碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05molL,pH9.6)
ELISA试剂及溶液配制及实验步骤
ELISA试剂及溶液配制①包被液：0。
05mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.6)0。
75g碳酸钠,1。
46g碳酸氢钠，加去离子水定容至500ml。
②0。
02mol/L磷酸盐缓冲液(pH7。
4）0。
2g磷酸二氢钾，2。
90g磷酸氢二钠，8g氯化钠，加去离子水定容到1000ml。
③抗体稀释液：0。
02mol/L PBS(pH7.4)+0。
2％BSA0。
2gBSA加配好的0.02mol/L磷酸盐缓冲液溶解定量至100g。
④封闭液：0。
05mol/L碳酸盐缓冲液（pH9.6）+2.0％BSA2.0gBSA加配好的0。
05mol/L碳酸盐缓冲液溶解定量至100g。
⑤洗涤液：0。
02mol/L PBS(pH7.4）+0.05％Tween—20将50ulTween—20溶入100ml0。
02mol/L磷酸盐缓冲液中，震荡混匀。
⑥显色液：TMB-过氧化氢尿素溶液A液（3，3’，5，5’—四甲基联苯胺，TMB)：称取TMB20mg溶于10ml无水乙醇中，完全溶解后，加双蒸水至100ml。
B液(0。
1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸氢二钠缓冲液，pH5.0—5.4)：称取Na2HPO4·12H2O14。
34g，柠檬酸1。
87g溶于180ml双蒸水，加0.75％过氧化氢尿素1.28ml，定容至200ml，调pH至5。
0—5.4。
将A液和B液按1：l混合后即成TMB—过氧化氢尿素应用液。
⑦终止液：2mol/L H2SO4溶液10ml98%浓硫酸加入60ml双蒸水中，定容至100ml，室温保存。
⑧酶标二抗：HRP标记的羊抗兔 IgG，应用时用抗体稀释液稀释3000倍。
2。
2.6 抗血清的分离采集血液后，去掉针头,缓慢注入已经灭菌的三角烧瓶中,待凝固后用灭菌滴管将血液沿边缘剥离,室温放置1小时,再放入4℃冰箱过夜(不能冰冻,否则产生溶血)，使血清充分析出。
第二天取出后以4℃3000r/min离心30min，取上清，分装后-20℃保存备用。
ELISA试剂及溶液配制及实验步骤
ELISA试剂及溶液配造之阳早格格创做①包被液：0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)0.75g碳酸钠,1.46g碳酸氢钠,加来离子火定容至500ml.②0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)0.2g磷酸二氢钾，2.90g磷酸氢二钠，8g氯化钠，加来离子火定容到1000ml.③抗体密释液：0.02mol/L PBS(pH7.4)+0.2%BSA0.2gBSA加配佳的0.02mol/L磷酸盐缓冲液溶解定量至100g.④启关液：0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)+2.0%BSA2.0gBSA加配佳的0.05mol/L碳酸盐缓冲液溶解定量至100g.⑤洗涤液：0.02mol/L PBS(pH7.4)+0.05%Tween-20将50ulTween-20溶进100ml0.02mol/L磷酸盐缓冲液中，震荡混匀.⑥隐色液：TMB-过氧化氢尿素溶液A液(3，3’，5，5’-四甲基联苯胺，TMB):称与TMB20mg溶于10ml无火乙醇中，实足溶解后，加单蒸火至100ml.B液(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸氢二钠缓冲液，pH5.0-5.4):称与Na2HPO4·12H2O14.34g，柠檬酸1.87g溶于180ml单蒸火，加0.75%过氧化氢尿素1.28ml，定容至200ml，调pH至5.0-5.4.将A液战B液按1：l混同后即成TMB-过氧化氢尿素应用液.⑦终止液：2mol/L H2SO4溶液10ml98%浓硫酸加进60ml单蒸火中，定容至100ml，室温保存.⑧酶标二抗：HRP标记表记标帜的羊抗兔 IgG，应用时用抗体密释液密释3000倍.2.2.6 抗血浑的分散支集血液后，来掉针头，缓缓注进已经灭菌的三角烧瓶中，待凝固后用灭菌滴管将血液沿边沿剥离，室温搁置1小时，再搁进4℃冰箱过夜(没有克没有及冰冻，可则爆收溶血)，使血浑充分解出.第二天与出后以4℃3000r/min离心30min，与上浑，分拆后-20℃保存备用.间交ELISA法检测家兔抗血浑效价(1)抗本包被用包被液(0.05mol/L的碳酸盐缓冲液，pH9.6)把抗本密释为0.01mg/ml，将密释佳的抗本液于每个酶标板孔中加进100μl.把酶标板置进干盒内，于4℃包被过夜.(2)洗板弃来包被液，用洗涤液加谦所有酶标孔，用纱布战卫死纸包住扣搞.1次，终次将火扣搞.(3)启关正在酶联板上每孔加进250μl启关液(pH9.6，0.05mol/L碳酸盐缓冲液含2.0%BSA)，将酶联板置于干盒内，4℃孵育过夜.也可37℃孵育2h.(4)弃来启关液，洗涤1次共上.(5)加一抗(家兔抗血浑)将免疫小鼠抗血浑10μl 加到990μl 的抗体密释液中造成1:100的抗血浑.(于1.5ml的EP管中支配).给酶标板上A止的1号孔加100μl的1:100的血浑.给酶标板上A止的2到12孔各加进抗体密释液100 μl，而后给A组的第二孔加进100μl 1:100的抗血浑，吹吸十次后吸与100μl的血浑加到第三孔，再吹吸十次与100μl加到第四孔，依次加到第12孔，终尾从第十二孔中吸出100μl放弃.那样每孔均为100μl，通过11次二倍密释，血浑密释度为1:204800.B、C止共上支配.给D止的前二个孔只加进100μl的抗体密释液搞为空黑对于照，3-4孔加进100μl密释100倍的阳性血，5-6孔没有加抗本，只用启关液启关，每孔加进100μl密释100倍的抗血浑做对于照.加完后将酶连板搁正在干盒内37℃孵育1h.(6)洗涤共上.(7)加酶标二抗各孔加进密释倍数为1:3000的酶标二抗（羊抗兔）100μl，37℃干盒内孵育1h.(8)洗涤共上(9)隐色每孔各加A，B液50μl后将酶连板搁进干盒内躲光3min安排，当阳性对于照孔隐蓝绿色时终止.终止时每孔加进50μl的2mol/L浓硫酸[32-34].(10)检测终止后赶快用酶标仪测定酶连板各孔A405战A450的值.。
碳酸氢钠碳酸钠缓冲液的配置
碳酸氢钠碳酸钠缓冲液的配置
碳酸氢钠碳酸钠缓冲液是一种常用的缓冲液，可以用于调节溶液的pH 值。
