卡式微柱凝胶法在血型鉴定中的应用小议
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卡式微柱凝胶法在血型鉴定中的应用小议
发表时间:2010-09-01T17:41:04.937Z 来源:《中外健康文摘》2010年第18期供稿作者:石凤燕[导读] 卡式微柱凝胶法是抗原,抗体反应和凝胶分子筛技术相结合的检测法。
石凤燕(攸县人民医院湖南攸县 412300)
【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)18-0075-02 【摘要】目的分析卡式微柱凝胶法在血型鉴定中的作用。方法将900位名病人同时采用卡式微柱凝胶法和传统的手工操作法作血型鉴定。结果卡式微柱凝胶法正确率为100%,手工正定型法为97.78%,正定型+反定型为100%,但在操作标准化、特异性、灵敏度、客观性方面,前者明显优于后两者。结论卡式微柱凝胶法可提高血型鉴定的检验质量。【关键词】微柱凝胶法血型鉴定
近年来,卡式微柱凝胶检验法(以下简称“卡式法”)已在全国各级医院中,普遍运用,用来作血型鉴定的检验方法,相对于从前国内各级医院用手工操作作血型鉴定来说,卡式法结果准确,操作简单,时间短,试剂用量小;环境污染因此下降。我院自2006年1月开始用卡式法来作血型鉴定的检测工作。并对900名住院病人作了卡式法与手工操作的平行实验,并对结果进行了比较,现将比较的结论与相关分析报道于下。
1 材料和方法
1.1仪器孵育器:Diamed-ID(达亚美) ID-Incubator 37SⅠ专用孵育器。离心机:Diamed-ID(达亚美) ID-Centrifuge 12SⅡ专用离心机。
1.2试剂
1.2.2手工试剂抗A、抗B血清为长春生物制品研究所生产。生产批号20051104 单克隆抗D为台湾贝索公司生产。
1.3 标本来源
我院2006年10月至2007年7月外科住院病人900名,其中男623人,女277名。年龄11~86岁。抽取左肘静脉2ml,肝素抗凝,同时分别用卡式法和手工操型作鉴定血型。
1.4方法
1.4.1卡式检测法按达亚美公司卡氏血型鉴定手册进行。取Diamed-ID ABO/Rh 血型鉴定卡一个,标记病人的姓名病历号等,撕去卡上的锡纸膜。配制 5%的红细胞悬液(25ul病人RBC+0.5ml Diluent2低离子缓冲液)在A.B.D孔分别加入10ul抗A抗B抗D,标准血清。在
A.B.D孔分别加入已配制的2%病人红细胞悬液10ul,37℃孵育15分钟,离心,按说明书提示标准判读结果。
1.4.2手工操作按《全国临床检验操作规程》[1] 规定,正向定型和反向定型加正向定型试管法进行。
2 结果
将上述两种方法的鉴定结果进行比较,凡正反定型和卡式检测法检验相关血型不符合者,将血液红细胞用生理盐水洗涤3次,再用两种方法重复测定,作正确率比较。
3 讨论
卡式微柱凝胶法是抗原,抗体反应和凝胶分子筛技术相结合的检测法。它是通过葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小,使分子筛只让游离分子通过,从而达到分离凝聚红细胞和游离红细胞的目的。达亚美公司生产的 ABO/Rh卡既可以应用于ABO血型系统的检验,又可以进行Rh血型系统中抗D的鉴定。同时,还可以通过反定型方法,对个体的血型同时鉴定。这与《全国临床检验操作规程》对血型鉴定要求,同时通过正反向定型来准确鉴定ABO血型是相一致的。且操作简单,敏感性特异性都高于手工正定型法。而正反定型相结合,虽弥补了正定型的不足。但在标准化等操作方面,同卡式检测法比较却有较大的差距。 Lapiere [2] 等报道,他们所发明的凝胶离心技术和良好的重复性。卡式法的优点是采用标准化定量工作,减少了操作人员的随意性,且重复性好。由于用了凝胶分子筛技术,将凝集的,游离的红细胞分开,使结果一目了然。避免了操作上的主观影响[3],所要标本量少,操作容易,省去了繁锁的洗涤过程,不再耽心抗人球蛋白抗体被中和,而产生假阳性。也便于保存,一般而言,在冰箱中可保存半年至一年。还可进行拍照供永久记录,以备发生血型鉴定错误时查对原始资料。塑料卡易销毁,不污染环境总之,卡式微柱凝胶法即使对无经验的操作者而言,结果判读,要比试管法更可靠,加上操作简单,省时,用试剂少,成本低,污染环境少,是一个值得推广的血型鉴定好方法。
参考文献
[1] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程 [M] 南京:东南大学出版社,1997:89-91.
[2] Lapiere Y. Rigal D Adam J etal.The gel test:a new way to detectred cell antigen-anti body reaction Transfusion,1990,30 : 109-113.
[3] 彭道波,兰炯采,王梁平,等.用微柱凝试验进行交叉配血[J].中国输血杂志,2001,14(4):232.
[4] 郑强. 卡式微柱凝胶法在我院血型鉴定中的应用总结[J] 中国保健,17(5):267-268.