出凝血试验讲解
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? 组织因子途径抑制物 (TFPI) 为一种对热稳定的糖蛋白。内皮细胞可能是其主要产生部位。 TFPI 的抗凝机制: 1、有直接抗 FⅩa作用。 2、在Ca2+存在的条件下,有抗 TF/F Ⅶa复合物作用。 纤溶机制 当血管受
损启动内外源性凝血过程时, FⅫa和激肽酶可将纤溶酶原激活为纤溶酶。血液中的链 激酶和尿激酶等物质也可将纤溶酶原激活。血管损伤部位分泌的组织型纤溶酶原激活 物(t-PA ),特异性的同纤维蛋白结合,再与纤溶酶原结合,激活纤溶酶原为纤溶酶, 大大加快了纤溶酶分解纤维蛋白的作用。
? ※临床意义
? 凝血酶原时间延长见于: (1)先天性凝血 因子异常 如因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ之一或两种 以上的凝血因子有质量异常时。 (2)后天性 凝血因子异常 如严重肝病、维生素 K缺乏、DIC后 期、使用抗凝药物、纤溶亢进等。 凝血酶原时 间缩短见于: 血液高凝状态( DIC早期、心肌 梗死、脑血栓形成、急性血栓性静脉炎)、血栓性 疾病、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、口服避孕药等。
? ※简要步骤
? 取抗凝血,分离血浆,加APTT试剂,37℃温 育3分钟后加Ca2+,记录血浆凝固所需时间。
? ※实验结果
? 参考值: 30~45秒。与正常对照相差在5秒以 内为正常,延长10秒以上为异常。
? ※临床意义
1、APTT延长见于:
(1)先天性凝血因
子异常:血友病,血管性血友病、接触因子Ⅻ缺乏;
凝血机制
抗凝机制
?
抗凝血酶Ⅲ 是人体内最重要的抗凝物质,主要由肝脏及血管内皮细胞产生。它在肝 素的辅助下,主要与活性因子Ⅹ和凝血酶结合为复合物,抑制活性因子Ⅹ和凝血酶的 凝血作用 .
? 蛋白C系统 由蛋白 C、蛋白 S及血栓调节素等组成。蛋白 C和蛋白 S在肝内合成,血栓调 节素主要存在于血管内皮细胞表面,凝血酶与其结合后,即失去了它原来的凝血活性, 并可激活蛋白 C,使之变成活性蛋白 C,再通过 Ca2+与内皮细胞上的蛋白 S结合成活性 蛋白 C-蛋白 S复合物,灭活因子Ⅴ和因子Ⅷ,发挥抗凝作用。
表计时。
? ※实验结果 参考值:2~6分钟 ? ※临床意义 ? 出血时间延长见于:
1、血小板明显减少或功能异常 如原发性血小 板减少性紫癜、血小板无力症等;
2、严重缺乏血浆有关因子 如vWD 、DIC;
3、其他异常,如:遗传性出血性毛细血管扩 张症、服用抗血小板药物
凝血时间测定
? ※基本原理
?
静脉血放在玻璃试管中,观察自采血开始至血凝所需的时间称为凝
血时间。本试验反映自因子Ⅻ被负电荷表面激活,至纤维蛋白形成所需
的时间,主要反映内源性凝血过程有无异常。
? ※简要步骤
?
抽静脉血3ml分别注入3支小试管内。置37℃水浴中,3分钟后每隔
30秒钟轻轻倾斜第1支试管1次,直至血液不再流动为止,依次倾斜第2
和第3支试管,记录第3管血液凝固所需时间。
? ※实验结果
凝血酶原,使纤维蛋白原转化为纤维蛋白, 观察血浆凝固所需时间即为凝血酶原时间。 本试验是外源性凝血过程的过筛试验。因子 Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅶ质和量异常影响此试验.
? ※简要步骤
取静脉抗凝血,分离血
浆,在待检血浆中加入因子Ⅲ和Ca2+,计录
血浆凝固的时间。
? ※实验结果
? 参考值:11~13s,比正常对照延长3s以上 有临床意义,国际标准化比值(INR)为 0.9~1.1。
凝血酶时间测定
? ※基本原理 ? 在被检血浆中加入标准凝血酶溶液后,血浆
凝固所需时间,为凝血酶凝固时间。当纤维 蛋白原明显减少或有结构异常或血循环中有 抗凝血酶物质时,本试验时间长。
? ※简要步骤
? 取待检血浆,加入标准凝血酶溶液中,记录血浆凝固时间。
? ※实验结果
? 参考值:16~18S,较正常对照延长3S以上有诊断意义。
出凝血相关实验
止血机制
当血管发生破损时,首先是局部血管发生短暂地收缩, 使血流变缓,破损伤口缩小,之后血管内皮细胞表达并释放 出vWF粘附于暴露的胶原组织上,血小板通过膜糖蛋白 GPⅠb与vWF相连接而粘附于胶原纤维,同时血小板以膜糖 蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物为纤维蛋白原的受体,通过纤维蛋白 原介导血小板间的聚集,在ADP、肾上腺素、胶原、凝血酶 等诱导剂的参与下,聚集的血小板释放出ADP、5-羟色胺、 血栓素A2、β-血小板球蛋白等,导致血小板非可逆性聚集, 形成血小板血栓。同时,血管受损后暴露的胶原纤维和释放 的组织因子,启动内源性和外源性凝血途径,形成牢固的止血 血栓,血小板释放出血栓收缩蛋白,使血块退缩,加强止血 作用,使出血停止。
?
