实验7标本中未知细菌的分离和鉴定
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（—）
甘露醇发酵试验
（+）
二、标本中未知肠道感染细菌 的分离和鉴定
（一）实验目的
1、掌握肠道杆菌分离和鉴定的一般步骤 2、熟悉肠道杆菌鉴定生化反应和血清学反应
（二）实验器材
1、待检的粪便标本； 2、培养基：SS平板，生化反应管；普通 琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸 片；沙门菌、志贺菌多价诊断血清； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养 箱、显微镜、载玻片等。
（三）实验方法与检验流程
直接涂片染色镜检：观察细菌形态、排列、染色性 标本 血琼脂平板 观察菌落性状、溶血性、色素 涂片、染色、镜检 挑取可疑菌落 生化反应测定 纯培养 致病性测定
（凝固酶、耐热核酸酶）
血液 脑脊液
肉汤增 菌培养
涂片染色镜检
（三）实验方法与检验流程
脓拭子
分离培养 （血平板）
直接涂片 革兰染色
一、标本中未知病原性球菌 的分离和鉴定
（一）实验目的
1、掌握脓汁标本中常见病原菌分离和鉴定方 法 2、掌握药物敏感试验
（二）实验器材
1、待检的脓汁标本； 2、培养基：血琼脂平板，生化反应管；普 通琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸 片，3%过氧化氢； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养 箱、显微镜、载玻片等
材料
1. 菌种：伤寒杆菌培养物、痢疾杆菌培养物 2. 伤寒杆菌的诊断血清，志贺菌诊断血清、载玻片、生理盐水
方法
生理盐水 血清
肠道杆菌生化反应的结果
葡萄糖 乳糖 动力 H2S 尿素
⊕
⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ＋ ＋
⊕
＋ ± － － － －
±
－ ＋ ＋ ＋ ＋ －
－
－ ＋ ＋ ± ＋ －
－
－ ＋ － － － －
革兰染色
纯培养 生化反应
触酶试验
甘露醇试验
药敏试验
革兰染色的操作步骤
涂片制作
染 色
镜 检
革兰染色的操作步骤
初染
结晶紫1分钟
媒染
卢戈氏碘液1分钟
脱色
95%酒精30秒
复染
稀释复红30秒
脓汁标本的生化反应
1.触酶试验：区别葡萄球菌与链球菌； 2.甘露醇分解试验：区别葡萄球菌的致病菌株 与非致病菌，致病菌分解甘露醇产酸,使培养 基由紫色变黄色.
实验十
标本中未知细菌的分离和鉴定
致病菌的检验程序和常用项目
形态学检查 分离培养
（常规培养或 特殊培养）
直接涂片 染色镜检
初步诊断
血清学诊断 细菌的快速鉴定
形态特征 生化试验 血清学试验 动物实验 药物敏感试验
（沉淀反应、凝集试验、免疫标记技术等）
明 确 诊 断
(微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核 酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等）
埃希菌属
克雷伯菌属 变形杆菌 乙型副伤寒 甲型副伤寒 伤寒杆菌 痢疾杆菌
非致病 菌
致病菌
（三）实验方法与检验流程
粪便标本 SS平板
革兰染色 克氏双糖铁斜 面培养基
生化反应管 纯培养
观察结果
玻片凝集试验
药Байду номын сангаас试验
肠道杆菌五管糖试验
菌名
大肠埃希菌
葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘乳糖 ＋ ＋ 蔗糖 ＋/ － － －
⊕
＋
＋
⊕
－ －
志贺菌
沙门菌
＋/ － ＋ ＋ ＋
变形杆菌
⊕
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＋ /－
肠道杆菌的血清学试验（玻片凝集试验）
（—）
甘露醇发酵试验
（+）
二、标本中未知肠道感染细菌 的分离和鉴定
（一）实验目的
1、掌握肠道杆菌分离和鉴定的一般步骤 2、熟悉肠道杆菌鉴定生化反应和血清学反应
（二）实验器材
1、待检的粪便标本； 2、培养基：SS平板，生化反应管；普通 琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸 片；沙门菌、志贺菌多价诊断血清； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养 箱、显微镜、载玻片等。
（三）实验方法与检验流程
直接涂片染色镜检：观察细菌形态、排列、染色性 标本 血琼脂平板 观察菌落性状、溶血性、色素 涂片、染色、镜检 挑取可疑菌落 生化反应测定 纯培养 致病性测定
（凝固酶、耐热核酸酶）
血液 脑脊液
肉汤增 菌培养
涂片染色镜检
（三）实验方法与检验流程
脓拭子
分离培养 （血平板）
直接涂片 革兰染色
一、标本中未知病原性球菌 的分离和鉴定
（一）实验目的
1、掌握脓汁标本中常见病原菌分离和鉴定方 法 2、掌握药物敏感试验
（二）实验器材
1、待检的脓汁标本； 2、培养基：血琼脂平板，生化反应管；普 通琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸 片，3%过氧化氢； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养 箱、显微镜、载玻片等
材料
1. 菌种：伤寒杆菌培养物、痢疾杆菌培养物 2. 伤寒杆菌的诊断血清，志贺菌诊断血清、载玻片、生理盐水
方法
生理盐水 血清
肠道杆菌生化反应的结果
葡萄糖 乳糖 动力 H2S 尿素
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革兰染色
纯培养 生化反应
触酶试验
甘露醇试验
药敏试验
革兰染色的操作步骤
涂片制作
染 色
镜 检
革兰染色的操作步骤
初染
结晶紫1分钟
媒染
卢戈氏碘液1分钟
脱色
95%酒精30秒
复染
稀释复红30秒
脓汁标本的生化反应
1.触酶试验：区别葡萄球菌与链球菌； 2.甘露醇分解试验：区别葡萄球菌的致病菌株 与非致病菌，致病菌分解甘露醇产酸,使培养 基由紫色变黄色.
实验十
标本中未知细菌的分离和鉴定
致病菌的检验程序和常用项目
形态学检查 分离培养
（常规培养或 特殊培养）
直接涂片 染色镜检
初步诊断
血清学诊断 细菌的快速鉴定
形态特征 生化试验 血清学试验 动物实验 药物敏感试验
（沉淀反应、凝集试验、免疫标记技术等）
明 确 诊 断
(微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核 酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等）
埃希菌属
克雷伯菌属 变形杆菌 乙型副伤寒 甲型副伤寒 伤寒杆菌 痢疾杆菌
非致病 菌
致病菌
（三）实验方法与检验流程
粪便标本 SS平板
革兰染色 克氏双糖铁斜 面培养基
生化反应管 纯培养
观察结果
玻片凝集试验
药Байду номын сангаас试验
肠道杆菌五管糖试验
菌名
大肠埃希菌
葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘乳糖 ＋ ＋ 蔗糖 ＋/ － － －
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志贺菌
沙门菌
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变形杆菌
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肠道杆菌的血清学试验（玻片凝集试验）