它的配置方法如下：
1. 准备所需试剂：碳酸氢钠（NaHCO3）、碳酸钠（Na2CO3）、去离子水。
2. 根据所需pH值和缓冲液体积，计算所需的碳酸氢钠和碳酸钠的摩尔浓度。
碳酸氢钠和碳酸钠的摩尔浓度比应为1:1，可以根据以下公式计算：
C1 = 10^(pKa - pH)
C2 = 10^(pH - pKa)
其中，C1为碳酸氢钠的摩尔浓度，C2为碳酸钠的摩尔浓度，pKa为碳酸氢钠和碳酸钠的共同pKa值，pH为所需的缓冲液pH值。
3. 根据计算得到的摩尔浓度和缓冲液体积，计算所需的碳酸氢钠和碳酸钠的质量。
可以使用以下公式：
m1 = C1 * V * M1
m2 = C2 * V * M2
其中，m1为碳酸氢钠的质量，m2为碳酸钠的质量，V为缓冲液体积，M1和M2分别为碳酸氢钠和碳酸钠的摩尔质量。
4. 将计算得到的碳酸氢钠和碳酸钠分别加入到去离子水中，搅拌至完
全溶解。
5. 根据需要，可以使用酸或碱调节缓冲液的pH值。
需要注意的是，碳酸氢钠碳酸钠缓冲液的pH值受温度影响较大，因
此在配置时应注意控制温度。
此外，碳酸氢钠碳酸钠缓冲液的pH值
范围较窄，一般适用于pH值在8.0-10.0之间的实验。
如果需要在其
他pH值范围内进行实验，可以选择其他适合的缓冲液。
碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05molL,pH9.6)
北京雷根生物技术有限公司 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pH9.6) 简介：平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
Leagene 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pH9.6)主要由碳酸钠、碳酸氢钠、防腐剂等组成，pH 值为9.6，主要用于ELISA 实验中包被96孔板的孔，与ELISA 包被缓冲液(1×)极其相似。
该试剂为1×工作液，直接使用，仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗 组成：操作步骤(仅供参考)：1、 在实验前一天，用BSA 或其他包被用物质溶解于碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pH9.6)，包被96孔板。
2、 注意不要包被用作空白对照的孔，用塑料膜包裹平板，4℃温育过夜。
注意事项：1、 注意密闭保存，避免挥发。
一旦开封，保质期就会大大缩短。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
亦可短期内室温存储。
相关：编号 名称 IT0243 Storage 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pH9.6) 500ml 4℃ 使用说明书 1份编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) CS0001 ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) DF0111中性福尔马林固定液(10%) DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液 TC0699葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) TC1167 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1.氯化钾-盐酸缓冲液(0・2mol/L)邻苯二甲酸氢钾：分子量=204.23,0.2mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L 4.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)pH0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L柠椽酸(mL)2.2 0.40 10.60 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85Na2HPO4分子量=141.98,0.2mol/L溶液为28.40g/L。
Na2HPO4・2H2O分子量=178.05,0.2mol/L溶液含35.61g/L。
C6H8O7•H2O分子量=210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。
5.使用时可以向每升混合液中加入1g酚，若最后p H值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
6•柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0・1mol/L)柠檬酸C6H8O7・H2O：分子量210.14,0.1mol/L溶液为21.01g/L。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液含35.01克/升。
C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = 210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。
pH 4.0 20mL ：Na2HPO4 0.219g + C4H2O7·H2O 0.258g柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。
pH 4.0 20mL ： C4H2O7·H2O 0.275g + Na3 C6H5O7·2H2O 0.203g乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ）Na 2Ac·3H 2O 分子量= 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。
pH 4.0 20mL ：NaAc 0.098g + HAc 0.282mL甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）甘氨酸分子量=75.07; 0.2M溶液含15.01克/升。
