工程复习精华

酶工程复习精华

化学修饰酶:酶蛋白分子的主链进行“切割”、“剪切”以及在侧链上进行化学修饰，使其结构、性质改变后的酶

“主—客体”化学:主体与客体通过配位键或其他次级键形成稳定复合物的化学领域。蛋白质的化学修饰:凡是通过化学基团的引入或除去而使蛋白质共价结构发生改变的过程. 交联剂:具有两个反应活性部位的双功能基团可在相隔较近的两个氨基酸残基间，或酶与其它分子间发生交联反应的一类有机试剂交联修饰:使用双功能基团试剂将酶分子间、亚基之间或分子内不同肽链部分间进行共价交联的酶的化学修饰。

蛋白质的稳定性:蛋白质抵抗各种因素的影响、保持其生物活力的能力。

蛋白质工程:是指用基因操纵技术高度专一性地改变目标蛋白质。

固定化修饰:通过酶表面的酸性或碱性残基，将酶共价连接到惰性载体上，由于酶所处的微环境发生改变，使酶的最适pH、最适温度和稳定性发生改变。

固定化酶(细胞)的活力:指固定化酶(细胞)催化某一特定化学反应的能力，其大小可用在一定条件下它所催化的某一反应的反应初速度表示

偶联率:偶联率=(加入蛋白活力—上清液蛋白活力),加入蛋白活力×100,

活力回收:活力回收=固定化酶总活力,加入酶的总活力×100,

相对活力:相对活力=固定化酶总活力,(加入酶总活力—上清液中未偶联酶活力)×100, 固定化酶(细胞)的半衰期:指在连续测定条件下，固定化酶(细胞)的活力下降为最初活力一半所经历的连续工作时间，以t表示 1,2

酶工程:酶的生产与应用的技术过程称为酶工程

水活度(Aw):是指在反应体系中水的逸度与纯水逸度之间的比值。

分子印迹酶:通过分子印迹技术可以产生类似于酶的活性中心的空腔，对底物产生有效的结合作用，同时在结合部位的空腔内诱导产生催化基团，并与底物定向排列，制备出人工模拟酶。

抗体酶:具有催化能力的单克隆抗体，是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物。核酶:具有催化活性的酶性RNA。

脱氧核酶:脱氧核酶都是单链DNA分子通过自身卷曲、折叠形成的三维结构，在某些特殊的辅助因子的作用下与底物结合并发挥催化功能。

表面分子印迹:在某些载体表面产生分子印记空腔或进行表面修饰产生印记结合部位的过程。生物印迹:指以天然的生物材料(如蛋白质和糖类物质)为骨架，在其上进行分子印记而产生对印记分子具有特异性识别空腔的过程。

分子印迹:以一种分子充当模板，其周围用聚合物交联，当模板分子除去后，此聚合物就留下了与此分子相匹配的空穴。如果构建合适，这种聚合物就像“锁”一样对钥匙具有选择识别作用，这种技术被称为分子印迹。

酶分子的合理设计:利用各种生物化学、晶体学、光谱学等方法获得有关酶分子的结构、特性和功能的信息，并搞清结构和功能的关系，然后以此为依据，采用改变酶分子中个别氨基酸残基的方法对酶分子进行改造，产生具有新性状的酶分子，因而该方案称为酶分子的合理设计。

酶分子的非合理设计:在事先不了解酶分子三维结构信息和催化机制，对酶的结构与功能的相关性知之甚少的情况下，人为地改造特定的进化条件，在体外模拟漫长的自然进化过程，使基因发生多种变异，最后定向选择或筛选出所需性质或功能的突体酶，该策略称为酶分子的非合理设计。

模拟酶:用人工方法合成的具有活性中心和催化作用的非蛋白质结构的化合物。

肽酶:就是模拟天然酶活性部位而人工合成的具有催化活性的多肽。

半合成酶:是以天然蛋白或酶为母体，用化学或生物学方法引进适当的活性部位或催化基团，或改变其结构从而形成一种新的“人工酶”。

光学活性化合物:是指那些化学组成相同，但是立体结构不同而成为恰如人的左右手一样互成对映体的化

合物，也称为手性化合物。

反相胶束:表面活性剂溶于非极性的有机溶剂中，当其浓度超过临界胶束浓度(CMC)时，在有机溶剂内形成的胶束叫反胶束，或称反相胶束。

必需水:在有机介质中，酶分子需要一层水化层以维持其完整的空间构象，一般将维持酶分子完整空间构象所必须的最低水含量称为必需水。

化学酶工程:也可称为初级酶工程，是指天然酶、化学修饰酶、固定化酶及人工模拟酶的研究和应用。生物酶工程:指利用酶学和以基因重组技术为主的现代化分子生物学技术相结合，设计和生产酶的技术，也称高级酶工程。