参考值:
?
玻璃试管法 4~12min
? ※临床意义
?
凝血时间延长见于
? 1、因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ明显减少 如血友病、血 管性血友病等;
? 2、凝血酶原和纤维蛋白原高度减少 如严重 的肝病、阻塞性黄疸、先天性纤维蛋白原减少症等;
? 3、纤溶亢进; ? 4、循环抗凝物质增多及使用
活化部分凝血活酶时间测定
出血时间测定
?
※基本原理
? 皮肤毛细血管被刺破后出血自然停止所需的时间称为出血时间。出血时间的变 化主要受血小板数量和功能的影响,其次是血管壁的完整性和收缩功能。血浆凝 血因子的影响较小。
※简要步骤
出血时间测定器测定法:将出血时间测定
器(双刀片或单刀片弹簧装置)在肘窝下2横指
处常规消毒后贴于皮肤表面,按动按钮,开动秒
? ※临床意义
? ※基本原理 ? 部分凝血活酶(脑磷脂)可代替血小板3因子参
与FⅨ和FⅩ的凝血作用。本试验是在血浆中 加入APTT试剂(接触因子激活物+磷脂)和 Ca2+后,测定其凝血时间。本试验是反映内源 性凝血功能的综合性检查。如以白陶土 (Kaolin)作为接触因子激活物时,亦可称为白 陶土部分凝血活酶时间(KPTT).
Hale Waihona Puke (2)多种凝血因子缺乏(后天性),如严重肝病、
维生素K缺乏、DIC等; (3)循环抗凝物质增
加,如系统性红斑狼疮。
2、APTT缩短见于:
高凝状态:如 DIC高凝期和凝血因子活性增高等;
血栓性疾病:如心肌梗死、脑血管病变、糖尿病、
肾病综合征、妊娠高血压综合征等
凝血酶原时间测定
? ※基本原理 ? 在被检血浆中加入因子Ⅲ和Ca2+后,激活
损启动内外源性凝血过程时, FⅫa和激肽酶可将纤溶酶原激活为纤溶酶。血液中的链 激酶和尿激酶等物质也可将纤溶酶原激活。血管损伤部位分泌的组织型纤溶酶原激活 物(t-PA ),特异性的同纤维蛋白结合,再与纤溶酶原结合,激活纤溶酶原为纤溶酶, 大大加快了纤溶酶分解纤维蛋白的作用。
? ※临床意义
? 凝血酶原时间延长见于: (1)先天性凝血 因子异常 如因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ之一或两种 以上的凝血因子有质量异常时。 (2)后天性 凝血因子异常 如严重肝病、维生素 K缺乏、DIC后 期、使用抗凝药物、纤溶亢进等。 凝血酶原时 间缩短见于: 血液高凝状态( DIC早期、心肌 梗死、脑血栓形成、急性血栓性静脉炎)、血栓性 疾病、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、口服避孕药等。
? ※简要步骤
? 取抗凝血,分离血浆,加APTT试剂,37℃温 育3分钟后加Ca2+,记录血浆凝固所需时间。
? ※实验结果
? 参考值: 30~45秒。与正常对照相差在5秒以 内为正常,延长10秒以上为异常。
? ※临床意义
1、APTT延长见于:
(1)先天性凝血因
子异常:血友病,血管性血友病、接触因子Ⅻ缺乏;
凝血机制
抗凝机制
?
抗凝血酶Ⅲ 是人体内最重要的抗凝物质,主要由肝脏及血管内皮细胞产生。它在肝 素的辅助下,主要与活性因子Ⅹ和凝血酶结合为复合物,抑制活性因子Ⅹ和凝血酶的 凝血作用 .
? 蛋白C系统 由蛋白 C、蛋白 S及血栓调节素等组成。蛋白 C和蛋白 S在肝内合成,血栓调 节素主要存在于血管内皮细胞表面,凝血酶与其结合后,即失去了它原来的凝血活性, 并可激活蛋白 C,使之变成活性蛋白 C,再通过 Ca2+与内皮细胞上的蛋白 S结合成活性 蛋白 C-蛋白 S复合物,灭活因子Ⅴ和因子Ⅷ,发挥抗凝作用。
表计时。
? ※实验结果 参考值:2~6分钟 ? ※临床意义 ? 出血时间延长见于:
1、血小板明显减少或功能异常 如原发性血小 板减少性紫癜、血小板无力症等;
2、严重缺乏血浆有关因子 如vWD 、DIC;
3、其他异常,如:遗传性出血性毛细血管扩 张症、服用抗血小板药物
凝血时间测定
? ※基本原理
?