pH 10.0 20mL ：甘氨酸0.075g + NaOH 0.013g碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+ 无水Na 2CO 2分子量=105.99;0.1M 溶液为10.60克/升。
Na 2CO 2·10H 2O 分子量=286.2;0.1M 溶液为28.62克/升。
Na 2HCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。
pH 10.0 20mL ：无水碳酸钠 0.127g +碳酸氢钠0.067g补注：pH 4.0 EDTA2-McIlvaine2O0. 05 mol/L EDTA（372.2）+ 0. 06 mol/L Na2HPO4·12HO（358.14）+ 0. 08 mol/L 柠檬酸（210.14）18. 61g/L EDTA + 21. 4884 g/L Na2HPO4·12HO + 16.8112 g/L 柠檬酸20mL 0. 372g EDTA + 0. 430 g Na2HPO4 ·12HO + 0.336 g 柠檬酸。
常用缓冲液的配制
常用缓冲溶液的配制（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋ Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。
pH X Y2.2 50 44.02.4 50 32.42.6 50 24.22.8 50 16.83.0 50 11.43.2 50 8.23.4 50 6.43.6 50 5.0甘氨酸分子量＝75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。
（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。
pH(20℃) X Y2.2 5 4.6702.4 53.9602.6 53.2952.8 5 2.6423.0 5 2.0323.2 5 1.4703.4 5 0.9902.6 5 0.5973.8 5 0.263邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。
（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2 mol/LNa2HPO4 (mL) 0.1 mol/L柠檬酸 (mL)2.2 0.40 19.602.4 1.24 18.762.6 2.18 17.822.83.17 16.833.04.11 15.893.24.94 15.063.4 5.70 14.303.6 6.44 13.563.8 7.10 12.904.0 7.71 12.294.2 8.28 11.724.4 8.82 11.184.6 9.35 10.654.8 9.86 10.145.0 10.30 9.705.2 10.72 9.285.4 11.15 8.855.6 11.60 8.405.8 12.09 7.916.0 12.637.376.2 13.22 6.786.4 13.85 6.156.6 14.55 5.456.8 15.45 4.557.0 16.47 3.537.2 17.39 2.617.4 18.17 1.837.6 18.73 1.277.8 19.15 0.858.0 19.45 0.55Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。
常用缓冲溶液的配制
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L ）X 毫升0.2 mol/L 甘氨酸+Y 毫升0.2 mol/L HCI ，再加水稀释至200毫升 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L 甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L ）X 毫升0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl ，再加水稀释到20毫升 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ）Na2Ac·3H2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。
pHXYpHXY2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.83.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0 pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y 2.2 2.4 2.6 2.8 3.05 5 5 5 54.0703.9603.2952.6422.0223.2 3.4 3.6 3.85 5 5 51.4700.9900.5970.263pH(18℃) 0.2 mol/L NaAc (毫升) 0.3 mol/L HAc(毫升)pH(18℃) 0.2 mol/L NaAc (毫升) 0.3 mol/LHAc(毫升)2.63.84.0 4.2 4.4 4.6 0.75 1.20 1.80 2.65 3.70 4.90 9.25 8.80 8.20 7.35 6.305.10 4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 5.90 7.00 7.90 8.60 9.10 9.40 4.10 3.00 2.10 1.40 0.90 0.604. 磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。
缓冲液配制方法
25.5
5.8
42.3
4.5
8.7
5.2
28.8
5.9
43.7
4.6
11.1
5.3
31.6
4.7
13.6
5.4
34.1
邻苯二甲酸氢钾Mr = 204.23，0.1mol/L溶液为20.42g/L
9．磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠—磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4/ml
pH
Na＋浓度
/mol/L
柠檬酸/g
C6H8O7·H2O
氢氧化钠/g
NaOH(97%)
盐酸/ml
HCl(浓)
最终体积/L*