固定化酶:是指固定在水不溶性的载体上，并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。固定化细胞:固定在载体上并在一定的空间范围内进行生命活动的细胞称为固定化细胞.该细胞能进行正常的生长、繁殖和新陈代谢，又称固定化活细胞或固定化增殖细胞。

何为酶工程,由哪几个部分组成,

酶工程是生物工程的重要内容之一，是随着酶学研究迅速发展，特别是酶的应用扩大使酶学和工程学相互渗透结合、发展而形成的一门新的技术学科，是酶学，微生物学的基本原理与化学工程的有机结合而产生的边缘科学技术。

当代酶工程主要指自然酶制剂在工业上的大规模应用，包括4个组成部分:酶的生产、酶的分离纯化、酶的固定化、生物反应器

酶的结构有何特点,

因多数酶都没蛋白质(少数RNA),所以酶的结构特点必遵循蛋白质空间结构，即包含一级结构到四级结构。一级结构:具一定氨基酸排列顺序的多肽链骨架;

二级结构:一级结构中由相近氨基酸残基靠氢键作用形成的螺旋、转角、折叠、卷曲等; 三级结构:在二级结构基础上进一步进行分子盘曲形成包括主侧链的专一三维排列

四级结构:指低聚蛋白中各折叠多肽链在空间的专一三维排列

何为活性中心,酶的作用机制有哪几种学说,

活性中心:酶分子上具有一定空间构象，基团集中，直接参与底物结合并与酶的催化作用直接有关的部位作用机制:(1)锁钥学说，即该学说认为酶似一把锁，底物或其部分结构像钥匙，能专一性地插入到酶的活性中心;(2)三点附着学说，即只有当底物与酶活性中心有关基团有三点相互匹配时才能使酶作用于底物;(3)诱导契合学说，即当底物与酶结合后，使得酶的构象发生相应改变而更有利于酶的催化基团与底物的敏感键正确契合

白质的粗分离过程包括哪些步骤,如何进行,

(一)材料选择和细胞抽提液制备

(1) 选择材料选含目的蛋白高，易获得的材料

(2) 细胞破碎及抽提液制备细胞破碎常采用机械破碎。然后匀浆制备抽提液

(3) 膜蛋白的释放加入相应缓冲液和抽提剂(各种螯合剂、去污剂，如EDTA)进行抽提 (4) 胞外酶分离可采用高速离心或过滤去杂质，若含有核酸，可加入核酸酶消化之 (二)蛋白质的浓缩和脱盐

浓缩通常用沉淀法(盐析沉淀或有机溶剂沉淀)、吸附法(离子交换吸附)、干胶吸附法、渗透浓缩法.脱盐通常用透析法、纤维过滤透析法和分子筛层析法。

(三)沉淀法分级蛋白质常用方法为盐析沉淀或有机溶剂沉淀.

影响酶活力的因素有哪些,

底物浓度、酶浓度、产物浓度、PH、温度、抑制剂、激活剂

稳定天然酶的方法主要有哪些

(1)固定化 (2)非共价修饰(3)化学修饰(4)蛋白质工程

怎样进行蛋白质的大规模分离纯化，可采取哪些方法

(一)蛋白质的来源及释放:对于大规模纯化来说，以微生物为来源较好。

(二)分离和浓缩:固-液分离是酶分离的中心环节，可用离心、过滤、双水相体系萃取、超滤和沉淀法，分离、浓缩目标蛋白。浓缩技术:常用的大规模操作的浓缩技术有两种:沉淀法、超滤法。 (三)大规模色谱技术:

1)离子交换色谱:大规模纯化中最有用的一步，分辨率高，纯化规模也易于扩大，当样品体积很大时，分批吸附和洗脱能获得成功。

2)凝胶过滤:

3)疏水色谱:琼脂糖是最常用的疏水吸附剂，吸附蛋白质的容量很大。

4)亲和色谱:从复杂混合物中纯化蛋白质的最好方法。用固定化染料为配体的亲和色谱用于很多酶的大规模纯化。

5)HPLC:用于大规模纯化蛋白质最有潜力。

固定化酶与游离酶相比，具有哪些优缺点

优点:1)极易将固定化酶与底物、产物分开;2)可以在较长时间内进行反复分批反应和装柱连续反应;3)在大多数情况下，能够提高酶的稳定性;4)酶反应过程能够加以严格控制;5)产物溶液中没有酶的残留，简化了提纯工艺;6)较游离酶更适合于多酶反应;7)可以增加产物的收率，提高产物的质量;8)酶的使用效率提高，成本降低。

缺点:1)固定化时，酶活力有损失;2)增加了生产的成本，工厂初始投资大;3)只能用于可溶性底物，而且较适用于小分子底物，对大分子底物不适宜;4)与完整

菌体相比，不适宜于多酶反应，特别需要辅助因子的反应国5)胞内酶必须经过酶的分离过程。

固定化酶的制备原则是什么

1)必须注意维持酶的催化活性及专一性:必须注意酶活性中心的氨基酸残基不发生变化，酶与载体的结合部位不应当是酶的活性部位;要尽量避免那些可能导致酶蛋白高级结构破坏的条件;固定化时要采取尽量温和的条件，尽可能保护好酶蛋白的活性基团。

2)为使固定化更有利于生产的自动化、连续化。其载体必须有一定的机械强度，不能因机械搅拌而破碎或脱落。

3)固定化酶应有最小的空间位阻，尽可能不妨碍酶与底物的接近，以提高产品的产量。

4)酶与载体必须结合牢固，从而使固定化酶回收贮藏，利于反复使用。

5)固定化酶应有最大的稳定性，扎选载体不与废物、产物或反应液发生化学反应。

6)固定化酶的成本要低，以利于工业使用。

酶蛋白侧链的修饰主要包括哪些内容

饰反应主要分为酰化反应、烷基化反应、氧化和还原反应、芳香环取代反应等类型。

1)羧基的化学修饰 2)氨基的化学修饰3)精氨酸胍基的化学修饰4)巯基的化学修饰5)组氨酸咪唑基的化学修饰6)色氨酸吲哚基的化学修饰7)酪氨酸残基和脂肪族羟基的化学修饰8)甲硫氨酸甲硫基的化学修饰

酶的化学修饰在结构与功能研究中有何应用

(1)研究酶空间结构(2)确定氨基酸残基的功能(3)测定酶分子中某种氨基酸的数量此外，在测定酶的氨基酸序列和研究别构酶时，许多方法也都是以化学修饰为基础。

按照模拟酶的属性，模拟酶可分为哪些种类，有何特点

人工模拟酶可分为:1)主-客体酶模型，包括环糊精、冠醚、穴醚、杂环大环化合物和卟啉类;2)胶束酶模型;3)肽酶;4)半合成酶;5)分子印记酶模型;6)抗体酶等。

制备分子印迹聚合物的过程一般包括哪些步骤

1)选定印记分子和单体，让它们之间充分作用;2)在印记分子周围发生聚合反应;3)将印记分子从聚合物中抽提出去。于是，此聚合物就产生了恰似印记分子的空间，并对印记分子产生识别能力。

请写出酶固定化的主要方法及各方法的优缺点

A( 非共价结合法

(1)结晶法:

优点:能提供非常高的酶浓度，进而提高了单位体积活力，缩短了反应时间。

缺点:在不断重复循环中，酶有损耗，从而使得固定化酶浓度降低

(2)分散法:

优点:方法简单，可直接将干粉悬浮于溶剂中，并且可通过过滤和离心将酶进行分离和再利用缺点:若分布不好，将引起传质现象;且目前还没有完善的酶粉末的保存状况和体系，易导致失活 (3)物理吸附法:

优点:酶活性中心不易破坏，高级结构变化少，酶活力损失少

缺点:酶与载体相互作用弱，酶易脱落

(4)离子结合法:

优点:操作简单，处理条件温和高级结构及活性中心不易破坏，酶活回收率高

缺点:载体与酶结合力弱，易受缓冲液种类和pH的影响，高离子强度条件下酶易脱落，得到稳定的固定化微生物较难

B( 化学结合法

1、共价结合法:

优点:酶与载体结合牢固，不易因底物浓度高和盐类存在而脱落

缺点:反应条件苛刻，操作复杂，而且因反应条件激烈会引起酶高级结构的变化，破坏活性中心，不能得到比活力高的固定化酶，且回收率也低

2、交联法:

优点:不需使用载体

缺点:反应条件激烈，酶活回收率较低

C( 包埋法:

优点:一般不需要与酶蛋白氨基酸进行结合反应，很少改变酶的高级结构，酶活回收率高缺点:若反应条件设计不当，酶易失活，该法只适合作用于小分子底物和产物的酶，反之不适合固定化酶与自由酶相比性质有何改变

固定化是一种化学修饰，酶本身的结构必然受到影响，同时，酶固定化后，其催化作用由均相移到异相，由此带来的扩散限制效应、空间障碍、载体性质造成的分配效应等因素必然对酶的性质产生影响。

(1)固定化后酶活性变化:固定化酶的活力在多数情况下比天然酶小(有个别相反情况，但很少)，其专一性也发生改变。

(2)固定化对酶稳定性的影响:a固定化表现在热稳定性提高b对各种有机试剂及抑制剂稳定性提高c对不同pH稳定性，对蛋白酶稳定性，储藏稳定性和操作稳定性一般较游离酶高

(3)固定化酶的最适温度变化:由于固定化后热稳定性高，所以最适温度也较游离酶高，有利于反应

(4)固定化酶的最适pH变化:酶固定化后，对底物作用的最适pH和pH-活性曲线常常发生偏移。

(5)固定化酶的米氏常数的变化:固定化酶的表观米氏常数随载体的带电性能变化。评价固定化酶(细胞)的指标有哪些

1)固定化酶(细胞)的活力、2)偶联效率及相对活力、3)固定化酶(细胞)的半衰期非水介质中酶催化的选择性有何特点

底物特异性:和水溶液中的酶催化一样，酶在有机溶剂中对底物的化学结构和立体结构均有严格的选择性。对映体选择性:指酶识别外消旋化合物中某种构象对映体的能力，这种选择性是由两种对映体的非对映异构体的自由能差别造成的。

位置选择性;酶能够选择性催化底物中某个区域的基团发生反应。

化学键选择性。

如何控制酶蛋白修饰反应的专一性,

(1)试剂的选择:选择试剂在很大程度上要依据修饰目的，修饰的部位和程度一般可用选择适当的试剂和反应条件来控制;在选择试剂时，还必须考虑反应生成物容易进行定量测定;试剂的大小也要注意，一般来说，试剂的体积小一些不宜，这样既能保证修饰反应顺利进行，又可减少因空间障碍而破坏蛋白质分子严密结构的危险。

(2)反应条件的选择:反应条件应尽可能在保证蛋白质特定空间构象不变或少变的情况下进行。反应的温度、pH都要小心控制，反应介质和缓冲液组成也要有所考虑。

(3)反应的专一性:若修饰剂专一性较差，除控制反应条件外，还可利用其他途径来实现修饰的专一性。如利用蛋白质分子中某些基团的特殊性;选择不同的反应pH;利用某些产物的不稳定性;亲和标记;差别标记;利用蛋白质状态的差异化学修饰酶在医药和生物技术中有何应用

在医药方面，化学修饰可以提高医用酶的稳定性，处长它在体内的半衰期，抑制免疫球蛋白的产生，降低免疫原性和抗原性。

(1)酶的表面化学修饰:

迄今，已有100多种蛋白质(其中许多是酶)被修饰后在临床应用中显出许多优良特性，如稳定性提高;体内半衰期延长;免疫原性和毒性降低或消除;提高膜渗透性;改善在体内的生物分布与代谢行为;提高疗效;增加在有机溶剂中的溶解度和耐有机溶剂变性的能力等。酶的化学修饰也在生物传感器方面发挥越来越大的作用。

(2)酶分子内部修饰:将猪胰岛素转变成有胰岛素。

(3)结合定点突变的化学修饰:通过一些可控制的方法在酶或蛋白质特殊位点引入特定分子来修饰酶或蛋白质，结合定点突变引入一种非天然氨基酸侧链来进行化学修饰，从而得到一些新颖的酶制剂。谈谈引起酶蛋白不可逆失活的原因和机理

(1)蛋白水解酶和自溶作用:蛋白水解酶可催化肽键水解，当蛋白质底物也是蛋白水解酶时，就会发生自我降解现象，即自溶。

(2)聚合作用:加热蛋白质水溶液会形成沉淀.

