迈瑞BriCyteE六流式细胞仪介绍培训课件
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检测表达较高的抗原上 PerCP-Cy5.5（叶绿素蛋白偶联物） PE-Cy7（藻红蛋白偶联物） PE-Cy5（藻红蛋白偶联物） PE-Texas Red（藻红蛋白-德州红偶联物）
638nm激光激发：
APC（别藻青蛋白） APC-Cy7（别藻青蛋白偶联物）
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计量
宏观和微观 输出
百分比或绝对计数 （如 %、**个/uL）； 物质的量或定性判定 （L、UI/L、 阴性、阳 pmol/m性）
测量宏观对象（细胞）上的 微观物质（抗原、看不见、 摸不到）
百分比和绝对计数 （如 %、**个/L）
物质的量 （mol/L）
测定宏观对象（细胞）上的宏 测量微观物质（可溶性成
测试目标 测试原理
物理或化学性质（如细胞大 物理或化学性质（如细胞大小、 化学成分和一些小分子物 小、内部复杂程度、DNA含 内部复杂程度、DNA含量） 质（如钾、钠、钙、酶） 量）；
小分子物质（如抗原，抗体）
流式细胞术+抗原抗体反应 流式细胞术
化学比色法
小分子物质（如抗原、 抗体、激素）
抗原抗体反应
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12
流式细胞仪与几种检验仪器的比较 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
项目
测试对象
流式细胞仪
细胞
血球仪
细胞(测量设置全部固定化）
生化分析仪
血清
免疫分析仪
血清
① ③
源自文库
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流式细胞仪分析流程 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
1 单个细胞悬液制备 2 样本细胞荧光标记 3 流式细胞仪检测 4 数据分析处理
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实真测实
FITC通道信号 =
+
真实实测
PE通道信号 =
+
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数据分析-图形类型 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
数据显示
直方图 散点图 等高线图 密度图 三维图
670LP
785/60
反光镜 反光镜
488/10
SS
785/60
tv
530/30
740LP FL6
488/10
645LP
660/20
(APC-cy7)
FSC
t
488/10
550LP 491/LP
FL4
v
FL4
(APC)
v
FS
t
t
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流式细胞仪工作原理 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
SSC FL2 FL5
FL6
v v
v
t
FL3
FL5
FL1
v t
v t
FL1 (FITC)
t
FL2 (PE)
FL3 (PerCP)
(PE-cy7)
585/40
由于每一种荧光素分子都发射某一特定波长范围内的光，然而这些荧光的 发射光谱会发生部分重叠，有时这种重叠现象非常显著。
为了能够在存在荧光泄露的情况下，得到真实的多色荧光发射信号，在流式 细胞仪中采用了称之为颜色补偿的方法，通过测得信号经修正得到真实信号加 以使用。
FITC 530/30
PE 585/40
研究对象：生物颗粒； 检测信号：光信号（散射光，荧光）； 分析特点：快速，特异，准确，客观，多参数；
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流式细胞仪基本构造 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
➢ 液流系统 ➢ 光学系统 ➢ 电子系统 ➢ 数据分析系统
6
常用的激光器和 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 标记单克隆抗体的荧光素
488nm激光激发：
FITC（异硫氰酸荧光素）： 荧光强度可受pH的影响，当pH降低 时其荧光强度也随之减弱
PE（藻红蛋白） PerCP（多甲藻叶绿素蛋白）：光量子产量并不太高，最好应用在
流式细胞仪基础知识
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流式细胞仪的定义 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
流式细胞仪(flow cytometer)：
是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计 算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的 高科技仪器。可对单个生物颗粒在流动状态进行分子功能水 平上的定量定性分析。
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散射光双参数散点图 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
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荧光双参数散点图 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
目录 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
流式细胞仪基础知识 流式细胞术应用 迈瑞流式细胞仪BriCyte E6介绍
竞争产品介绍
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荧光素的选择 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
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荧光补偿 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
638nm激光激发：
APC（别藻青蛋白） APC-Cy7（别藻青蛋白偶联物）
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计量
宏观和微观 输出
百分比或绝对计数 （如 %、**个/uL）； 物质的量或定性判定 （L、UI/L、 阴性、阳 pmol/m性）
测量宏观对象（细胞）上的 微观物质（抗原、看不见、 摸不到）
百分比和绝对计数 （如 %、**个/L）
物质的量 （mol/L）
测定宏观对象（细胞）上的宏 测量微观物质（可溶性成
测试目标 测试原理
物理或化学性质（如细胞大 物理或化学性质（如细胞大小、 化学成分和一些小分子物 小、内部复杂程度、DNA含 内部复杂程度、DNA含量） 质（如钾、钠、钙、酶） 量）；
小分子物质（如抗原，抗体）
流式细胞术+抗原抗体反应 流式细胞术
化学比色法
小分子物质（如抗原、 抗体、激素）
抗原抗体反应
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流式细胞仪与几种检验仪器的比较 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
项目
测试对象
流式细胞仪
细胞
血球仪
细胞(测量设置全部固定化）
生化分析仪
血清
免疫分析仪
血清
① ③
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流式细胞仪分析流程 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
1 单个细胞悬液制备 2 样本细胞荧光标记 3 流式细胞仪检测 4 数据分析处理
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实真测实
FITC通道信号 =
+
真实实测
PE通道信号 =
+
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数据分析-图形类型 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
数据显示
直方图 散点图 等高线图 密度图 三维图
670LP
785/60
反光镜 反光镜
488/10
SS
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tv
530/30
740LP FL6
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FSC
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550LP 491/LP
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流式细胞仪工作原理 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
SSC FL2 FL5
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FL3
FL5
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FL1 (FITC)
t
FL2 (PE)
FL3 (PerCP)
(PE-cy7)
585/40
由于每一种荧光素分子都发射某一特定波长范围内的光，然而这些荧光的 发射光谱会发生部分重叠，有时这种重叠现象非常显著。
为了能够在存在荧光泄露的情况下，得到真实的多色荧光发射信号，在流式 细胞仪中采用了称之为颜色补偿的方法，通过测得信号经修正得到真实信号加 以使用。
FITC 530/30
PE 585/40
研究对象：生物颗粒； 检测信号：光信号（散射光，荧光）； 分析特点：快速，特异，准确，客观，多参数；
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常用的激光器和 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。 标记单克隆抗体的荧光素
488nm激光激发：
FITC（异硫氰酸荧光素）： 荧光强度可受pH的影响，当pH降低 时其荧光强度也随之减弱
PE（藻红蛋白） PerCP（多甲藻叶绿素蛋白）：光量子产量并不太高，最好应用在
流式细胞仪基础知识
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流式细胞仪的定义 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
流式细胞仪(flow cytometer)：
是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计 算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的 高科技仪器。可对单个生物颗粒在流动状态进行分子功能水 平上的定量定性分析。
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散射光双参数散点图 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
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