2.2
0.20
210
84
160
10
3.1
0.20
210
83
116
10
3.3
0.20
210
83
106
10
4.3
0.20
210
83
45
10
5.3
0.35
245
144
68
10
5.8
0.45
50
11.0
10.0
50
43.0
9.6
50
23.0
10.1
50
46.0
硼砂Na2B4O7·10H2O，Mr = 381.43，0.05mol/L溶液为19.07g/L
硼砂/ml
0.2mol/L
硼酸/ml
7.4
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
7.6
1.5
常用缓冲溶液的配置方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01 g/L。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
① 使用时可以每升中加入1g 酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41 g/L 。
227．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L ）Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·12H2O分子量= 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，1/15M溶液为11.876克/升。
KH2PO4分子量= 136.09，1/15M溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M 溶液为8.25克/升10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃）50毫升0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris ）溶液与X 毫升0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至100吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M 硼酸根）硼砂Na 2B 4O 7·H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含19.07克/升。
常见缓冲液配制
常用缓冲溶液的配制（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。
甘氨酸分子量＝75.07。
0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。
（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。
邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。
0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。
（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。
Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
（四）柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
（五）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）柠檬酸：C6H8O7·H2O分子量＝210.14 ；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。
（六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L）NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。
冰乙酸11.8 mL稀释至1 L（需标定）。
（七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L）X 毫升0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）甘氨酸分子量= 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量= 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1mol/L溶液为29.41克/毫升。
7．磷酸盐缓冲液242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。
NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。
各种缓冲液的缓冲范围
各种缓冲液的缓冲范围缓冲pH范围缓冲液名称及常用浓度MES (2吗啉代乙磺酸) 5.5-6.7 Bis-Tris5.8-7.26.8-8.2 HEPESPIPES6.1-7.56.5-7.9 MOPS7.4-8.8 TricineTEA (三乙醇胺)7.4-8.32.2-5.0甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L）2.2-3.8 邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L）2.2-8.0 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液2.2-6.5 柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液3.0-6.6柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2mol/L）3.6-5.84.1-5.9 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液5.8-8.0 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L）4.92-8.185.8-8.0磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L）6.8-9.6 巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)7.10-9.00 Tris-盐酸缓冲液(0.05mol/L 25℃)8.6-10.6 甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L)硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 9.3-10.1 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1mol/L) 9.16-10.83碳酸钠-氢氧化钠缓冲液(0.025mol/L) 9.6-11.010.9-12.0磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液氯化钾-盐酸缓冲液（0.2mol/L） 1.0-2.2 氯化钾-氢氧化钠缓冲液（0.2mol/L） 12.0-13.0主要物质分子量195.2209.2238.3302.4209.3179.2149.2甘氨酸Mr=75.07邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23磷酸氢二钠Mr=141.98柠檬酸Mr=192.06柠檬酸Mr=192.06 柠檬酸钠Mr=257.96乙酸钠Mr=81.76 乙酸Mr=60.05邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23磷酸氢二钠Mr=141.96 g/mol磷酸二氢钠Mr=119.98 g/mol巴比妥钠Mr=206.18三羟甲基氨基甲烷（Tris）Mr=121.14甘氨酸Mr=75.07 硼砂Na2B4O7?10H2O Mr=381.43碳酸钠Mr=286.2 碳酸氢钠Mr=84.0氯化钾Mr=74.55 氯化钾Mr=74.55。
碳酸盐缓冲液(0.1molL,pH9.2)
北京雷根生物技术有限公司
碳酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH9.2)
简介：
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。
碳酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH9.2)主要由碳酸钠、碳酸氢钠组成，其碳酸根为0.1M ，pH 值为9.2，主要用作酶与抗体的偶联的缓冲液或其他常规用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 无需配制，直接使用。
2、 注意密闭保存，防止挥发。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
编号 名称 IH0240 Storage 碳酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH9.2) 500ml RT 使用说明书 1份。
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
7．磷酸盐缓冲液Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。
Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。
NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。
常用的碳酸缓冲盐浓度
常用的碳酸缓冲盐浓度
常用的碳酸缓冲盐浓度为0.1mol/L。
碳酸缓冲盐常用的就是碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液。
以总浓度0.1mol/L 的为例，常见做法是分别先配置0.1mol/L的碳酸钠和碳酸氢钠溶液，然后向碳酸氢钠溶液里滴加碳酸钠溶液，用pH计监测pH值，到9之后停止。
事实上缓冲溶液的配置不会特别准确，不论是浓度还是pH值都很难控制到想精确达到的值。
不过缓冲溶液一般也不用配的很准，差不多就可以用了。
所以这里给出一个简单一些的配置方法，还是0.1mol/L，直接将此浓度的碳酸钠和碳酸氢钠溶液按照1:9混合，就能得到8.9~9.2左右pH值的缓冲溶液，室温温度越高，pH值越低。
间接ELISA使用溶液的配制
间接ELISA使用溶液的配制E1 碳酸盐缓冲液（0.05mol/L，Ph9.6，CBS）碳酸钠 1.59g碳酸氢钠 2.93g用双蒸水溶解至1000mL，于4℃保存，不超过1个月。
E.2 磷酸盐缓冲液（0.01mol/L，pH7.4，PBS）氯化钠8g磷酸二氢钠0.2g磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H20） 2.9g氯化钾0.2g加蒸馏水至1000mL。
E.3洗液（含0.05%Tween-20的0.01mol/L、PH 7.4的PBS，即PEST）Tween-20 0.5mL加0.01mol/I、pH7.4的PBS至1000mL。
E.4封闭液（含0.5%BSA的PBST）牛血清白蛋白（BSA）0.5g加洗液至100mL4℃存放，避光。
E.5 稀释液（含0.1%BSA的PBST）牛血清白蛋白（BSA）0.1g加洗液至100mL。
4℃存放，避光。
E.6 间接ELISA底物缓冲液（磷酸氢二钠一柠檬酸，pH5.4）0.2mol/I磷酸氢二钠（Na2HP4·12H20）26.7mL0.1mol/I柠檬酸24.3mL双蒸水49mL准确称量40mg邻苯二胺（OPD），溶解后置暗处保存，临用前加人30%过氧化氢150μL。
用时现配，避光。
E.7 三羟甲基氨基甲烷一盐酸（Tris-HCI）缓冲液（0.05 mol/L pH 7.6）0.1mol/LTris 250mL0.1moll盐酸192.5mL双蒸水57.5ml E.8 间接ELISA终止液浓硫酸11.1 mL蒸馏水88.9 mL。
elisa实验步骤