静脉血放在玻璃试管中,观察自采血开始至血凝所需的时间称为凝
血时间。本试验反映自因子Ⅻ被负电荷表面激活,至纤维蛋白形成所需
的时间,主要反映内源性凝血过程有无异常。
? ※简要步骤
?
抽静脉血3ml分别注入3支小试管内。置37℃水浴中,3分钟后每隔
30秒钟轻轻倾斜第1支试管1次,直至血液不再流动为止,依次倾斜第2
和第3支试管,记录第3管血液凝固所需时间。
? ※实验结果
凝血酶原,使纤维蛋白原转化为纤维蛋白, 观察血浆凝固所需时间即为凝血酶原时间。 本试验是外源性凝血过程的过筛试验。因子 Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅶ质和量异常影响此试验.
? ※简要步骤
取静脉抗凝血,分离血
浆,在待检血浆中加入因子Ⅲ和Ca2+,计录
血浆凝固的时间。
? ※实验结果
? 参考值:11~13s,比正常对照延长3s以上 有临床意义,国际标准化比值(INR)为 0.9~1.1。
凝血酶时间测定
? ※基本原理 ? 在被检血浆中加入标准凝血酶溶液后,血浆
凝固所需时间,为凝血酶凝固时间。当纤维 蛋白原明显减少或有结构异常或血循环中有 抗凝血酶物质时,本试验时间长。
? ※简要步骤
? 取待检血浆,加入标准凝血酶溶液中,记录血浆凝固时间。
? ※实验结果
? 参考值:16~18S,较正常对照延长3S以上有诊断意义。
出凝血相关实验
止血机制
当血管发生破损时,首先是局部血管发生短暂地收缩, 使血流变缓,破损伤口缩小,之后血管内皮细胞表达并释放 出vWF粘附于暴露的胶原组织上,血小板通过膜糖蛋白 GPⅠb与vWF相连接而粘附于胶原纤维,同时血小板以膜糖 蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物为纤维蛋白原的受体,通过纤维蛋白 原介导血小板间的聚集,在ADP、肾上腺素、胶原、凝血酶 等诱导剂的参与下,聚集的血小板释放出ADP、5-羟色胺、 血栓素A2、β-血小板球蛋白等,导致血小板非可逆性聚集, 形成血小板血栓。同时,血管受损后暴露的胶原纤维和释放 的组织因子,启动内源性和外源性凝血途径,形成牢固的止血 血栓,血小板释放出血栓收缩蛋白,使血块退缩,加强止血 作用,使出血停止。
?
参考值:
?
玻璃试管法 4~12min
? ※临床意义
?
凝血时间延长见于
? 1、因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ明显减少 如血友病、血 管性血友病等;
? 2、凝血酶原和纤维蛋白原高度减少 如严重 的肝病、阻塞性黄疸、先天性纤维蛋白原减少症等;
? 3、纤溶亢进; ? 4、循环抗凝物质增多及使用
活化部分凝血活酶时间测定
出血时间测定
?
※基本原理
? 皮肤毛细血管被刺破后出血自然停止所需的时间称为出血时间。出血时间的变 化主要受血小板数量和功能的影响,其次是血管壁的完整性和收缩功能。血浆凝 血因子的影响较小。
※简要步骤
出血时间测定器测定法:将出血时间测定
器(双刀片或单刀片弹簧装置)在肘窝下2横指
处常规消毒后贴于皮肤表面,按动按钮,开动秒
? ※临床意义
? ※基本原理 ? 部分凝血活酶(脑磷脂)可代替血小板3因子参
与FⅨ和FⅩ的凝血作用。本试验是在血浆中 加入APTT试剂(接触因子激活物+磷脂)和 Ca2+后,测定其凝血时间。本试验是反映内源 性凝血功能的综合性检查。如以白陶土 (Kaolin)作为接触因子激活物时,亦可称为白 陶土部分凝血活酶时间(KPTT).
Hale Waihona Puke (2)多种凝血因子缺乏(后天性),如严重肝病、
维生素K缺乏、DIC等; (3)循环抗凝物质增
加,如系统性红斑狼疮。
2、APTT缩短见于:
高凝状态:如 DIC高凝期和凝血因子活性增高等;
血栓性疾病:如心肌梗死、脑血管病变、糖尿病、
肾病综合征、妊娠高血压综合征等
凝血酶原时间测定
? ※基本原理 ? 在被检血浆中加入因子Ⅲ和Ca2+后,激活