(3)极端pH:肽键水解反应容易在强酸或中等pH及高温的条件下发生，引起不可逆失活。

(4)氧化作用:氧分子、H0和氧自由基是常见的蛋白质氧化剂，各种氧化剂能氧化带芳香族侧链的氨基22

酸以及蛋氨酸、半胱氨酸、胱氨酸残基，使酶失活。

(5)表面活性剂和去污剂:其在低浓度下能使蛋白质发生强烈的相互作用，导致蛋白质不可逆变性

(6)变性剂:1)脲和盐酸胍;2)高浓度盐3)螯合剂4)有机溶剂。这些变性剂使蛋白质变性，空间构象改变使酶蛋白失活

2+2+2+(7)重金属离子和巯基试剂:已知重金属离子(如Hg、Cd、Pb)能与蛋白质的巯基反应(将其转化为硫醇盐)，也能与组氨酸和色氨酸残基反应。此外，银或汞能催化水解二硫键。巯基试剂能通过还原二硫键使酶失活。

(8)热:热失活通常是两步过程:酶可逆热伸展使其反应基团和疏水区域暴露，

随后相互作用导致不可逆失活。

(9)冷冻和脱水:在冷冻过程中，溶质(酶和盐)随着水分子的结晶而被浓缩，引起酶微环境中pH和离子强度的剧烈改变，引起失活。

(10)辐射作用:电离辐射对蛋白质分子及其周围水分子产生的化学变化类型是

相似的。酶蛋白稳定的分子原因有哪些

1)金属离子、底物、辅因子和其他低分子量配体的结合作用2)蛋白质-蛋白质

和蛋白质-脂的作用3)盐桥和氢键4)二硫键5)对氧化作用敏感的氨基酸含量较低6)氨基酸残基的坚实装配7)疏水相互作用影响核酶活性的因素有哪些, 修饰基团、核酶自身的碱基成分

非水相酶的催化作用有何特点

1)增强难溶于水的反应物的溶解度;2)在有机介质中以身试法反应平衡，可以

使酶促水解反应逆向进行;3)酶制剂易于回收再利用;4)在有机溶剂中可增强酶的稳定性;5)在有机党课中可改变酶的选择性;6)不会或很少发生微生物污染。

非水酶学中的反应介质包括哪些

(1)水-有机溶剂单相系统(2)水-有机溶剂两相系统(3)含有表面活性剂的乳液

或微乳液系统。 (4)微水有机溶剂单相系统(5)无溶剂或少溶剂反应系统(6)超临界流体系统(7)离子液体(8)气相反应介质

有机溶剂对酶的催化活力的影响表现在哪些方面

(1)有机溶剂对酶的结合水的影响 (2)有机溶剂对酶的影响:1)有机溶剂对酶的动态的影响2)溶剂对酶结构的影响3)溶剂对酶活性中心的影响4)酶活性和溶剂属

性的定量关系模型(3)溶剂对底物和产物的影响(4)溶剂对酶活性和选择性的调节和控制

怎样进行有机溶剂中酶活性和选择性的调控

选择性曾被看成是酶的一个固有特性，要改变其选择性，就要改变酶分子自身，比如通过点突变。只要酶是在水中发挥作用，或者说当反应介质固定不变时，这一概念是正确的。许多文献报道，当从一种溶剂换到另一种溶剂中时，酶的各种选择性(包括底物选择性、区域选择性、化学选择性、对映体选择性和潜手性选择性等)都会发生变化。

底物选择性是指酶辨别两种结构相似底物的能力，这常常是基于两种底物之间疏水性的判别。酶的区域选择性和化学选择性也受到溶剂的控制。

溶剂可以显著影响甚至逆转酶的对映体选择性和潜手选择性。

分子印迹酶的方法主要有哪些

要想制备出具有酶活性的分子印记酶，选择合适的印记分子是相当重要的。目前，所选择的印记分子主要有底物、底物类似物、酶抑制剂、过滤态类似物以及产物等。

抗体酶的制备方法有哪些

1)稳定过渡态法， 2)抗体与半抗原互补法 3)熵阱法4)多底物类似物法5)抗体结合部位修饰法 6)蛋白质工程法 7)抗体库法

抗体酶活性部位

抗体酶活性部位即抗体的结合部位。阐明抗体结合部位的氨基酸残基对抗体的结合及催化作用的重要性主要有两种方法:

一是定点突变;即蛋白质工程法。用此法可精确改变蛋白质肽链上的任一氨基酸残基，因此，可用来阐明某一氨基酸残基在抗体结合和催化中的作用。

二是化学修饰:一般原理同样适用于抗体酶。选择性化学修饰抗体酶可以改善抗体酶的性质，如提高其活力、改变专一性等。

常见的小分子核酶有哪几种，有何结构特点

有4种:外向锤头型、发夹型、HDV、VS核酶。

前两种研究较多。小分子核酶有一些共同的特征，与大分子核酶相比分子量小，在各种情况下经由它们产生的催化作用都将产生5'-羟基末端和2，3-环状磷酸基末端。

1)锤头型核酶包括一个催化中心和三个螺旋区，此三个螺旋区的核苷酸序列变化较大。

2)发夹型核酶发夹结构经两个由铰链结构连接的结构域组成，其中包括从H1

到H4四个碱基对螺旋区和A、B两个不成对的袢。

3)HDV核酶是自然界存在的最快速的RN催化剂(比锤头型的自我切割效率高约100倍) 根据其催化功能可将脱氧核酶分为哪几类

1)具有RNA切割活性，2)具有DNA连接酶活性，3)具有卟啉金属化酶和过氧化酶活性2，4)具有DNA水解活性，5)具有DNA激酶活性，6)具有N2糖基化酶活性，7)具有DNA戴帽活性。

蛋白质定向进化的多样性的基本方法有哪些

1)易错PCR:指利用TaqDNA聚合酶不具有3'到5'校正功能的特点，在特定条件下对待进化酶进行PCR扩增时，以较低的频率向目的基因中随机引入突变的一种技术。

2)DNA改组:又称有性PCR，是将一级密切相关的序列(通常是进化上相关的DNA 序列或曾筛选出的性能改进的突变序列)片段化，再通过重组创造新基因的方法。

3)族改组:将DNA改组用于一组同源基因或进货上相关的基因时，称为“族改组”，有时也稀烂为“DNA”族改组。族改组涉及一族同源序列或进货上相关的基因的嵌合，最典型的是相关种类的同一基因或单一种类的相关基因的嵌合。

4)体外随机引动重组(RPR):以单链DNA为模板，以一套合成的随机序列为引物，先扩增出与模板不同部位有一定互补的大量短DNA片段，由于碱基的错配和错误引导，在这些短DNA片段中会有少量的点突变，在随后的PCR反应中，它们互为模板和引物进行扩增，直至合成完整的基因。

5)交错延伸:在用PCR同时扩增多个拟重组的模板序列时，把常规的退火和延伸合并为一步，并极大地缩短反应时间，从而只能合成非常短的新生链，经变性的新生链再作为引物与体系同时存在的不同模板退火而继续延伸。

谈谈自然界蛋白质进化机理

进化的第一原因是基因突变。自然界中的蛋白质进化是通过遗传物质再组织而表现出各种蛋白质重排来实现的，主要形式有复制、环状变换、融合、大片段的缺失和插入，以创造出全新的结构组合，并赋予新的功能。这些遗传物质再组织的结果创造了蛋白质新的序列空间，促进了进化。

1)基因复制:可以在转座、染色体DNA复制或者减数分裂产生不等价交换时发生，复制的可能是一个基因、一段染色体片段或者全基因组。

2)串联复制:与局部分开复制的产物相反，基因的串联复制导致两个或多个基因产物表达于一个多肽链中，形成串联产物。

3)环状变换:蛋白质的环状变换导致其N端和C端在已有的结构框架内重新定位。

4)寡聚化:可以调节一个蛋白质的活性。

5)基因融合:全基因的融合使产生共价连接的多功能酶复合物比单个酶之间非共价寡聚化更具直协调性。6)结构域募集:单一蛋白亚基或结构域重组，并由此产生多功能的蛋白质，统称为结构域募集。

7)外显子改组。