elisa实验步骤酶联免疫吸附实验材料，试剂，溶液1．酶标板，100μltip头，1ml Ep管，湿盒2．包被稀释液（0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠buffer,pH 9.6）碳酸钠0.15g,碳酸氢钠0.29g,叠氮钠0.02g,加双蒸水至100ml,调至pH 9.63. 封闭液(5%小牛血清/PBS溶液)小牛血清5ml, 1*PBS(pH 7.4)95ml4. 洗涤液(PBST, pH 7.4)NaCl 0.8g, KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O 0.29g, KCl 0.02g,Tween20 0.05ml,叠氮钠0.01g,加双蒸水至100ml,调至pH 7.45. 样本稀释液(PBS, pH 7.4)NaCl 0.8g, KH2PO40.02g,Na2HPO4.12H2O 0.29g, KCl 0.02g,叠氮钠0.01g,加双蒸水至100ml,调至pH 7.46. 酶标第2抗体(羊抗兔)稀释范围1:5,000-1:100,0007. 底物液(TMB-过氧化氢尿素溶液)①底物液A:TMB20mg,无水乙醇10ml,加双蒸水至100ml.②底物液B(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸二氢钠缓冲液, pH 5.0-5.4)Na2HPO41.46g, 柠檬酸0.933g, 0.75%过氧化氢尿素0.64ml, 加三蒸水至100ml,调至pH 5.0-5.4③底物A和B按1:1混合即成TMB-过氧化氢尿素溶液.8. 终止液(2mol/LH2SO4溶液)双蒸水200ml,浓硫酸34ml,(缓慢滴加并不断搅拌),加双蒸水至300ml9. 0.9%生理盐水操作步骤:1. 包被过程(注意设置空白对照,阴性对照):将所用抗原用包被稀释液稀释到适当浓度(一般所需抗原包被量为每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl, 置37℃,4h,或4℃,24h;弃去孔中液体.(为避免蒸发,板上应加盖或将板平放在底部有湿纱布的金属湿盒中)2. 封闭酶标反应孔:5%小牛血清置37℃封闭40min.封闭时将封闭液加满各反应孔,并去除各孔中的气泡,封闭结束后用洗涤液满孔洗涤3遍,每遍3min.洗涤方法:吸干孔内反应液,将洗涤液注满板孔,放置2min略作摇动,吸干孔内液,倾去液体后在吸水纸上拍干。
常用缓冲液配方
常见缓冲液的缓冲范围缓冲液名称及常用浓度缓冲pH范围主要物质分子量MES (2吗啉代乙磺酸) 5.5-6.7 195.2Bis-Tris 5.8-7.2 209.2HEPES 6.8-8.2 238.3PIPES 6.1-7.5 302.4MOPS 6.5-7.9 209.3Tricine 7.4-8.8 179.2TEA (三乙醇胺) 7.4-8.3 149.2甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2.2-5.0 甘氨酸Mr=75.07邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L）2.2-3.8 邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23 磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 2.2-8.0 磷酸氢二钠Mr=141.98柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 2.2-6.5 柠檬酸Mr=192.06柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）3.0-6.6 柠檬酸Mr=192.06 柠檬酸钠Mr=257.96 乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2mol/L） 3.6-5.8 乙酸钠Mr=81.76 乙酸Mr=60.05 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液 4.1-5.9 氢钾Mr=204.23磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L） 5.8-8.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15 molL） 4.92-8.18磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05mol/L） 5.8-8.0巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃) 6.8-9.6 巴比妥钠Mr=206.18 Tris-盐酸缓冲液(0.05mol/L 25℃) 7.10-9.00 三羟甲基氨基甲烷（Tris）Mr=121.14 甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 8.6-10.6 甘氨酸Mr=75.07硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L) 9.3-10.1 硼砂Na2B4O7?10H2O Mr=381.43 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1mol/L) 9.16-10.83 碳酸钠Mr=286.2 碳酸氢钠Mr=84.0 碳酸钠-氢氧化钠缓冲液(0.025mol/L) 9.6-11.0磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液10.9-12.0氯化钾-盐酸缓冲液（0.2mol/L） 1.0-2.2 氯化钾Mr=74.55氯化钾-氢氧化钠缓冲液（0.2mol/L）12.0-13.0 氯化钾Mr=74.55参考下图：常见缓冲液的缓冲范围参考下图：常见缓冲液的缓冲范围常用缓冲液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M甘氨酸+Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾+Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X Y pH X Y2.2 5 4.6703.2 5 1.4702.4 53.960 3.4 5 0.9902.6 53.295 3.6 5 0.5972.8 5 2.6423.8 5 0.2633.0 5 2.032邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸/ml pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸/ml 2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.282.