肝胆消炎片的质量控制研究

肝胆消炎片的质量控制研究

发表时间：2015-08-24T14:14:46.730Z 来源：《卫生部公告》2015年第4期供稿作者：林子安1 ，张健民1 ，曾志坚2 ，蒋三员1 ，余[导读] 江门市新会中医院江门市药品检验所肝胆消炎片是我院自行研制的纯中药制剂，由黄芩、柴胡、金钱草、银花、茵陈和大黄等多种中药制成。

林子安1 ，张健民1 ，曾志坚2 ，蒋三员1 ，余香1

(1.江门市新会中医院，广东江门529100；2.江门市药品检验所广东江门 529030)

摘要：目的建立肝胆消炎片的质量控制方法。方法用薄层色谱法（TLC）对制剂中黄苓和大黄进行定性鉴别；高效液相色谱法（HPLC），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（45﹕55﹕0.2）为流动相；检测波长设为315 nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000，测定黄苓苷的含量。结果薄层色谱鉴别斑点明显；高效液相色谱法测定含量，黄苓苷在0.40~4.00 μg范围内呈良好的线性关系(r =0.9996)，平均加样回收率为95.52%，RSD=1.16%。结论该方法简便准确、重现性良好，可有效控制肝胆消炎片制剂质量。

关键词：肝胆消炎片﹕质量控制

文献分类号：文献标识码：

肝胆消炎片是我院自行研制的纯中药制剂，由黄芩、柴胡、金钱草、银花、茵陈和大黄等多种中药制成，具有疏肝利胆、清热解毒的功效，临床主要用于治疗急慢性胆囊炎等疾病，发挥了良好的临床治疗效果。该制剂虽然应用多年，但至今对于内在质量的控制方法未作过探讨。黄苓是制剂方剂中主要组成药材之一，黄苓苷为黄苓中的主要有效成分[1]，因此，本文拟采用薄层色谱法[2]，对肝胆消炎片中黄苓和大黄进行定性、高效液相色谱法对黄苓苷进行定量，控制制剂成品内在质量，结果满意。

1 仪器与试药

1.1 仪器

安捷伦1200高效液相色谱仪。

1.2 试药

黄苓苷对照品（批号：110756-200110中国药品生物制品检定所）；硅胶G(青岛海洋化工有限公司)；肝胆消炎片（批号：20111016、20120526、20121108）和缺黄苓的肝胆消炎片阴性样品均由我院提供；甲醇：色谱纯；磷酸、甲醇，分析纯，（广州化学试剂厂）；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1黄芩的薄层色谱鉴别

取本品20片，刮去外层包衣，研成细粉，称取粉末5 g，加甲醇15 ml浸泡2-3h，时加

振摇，静置，取上清甲醇液，残渣加再甲醇5 ml洗涤，静置，取上清甲醇液，合并甲醇液，置水浴蒸发浓缩至2-3 ml，作为供试品溶液。另取黄芩对照药材粉末1 g及缺黄芩的阴性对照品粉未5 g，同法制成对照药材溶液及阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液2~3 ?l，分别点于同一含甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5﹕3﹕1﹕1)为展开剂，展开，取干，晾干，喷以1%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。而阴性对照品溶液无相应的斑点。

2.2 大黄的薄层色谱鉴别

取2.1黄芩的薄层色谱鉴别供试品溶液作为供试品溶液。另取大黄对照药材1 g及缺大黄的阴性对照品粉未5 g，同法制成对照药材溶液及阴性对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液2~3 ?l，分别点于同一含甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-乙酸乙酯-水（4﹕1﹕5）为展开剂，展开，取出，晾干，置氨气中熏后，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。而阴性对照品溶液无相应的斑点。

2.3 黄苓苷的含量测定

2.3.1色谱条件: 参考复方鱼腥草片的含量测定条件[2]，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（45﹕55﹕0.2）为流动相；检测波长设为315 nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。

2.3.2 对照品溶液的制备: 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含黄芩苷20 ?g的溶液，即得。

2.3.3 供试品溶液制备: 取本品，除去包衣，研细，精密取粉末0.1 g，置50 mL容量瓶中，加70%乙醇35 mL，超声处理30min，放冷，加70%乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3.4色谱条件与检测波长选择: 参考复方鱼腥草片的含量测定条件，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（45﹕55﹕0.2）为流动相；检测波长设为315 nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。照上述方法，黄芩苷与肝胆消炎片中其它成分均能达到良好的分离，阴性无干扰结果见图1、2、3。

图1 黄芩苷对照品的高效液相色谱图图2 肝胆消炎片中黄芩苷的高效液相色谱图图3 缺黄芩阴性样品的高效液相色谱图2.3.5 线性关系考察: 精密量取40 ug/mL的黄芩苷对照品溶液，分别精密吸取1、2、4、6、8、10 ul，注入高效液相色谱仪，记录峰面积，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：y = 83.498x – 0.3522，相关系数r =0.9996。

2.3.6 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 ?l，注入液相色谱仪，测定，即得。

2.3.7精密度试验: 分别精密吸取同一供试品溶液，连续重复进样6次。结果精密度良好，RSD=0.16％。

2.3.8精密度试验: 分别精密吸取同一供试品溶液，连续重复进样6次。结果精密度良好，RSD=0.16％2.3.9稳定性试验: 分别精密吸取同一供试品溶液，于配制后0、2、4、6、8、12 h内进样测定，RSD=0.65％。结果表明，供试品溶液在12h基本稳定。

2.3.10 重复性试验: 分别精密称取同一批样品各6份，按供试品溶液制备方法制备，测定黄芩苷含量，RSD=1.55％。结果表明本法重复性良好。

2.3.11 回收率试验: 采用加样回收法，取已知含量的样品0.05 g（11.26 ug/g），分别加入黄芩苷对照品溶液（0.51 ug/mL）8 mL、10 mL、12 mL。按供试品溶液的制备方法制备与测

定，结果平均回收率95.52% RSD =1.16.

2.3.12 样品测定：取肝胆消炎片3批次，进行含量测定，结果见附表。

附表样品含量测定结果(n = 5)

批号含量(μg/g) RSD(%)

20111016 11.32 1.26

20120526 11.12 1.43

20121108 12.49 1.37

3讨论

采用本文方法能较好地进行肝胆消炎片制剂中黄苓、大黄的薄层鉴别；HPLC法检测黄苓苷含量，简便、灵敏、准确，重复性好，可用于本制剂的质量控制。

参考文献

［1］苗明三.李振国编著.现代实用中药质量控制技术［M］.北京：人民卫生出版社，2000:66.

［2］中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［S］.北京：化学工业出版社， 2010:917.