高二生物微生物培养技术

•(3)培养基配方及营养要素 •基本营养要素：各种培养基一般都含有水、 碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同 微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气 的需求。
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营养要 素
定义
作 用 主要来源
碳源
凡能提供所 需碳元素的 物质
构成生物体 细胞的物质 和一些代谢 产物，有些 是异养生物 的能源物质
不同需求，配制出供其生长繁殖的营养 基质。 • (2)分类和应用
高二生物微生物培养技术
划
分 培养基种
标
类
准
特点
用途
液体培养 不加凝固
基
剂
工业生产
物 理 性 质
半固体培
观察微生物的运
养基
固体培养 基
加凝固剂， 如琼脂
动、分类、鉴定
微生物分离、鉴 定、活菌计数、
保藏菌种
含化学成 高二生物微生物培养技术
•答案：(1)葡萄糖 尿素 (2)有选择作用。因 为此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有能 够利用尿素的微生物才能够生长 (3)A
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• 1．分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2H PO4、MgSO4·7H2O、
• 葡萄糖、尿素、琼脂。请回答：
• (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长
提供碳源和氮源的分别是________和______
__。
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•(3)培养基、培养皿、接种环、实验操作 者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消 毒方法依次是( )
无机化合物： CO2、 NaHCO3； 有机化合物： 糖类、脂肪 酸、花生饼 粉、石油等
氮源
无机化合物： 凡 需能 氮提 元供素高所的二生物合核微生物酸成培养以蛋技术及白含质、N铵 盐2盐 ；、、 有NH硝 机3、酸 化
水 无机盐
在生物体内 含量很高， 在低等生物 体内含量更
高
不仅是优良 的溶剂而且 可维持生物 大分子结构
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• 3．微生物的分离方法
•
方法一：平板划线法、稀释涂布平
板法、稀释混合平板法。
•
(1)原理：在培养基上将细菌稀释或
分散成单个细胞，使其生长成单个的菌
落，则这个菌落就是一个纯化的细菌菌
落。
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• 方法二：选择培养基分离法。 • (1)原理：使分离对象大量繁殖，抑制其他
选修一 第一章 微生物培养技术
高频考点 1.微生物的分离和培养。 2.某种微生物数量的测定。 3.培养基对微生物的选择作用。
实验要求 1.培养基的种类、营养要求及配制原则。 2.无菌技术的内容及方法。 3.微生物的培养、分离和高数二量生物测微定生物。培养技术
• (一)微生物实验室培养 • 1．培养基 • (1)概念：人们按照微生物对营养物质的
ห้องสมุดไป่ตู้
•①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消 毒法
•A．⑤③②①④⑥ ⑤⑥
B．①②③④
•C．⑥②③④①⑤ ⑥⑤
D．③④②①
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•解析：碳源是提供碳元素的物质，氮源是提 供氮元素的物质。所以碳源是葡萄糖，氮源 是尿素。绝大多数生物都能利用葡萄糖，但 是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素， 所以这种培养基对微生物有选择作用。选择 的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够 生长。培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐 高温，可用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌 达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双 手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双 手；空气可用紫外线消毒；牛奶为不破坏其 营养成分可采用巴高氏二生物消微生毒物培法养技。术
用
选择 培养 基
培养基中加入 某种化学物质， 以抑制不需要 的微生物的生 长，促进所需 要的微生物的 生长
培养、分离出特 定微生物(如培养 酵母菌和霉菌， 可在培养基中加 入青霉素；培养 金黄色葡萄球菌， 可在培养基中加 入高浓度食盐)
途
鉴别不同种类的
鉴别 根 代据谢微特高二生点生物物，微生的在物培养技术微伊红生物—美，蓝如培可养用基
的稳定
为微生物提 细胞内的组
供除碳、氮 成成分，生
以外的各种 理调节物质；
重要元素， 某些化能自
包括大量元 养菌的能源，
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素
酶的激活剂
•特别提醒：①微生物最常用的碳源是糖类， 尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、 硝酸盐。 •②对异养微生物来说，含C、H、O、N的 有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。 •③有些培养基不需要添加特殊营养物质， 生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些 维生素，作为特殊营养物质。 •④制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒 平板。
菌 因素
生物，包括
灼烧灭菌、 干热灭菌、 高压蒸汽灭
•特别提醒：用酒精消毒时，70%的酒精杀菌效 果最好，原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白 质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中； 浓度过低，杀菌力减弱。 •(2)无菌技术主要操作要求 •①实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所 用器具和培养基灭菌。 •②实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作， 另外要避免已灭菌处理材料再次污染。
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• 2. 无菌技术 • (1)消毒和灭菌的区别
条件
结果 常用的方法
消 毒
较为温和的 物理或化学 方法
仅杀死物体 表面或内部 一部分对人 体有害的微 生物(不包括 芽孢和孢子)
煮沸消毒法、 巴氏消毒法、 紫外线或化 学药物消毒 法
杀死物体内
灭 强烈的理化高二外生物微所生物有培养的技术微
微生物的生长。 • (2)适用范围：分离的微生物在混合样品中
数量较少时。 • (3)实例：分离分解纤维素的细菌。
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•(二)大肠杆菌分离与纯培养(以及菌种的保 藏) •(1) 制 备 牛 肉 膏 蛋 白 胨 固 体 培 养 基 ： 计 算 、 称量、溶化、灭菌、倒平板。 •(2)纯化大肠杆菌 •①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成 单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌 落就是一个纯化高二的生物细微生菌物培菌养技术落。
•(3)菌种的保藏 •①短期保存：固体斜面培养基上4℃保存，菌种 易被污染或产生变异。 •②长期保存：－20℃甘油管在冷冻箱中保藏。 •特别提醒：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠， 凝固后的培养基表面的温度也比较高，将平板倒 置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发；又 可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。