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.852.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.783.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.534.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.614.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.834.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.855.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55Na2HPO4分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/LNa2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/LC6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度/M 柠檬酸C6H8O7·H2O/g 氢氧化钠NaOH/g 浓盐酸HCl/ml 终体积/L2.2 0.20 210 84 160 103.1 0.20 210 83 116 103.3 0.20 210 83 106 104.3 0.20 210 83 45 105.3 0.35 245 144 68 105.8 0.45 285 186 105 106.5 0.38 266 156 126 10使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
常用缓冲溶液常用浓度及pH范围
三羟甲基氨基甲烷（Tris）Mr=121.14
硼砂-盐酸缓冲液(0.05mol/L)
8.0-9.1
硼砂Na2B4O7·10H2OMr=381.43
硼酸-硼砂缓冲液(0.2mol/L)
7.4-8.0
硼砂Na2B4O7·10H2O Mr=381.4
H3BO3Mr=61.84
甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L)
8.6-10.6
甘氨酸Mr=75.07
硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05mol/L)
9.3-10.1
硼砂Na2B4O7·10H2O Mr=381.43
碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1mol/L)
9.16-10.83
碳酸钠Mr=286.2
碳酸氢钠Mr=84.0
碳酸钠-氢氧化钠缓冲液(0.025mol/L)
9.6-11.0
柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液
2.2-6.5
柠檬酸Mr=192.06
柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）
3.0-6.6
柠檬酸Mr=192.06
柠檬酸钠Mr=257.96
乙酸-乙酸钠缓冲液（0.2mol/L）
3.6பைடு நூலகம்5.8
乙酸钠Mr=81.76
乙酸Mr=60.o5
邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液
4.1-5.9
常用缓冲溶液常用浓度及pH范围
缓冲液名称及常用浓度
配制pH范围
主要物质分子量Mr
甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L）
2.2-5.0
甘氨酸Mr=75.07
邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05mol/L）
2.2-3.8
邻苯二甲酸氢钾Mr=204.23
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碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pH9.6)
简介：
Leagene 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pH9.6)主要由碳酸钠、碳酸氢钠、防腐 剂等组成，pH 值为 9.6，主要用于 ELISA 实验中包被 96 孔板的孔，与 ELISA 包被缓冲液(1 ×)极其相似。该试剂为 1×工作液，直接使用，仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗
名称 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) 中性福尔马林固定液(10%) 瑞氏-姬姆萨复合染色液 葡植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法) 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)
2、 注意不要包被用作空白对照的孔，用塑料膜包裹平板，4℃温育过夜。
注意事项：
1、 注意密闭保存，避免挥发。一旦开封，保质期就会大大缩短。 2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12 个月有效。亦可短期内 CS0001 DF0111 DM0007 TC0699 TC1167
组成：
编号 名称 碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.05mol/L,pH9.6) 使用说明书
IT0243 Storage
500ml
4℃
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 在 实 验 前 一 天 ， 用 BSA 或 其 他 包 被 用 物 质 溶 解 于 碳 酸 钠 - 碳 酸 氢 钠 缓 冲 液 (0.05mol/L,pH9.6)，包被 96 孔板。