梅毒螺旋体

梅毒螺旋体抗体检测方法分析

摘要目的人体感染梅毒螺旋体后，具有高度传染性，血清梅毒螺旋体抗体检测对梅毒诊断和疗效进行分析很重要，比较梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）三种检测方法，探讨如何合理利用这3种方法来检测梅毒抗体。方法对龙岗中心医院350例梅毒患者、100例非梅毒患者、50例正常人的血清标本进行TP-ELISA、TRUST、TPPA三种方法联合检测并进行分析。结果 153例一期梅毒患者阳性检出率分别为97.4%、83.7%、98.9%；185例二期梅毒患者阳性检出率均为97.8%、96.2%、100%；22例潜伏期梅毒患者阳性检出率分别为95.5%、72.7%、100.0%；100例非梅毒患者阳性率分别为1%、4%、1%；50例健康体检者的阳性率均为0。结论三种方法都是梅毒检测的快速方法， TP-ELISA适合批量筛查试验而且对早期梅毒灵敏度也较高，适合早期特异性诊断，TRUST 可以测定抗体滴度，疗效观察优于TP-ELISA和TPPA，TPPA的灵敏度特异性最高，适合作为确证试验。

关键词梅毒螺旋体检测方法检出率试验

Syphilis helicoid antibody test method analysis

Abstract objective Human infections after syphilis helicoids,Highly infectious, Serum syphilis helicoid antibody test for syphilis diagnosis and curative effect analysis is very important,compare syphilis ELISA test (TP-ELISA),Syphilis armour aniline red do not heat serum test (TRUST)with Syphilis helicoid gelatin particles agglutinate experiment (TPPA) these three kinds of methods, Discusses how to reasonable use of the three methods to detect syphilis antibody. Methods 153 cases of syphilis patients a positive detection rate of 97.4%, 83.7% and 98.9% respectively; 185 cases of patients with two positive detection rate of syphilis are 97.8%, 96.2%, 100%; 22 cases of syphilis patients positive incubation period detection rate of 95.5%, 72.7% and 100.0% respectively; 100 cases of syphilis positive patients were 1%, 4% and 1%; 50 cases of all the healthy check-up of positive for 0. Conclusions Three methods are syphilis detection method of fast, TP-ELISA suitable for mass screening test for early syphilis and higher sensitivity, Suitable for specific diagnosis early, TRUST can be determined antibody concentration degree, Clinical observation is better than the TP-ELISA and TPPA, The sensitivity of the highest TPPA specificity, As a test for confirmation.

Keywords Treponema pallidum test method relevance ratio test

比较梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）为临床上常用的检测方法，TP感染后可产生两种抗体，一种是抗心磷脂抗体，一种是抗TP特异性抗体，据文献[1]报道，人体感染梅毒螺旋体后，血清中产生的抗螺旋体抗体相对与抗类脂质抗体早[2]。由于检测方法的局限性所以存在误检和漏检。以下是实验分析过程：

材料和方法

1.材料

1.1标本来源收集本院2011年10月到2012年3月门诊、住院病人、体检者合格新鲜的血清标本共500份，年龄在40±28周岁。

1.2试剂盒TP-ELISA（双抗原夹心法）试剂盒来自珠海丽珠股份有限公司、TRUST 试剂盒来自上海荣盛生物药业有限公司、TPPA试剂来自日本富士瑞必欧株式会社。

1.3 设备汇松洗板机、MK2酶标仪

2. 方法

2.1 静脉采血取血清，离心后吸取上清液进行测试，所有标本均用TP-ELISA、TRUST、TPPA 进行梅毒筛查试验，所有检测操作程序和结果判读均按照试剂盒说明书进行，每次试验均设阴阳质控对照，试剂盒在有效期内使用。

2.2 TP-ELISA试验在每孔加入待检样本，酶标试剂各50μL，轻轻震荡混匀，封板，37℃水浴30min，洗版5遍，扣干。每孔加入显色剂A、B液各50μL，混匀，封板37℃，15min 再加50μL终止液混匀比色，酶标仪450/630nm，空白孔对照调零，读取吸光度（A值），A<临界值为阴性，A≥临界值为阳性。

2.3TRUST试验定性试验：加50μL待测血清在纸卡的圆圈内，用盒内专用针头垂直滴加TRUST试剂1滴，以100r/min离心8分后在显微镜下观察凝集状况，凝集为阳性。半定量试验：对检测样本进行倍比稀释，按定性试验方法进行检测，以最大稀释倍数凝集处作为最终滴度。

2.4TPPA室温条件下，在U形板上用稀释液将每份血清样本稀释，加入致敏粒子或未致敏粒子，静置2h后观察结果，加致敏粒子孔大于或等于1:80为阳性。

2.5统计学处理计数资料采用x²检验，P<0.05，为差异有统计学意义。

结果